低剂量环磷酰胺联合胸腺肽疗法对尖锐湿疣角质形成细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨低剂量环磷酰胺联合胸腺肽疗法对尖锐湿疣(CA)角质形成细胞(KCs)增殖及凋亡的影响。方法观察华中科技大学同济医学院附属同济医院皮肤科55例完成该疗法治疗1个月的CA患者的疗效,从有效病例中随机抽取20例,用免疫组化ABC法检测治疗前后疣体中KCs增殖指标Ki-67及凋亡指标Cleaved Caspase-3的表达情况;同时用原位杂交技术、实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测其治疗前后疣体HPV阳性细胞表达及HPV6/11-DNA载量变化。结果20例有效患者中治疗前Ki-67阳性表达率为80%(16/20),治疗后Ki-67阳性表达率45%(9/20);治疗前Cleaved Caspase-3阳性表达率35%(7/20),治疗后Cleaved Caspase-3阳性表达率75%(15/20);治疗后HPV6/11-DNA拷贝数量级(106)较治疗前(109)明显下降(P<0.01)。结论低剂量环磷酰胺联合胸腺肽治疗1个月后,患者疣体内KCs增殖能力下降、凋亡能力增强;患者疣体HPV病毒载量消减达103个数量级。

小剂量环磷酰胺治疗尖锐湿疣对角质形成细胞的干细胞性及分化影响

目的研究小剂量环磷酰胺(CTX)治疗尖锐湿疣(CA)对表皮角质形成细胞(KCs)的干细胞性及分化的影响。方法20例初发CA患者作为对照组(CA组);8例小剂量CTX治疗CA患者为治疗组(CTX组),10例正常包皮环切患者为空白对照组(NS组)。采用免疫组化方法,对比研究表皮干细胞标志物P63和整合素α6(ITGA6)以及成熟KCs标志物K10在3组之间的表达差异。结果P63及ITGA6表达:NS组中主要表达于基底层;CA组表达量较NS组增多(P<0.01),而且表达部位不仅局限于基底层,在靠近基底层的棘层中也存在较多阳性表达;CTX组表达较CA组明显减少(P<0.01),阳性表达位置主要在基底层,而靠近基底层的棘层中仅有少量表达。K10表达:NS组表达于基底层以上的表皮结构中,基底层表达为阴性;CA组表达量较NS组明显减少(P<0.01),基底层不表达;CTX组中表达量较CA组明显增加(P<0.01)。结论小剂量CTX疗法治疗后能使CA疣体中KCs的干细胞性减弱,而细胞终末分化能力增强。

循环肿瘤细胞检测技术及临床应用研究进展

早在1869年，Ashworth[1]在1例因癌症死亡的患者血液中发现一种细胞类似于尸检发现的肿瘤细胞，首次提出循环肿瘤细胞（circulating tumor cells，CTC）的概念。目前CTC定义为自发或因诊疗操作过程中由实体瘤或转移灶释放进入外周血循环的肿瘤细胞，大部分肿瘤细胞进入循环系统后被免疫系统识别并清除，但是少量肿瘤细胞会获得新的特征而在血液中存活，这些细胞即是CTC，其通过迁移、黏附、相互聚集形成微小癌栓，并在一定条件下发展为转移灶。

药动学/药效学模型研究抗CD3/EpCAM双特异性抗体M701在人结肠癌异种移植小鼠中的抗肿瘤作用

M701为抗分化簇3/表面上皮细胞黏附因子(cluster of differentiation 3/epithelial cell adhesion molecule,CD3/EpCAM)的双特异性抗体,拟用于治疗癌细胞腹腔转移引起的恶性腹水。本研究应用群体模型方法,构建M701在人结肠癌异种移植小鼠中的药动学/药效学(pharmacokinetic/pharmacodynamics,PK/PD)模型,定量描述和预测M701在人结肠癌异种移植小鼠中的抗肿瘤作用。基于人结肠癌异种移植小鼠单次给药后不同时间点血浆药物浓度,构建PK模型。基于人结肠癌异种移植小鼠(32只)在33天的肿瘤体积随时间变化曲线,构建对照组及给药组结肠癌小鼠的肿瘤生长模型。所有动物实验均严格遵守武汉友芝友公司动物实验福利规定。使用非线性混合效应模型(nonlinear mixed-effect modeling,NONMEM)构建M701药动学和肿瘤生长模型,并且进行模型验证评价。基于PK/PD模型,仿真不同给药方案下M701对肿瘤体积生长的抑制效果。选择二室模型描述M701静脉给药后人结肠癌异种移植小鼠体内的PK特征。使用Simeoni串联转移隔室模型描述在人结肠癌异种移植小鼠中M701药物浓度与肿瘤生长抑制之间的关系。肿瘤生长模型预测参数包括肿瘤生长特征参数λ0(0.212 d^(-1))、λ1(0.0447 cm3·d^(-1))、药物效应参数k2(0.0715 mL·ng^(-1)·d^(-1))及肿瘤凋亡动力学参数k1(2×10^(-5)d^(-1))。可视化预测检测(visual predictive check,VPC)结果显示,PK模型及肿瘤生长模型的预测结果均能很好地拟合观测数据。PK/PD模型仿真结果显示,每6日静脉注射0.5 mg·kg^(-1)及每3日静脉注射0.25 mg·kg^(-1)可有效抑制小鼠肿瘤体积生长。本研究成功构建了M701在人结肠癌异种移植小鼠中的PK/PD模型,定量研究了M701在人结肠癌异种移植小鼠的抗肿瘤效果,为新化合物M701的进一步药物研发提供参考。