1例嵌合型Klinefelter综合征患者细胞与分子遗传学研究

目的:观察嵌合型Klinefelter综合征的外周血染色体、Y染色体上SRY基因和AZF基因微缺失发生情况。方法:对1例嵌合型Klinefelter综合征患者及父母进行外周血染色体核型分析,确定9个实验用序列标签位点(STS),分别是:sY84、sY86、sY127、sY129、sY134、sY254、sY255、sY242、sY152,同时检测SRY基因,并以X/Y连锁锌指蛋白基因(ZFX/ZFY)为内对照进行多重PCR筛查AZF微缺失。结果:患者核型为46,XY/47,XXY/48,XXYY/49,XXXXY,其中48,XXYY占56%;47,XXY占30%;46,XY占12%;49,XXXXY占2%,患者父母核型正常;患者及父母SRY基因检测与染色体性别一致,患者检出Y染色体AZF微缺失,缺失位点为sY86和sY127,缺失类型为AZFa+AZFb缺失。结论:Klinefelter综合征患者存在Y染色体AZF微缺失,染色体核型分析和Y染色体AZF微缺失是Klinefelter综合征患者重要的遗传检测指标。

应用三联PCR技术产前诊断假性肥大型进行性肌营养不良的研究

目的通过对两例散发的BMD家系中的先证者和胎儿进行DMD基因和SRY基因分析,拟建立一种快速、准确、适用于临床的DMD/BMD的产前基因诊断方法。方法提取羊水细胞基因组DNA,通过检测SRY基因鉴定胎儿性别,以多重PCR方法对DMD基因缺失热区的18个外显子进行基因缺失的筛查,结合4对STR引物(内含子44、45、49、50)进行短串联重复序列多态性连锁分析(STR-PCR),分析结果经DNA测序验证。结果 SRY基因分析结果显示家系1胎儿为女性,家系2胎儿为男性,与超声诊断结果一致。两例BMD先证者均未检测到18个外显子的缺失,两家系的母亲及家系1的女性胎儿均为BMD基因STR-49位点杂合子,家系2的男性胎儿为BMD。同时发现了STR45、STR50的非常见基因型。结论应用SRY基因检测胎儿性别及多重PCR方法对DMD基因外显子缺失的检测,结合STR-PCR技术检出非缺失型携带者并行产前诊断,此三联PCR方法具有快速、简便、直观可靠的特点,特异性高,实验可操作性强,适用于临床推广应用。

骨靶向帕珠沙星的制备及其体外研究

目的制备以双膦酸为骨导向物质，以氧化葡聚糖为中间体的骨靶向帕珠沙星复合物，并作相关体外亲骨性和抗菌活性研究。方法将葡聚糖（T-40）用高碘酸钠氧化为氧化葡聚糖，再依据希弗碱合成原理，分别将双膦酸和帕珠沙星枝接于氧化葡聚糖上，制备出骨靶向帕珠沙星复合物，并将各步产物进行红外和核磁共振检测表征。运用羟基磷灰石吸附试验，测定骨靶向药物的体外亲骨性；用微量肉汤稀释法测定大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌3株标准菌株的最小抑菌浓度（MIC），确定其体外抗菌活性。结果成功合成具有骨靶向性的帕珠沙星抗生素，其载药量为4．65％；羟基磷灰石吸附率为87．91％；对3株标准菌株的MIC均高于原料药帕珠沙星。结论合成的骨靶向性帕珠沙星，具有良好的体外亲骨性，但其体外抗菌活性有所降低。