液相色谱-质谱联用技术在临床检验中的应用与发展

液相色谱．质谱联用技术近年来在临床检验领域发展迅速，现已广泛应用于新生儿遗传代谢性疾病筛查、药物浓度监控、激素检测等多个项目中。与传统免疫法相比，该技术表现出更高的灵敏度和特异性，并可实现多组分同时分析，显著提高了单次检测的通量。可以预见在逐步完善人才培养、质量评价、检测方法标准化等方面存在的缺陷后，液相色谱一质谱联用技术将成为日常临床检验中不可或缺的组成部分。

超高效液相色谱－串联质谱检测血浆抗精神分裂症药物浓度方法学的建立及药物浓度参考范围的评价

目的利用超高效液相色谱－串联质谱（UPLC－MS/MS）建立一种检测抗精神分裂症药物浓度的方法，检测血浆阿立哌唑、氨磺必利、奥氮平、帕利哌酮和齐拉西酮的浓度，并且对药物浓度的参考范围进行评价。方法方法学建立及评价。根据美国食品药品监督管理局和美国临床实验室标准协会相关指南，评估所建立UPLC－MS/MS方法学的选择性、准确度、精密度、稳定性和线性范围。通过分析253份临床标本的检测结果，其中男107例（36.2±17.1）岁，女146例（34.2±15.6）岁根据新版德国精神类药物浓度监控指南中推荐药物治疗的参考区间，评估中国患者的符合情况。结果本研究建立的UPLC－MS/MS可同时检测五种抗精神分裂症药物浓度。阿立哌唑、氨磺必利、奥氮平、齐拉西酮和帕利哌酮的定量限（LOQ）分别为3.0、0.1、0.3、9.0和0.3 ng/ml，具有较高的灵敏度。五种药物在相应浓度范围内线性相关系数均〉0.997 7，日内及日间精密度均小于11.1%，回收率为86.2%～104.8%。所测临床标本中阿立哌唑（255.5±121.8）ng/ml、帕利哌酮（37.9±20.0）ng/ml、奥氮平（45.8±21.9）ng/ml和齐拉西酮（70.2±41.8）ng/ml的浓度区间与指南中推荐参考区间呈良好的一致性。对于氨磺必利，本研究所得浓度水平（445.2±231.5）ng/ml明显高于指南中推荐水平（100～320 ng/ml）。结论本研究成功建立了同时分析多种药物的UPLC－MS/MS方法，且可应用于临床抗精神分裂症药物浓度监控。

个体化医疗中分子诊断适宜技术

随着基因组学、生物信息学、T程学、计算机学等多学科的交叉和融合，分子诊断技术得到迅猛发展。越来越多的分子诊断技术应用于疾病的预防、诊断、治疗和预后判断，这为检验医学的发展提供巨大的机遇和挑战。不同的分子诊断技术有其相应的临床使用范围，如何选择适宜的分子诊断技术用于个体化医疗是当前检验科面临的关键问题。r中华检验医学杂志，2014，37：324-326）

不同遗传型Alport综合征肾小球超微结构分析

目的分析不同遗传型Alport综合征(AS)肾小球超微结构特点,为该疾病的诊治提供可靠的病理依据.方法回顾性分析2015年11月至2018年9月湖北省及周边省市近30所医院送检至武汉大学人民医院超微病理中心肾穿刺活检患者中首次明确诊断为AS的95例患者临床及病理资料,并对AS遗传型与肾小球超微结构特征关系进行统计学分析.结果 95例AS患者肾小球超微结构主要有2种病理表现,其中肾小球基底膜广泛菲薄或伴不典型致密层撕裂分层者(不典型改变)占43.2%(41/95),肾小球基底膜部分或广泛不规则增厚伴致密层撕裂分层者(典型改变)占56.8%(54/95);在明确遗传型的80例AS患者中X连锁显性遗传型(X-linked Alport syndrome,XLAS)占82.5%(66/80),常染色体隐性遗传型(autosomal recessive Alport syndrome,ARAS)占17.5%(14/80),其中典型改变在XLAS中的比率为43.9%(29/66),在ARAS中的比例为11/14,肾小球基底膜超微结构改变在不同遗传型间的差异有统计学意义(P=0.037);典型改变在XLAS患者男性中占58.3%(21/36),女性中占26.7%(8/30),XLAS患者肾小球基底膜超微结构改变在不同性别间差异有统计学意义(P=0.013).结论在疾病早期ARAS和XLAS男性患者相较于XLAS女性患者肾小球基底膜超微结构改变典型.肾小球基底膜不典型改变在XLAS女性患者中较为常见.

超高效液相色谱-串联质谱检测血浆咖啡因浓度方法的建立和临床应用

目的建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法检测血浆咖啡因浓度,评价咖啡因药物浓度监控(TDM)在早产儿呼吸窘迫综合征(RDS)治疗中的临床应用价值。方法取血浆样本于离心管中,加入咖啡因氘代同位素内标,再加入蛋白沉淀剂,充分涡旋混合后,离心取上层清液进入质谱分析。流动相为甲醇和水,梯度洗脱;柱温45℃,使用岛津LC-30AD-CL液相系统和AB SCIEX 4500 QTRAP质谱仪建立方法,并对该方法的敏感度、特异度、线性、准确度、不精密度、基质效应、携带污染进行评估。纳入2021年2至4月就诊于武汉大学人民医院新生儿科诊断为新生儿RSD的患者30例,检测不同RDS早产儿相同给药方案下的咖啡因谷值浓度以评估个体变异对咖啡因药物浓度的影响。结果咖啡因的检出限为0.02μg/ml,最低定量限为0.05μg/ml,在1.0~100.0μg/ml浓度范围内表现出良好的线性(R^(2)=0.9986,R>0.99)、特异度(回收率85.52%~114.12%)、准确度(回收率85.97%~114.53%)、日内和日间不精密度(CV 6.01%~11.28%),基质效应和携带污染可忽略不计。检测30例RSD早产儿相同给药方案(10 mg/kg)后的咖啡因谷值浓度为(25.45±11.61)μg/ml,变异系数为44.88%。结论成功建立了一种UPLC-MS/MS方法用于监测咖啡因血药浓度。咖啡因TDM具有一定的临床应用价值,可用于辅助RDS诊疗,提高咖啡因疗效。