5'-氮杂胞苷对激素性股骨头坏死骨髓间充质干细胞分化作用的实验研究

[目的]探讨5＇-氮杂胞苷（5＇-Azacytidine,5＇-Aza-dc）对激素性股骨头坏死患者骨髓间充质干细胞（human mesenchymal stem cells,h MSCs）增殖能力的影响及其对成骨、成脂分化能力的作用。[方法]2012年8月-2013年4月,经患者知情同意和武汉协和医院伦理委员会审批后,选取22例激素性股骨头坏死患者和20例的股骨颈骨折患者,在严格无菌条件下抽取患者股骨骨髓,经密度梯度离心法体外分离、培养h MSCs,贴壁细胞传代,取第3代细胞实验,使用流式细胞仪进行细胞表面抗原标记物检测,确定最适5＇-氮杂胞苷干预浓度后干预培养72 h,随后对三组h MSCs进行成骨、成脂分化诱导培养2周,接着对细胞进行碱性磷酸酶含量测定（alkaline phosphatase,ALP）、茜素红和油红O染色,分析实验结果。[结果]激素性股骨头坏死组h MSCs集落形成能力比正常对照组有显著下降（P〈0.001）。使用15μmol/L 5＇-Aza-dc干预培养后能在一定程度上促进激素性股骨头坏死组h MSCs增殖能力,且干预培养72 h的h MSCs在成脂分化诱导培养2周后,通过油红O染色发现其成脂分化能力接近正常对照组,而5＇-Aza-dc干预培养72 h的h MSCs在成骨分化诱导培养2周后,根据碱性磷酸酶检测、茜素红染色发现其成骨分化潜能较干预前明显提高,并接近正常对照组水平。[结论]15μmol/L 5＇-氮杂胞苷干预培养激素性骨坏死患者hMSCs,通过改变细胞成骨和成脂分化的平衡,能促进细胞的增殖能力,使成骨能力加强、成脂能力减弱。