诱导小鼠同种异体反应性T细胞凋亡

通过 Fas L - Fas途径诱导小鼠同种异体反应性 T细胞 (alloreactive T cells,ARTC)凋亡 ,为减轻异基因骨髓移植 (allo- BMT)后的移植物抗宿主病 (GVHD)探索新的手段。采用磁性细胞分离系统 (MACS)分离 BAL B/ c小鼠 (H- 2 d)干细胞抗原 (Sca) - 1+ 早期造血细胞 (early hematopoietic cells,EHC) ,然后与经丝裂霉素 C去增殖的能产生高滴度表达 m Fas L假病毒的逆转录病毒包装细胞 (PA317)共培养 ,进行 m Fas L c DNA基因转移 ;用含干细胞因子(SCF)、白细胞介素 - 3(IL- 3)和白细胞介素 - 6 (IL- 6 )的完全培养基培养 1周后 ,借助 PCR、RT- PCR、FCM技术检测外源 m Fas L c DNA在扩增的造血细胞 (HC)中的整合与表达效率 ;或与异基因 BAC小鼠 (H- 2 dxb)脾细胞进行单向混合淋巴细胞培养 (OWML C) ,6 d后用 Annexin V/ PI标记和 FCM检测 BAC脾细胞凋亡。结果显示 :用 MACS法成功分离出 BAL B/ c小鼠 Sca- 1+ EHC (1× 10 5个 /只 ) ,纯度为 (89.0± 6 .1) % ;经逆转录病毒法对它进行外源 m Fas Lc DNA转染并扩增 1周后 ,细胞总数达 2× 10 6 个 /只 ;基因组 DNA PCR和 RT- PCR证实 HC整合有 m Fas L c DNA和Neor基因 ,并表达外源基因 m RNA;FCM发现 m Fas L+ HC占 (43.9± 5 .6 ) % ,而用表达

诱导H-2半相合小鼠骨髓受体获得免疫赦免的体内研究

目的 通过Fas配体 (FasL) Fas途径清除异体骨髓移植 (allo BMT)物中针对受体主要组织相容复合物 (MHC)的淋巴细胞 ,从而抑制受体发生移植物抗宿主病 (GVHD)。方法 实验组 (5组 )用磁性细胞分离系统分离BALB/C小鼠 (H 2d ,雌性 )早期造血细胞 (HC) ,经逆转录病毒法转移外源mFasLcDNA基因并扩增 1w后与BAC小鼠 (H 2d×b ,雄性 )骨髓单个核细胞 (BMMC)按 0 .6 2 5∶1混合培养 1w ,经尾静脉将 5× 10 6个混合细胞 (0 .5ml)注入经全身60 Coγ照射的BALB/C小鼠。同时设立 :1组 (空白对照组 ,未移植细胞 ) ;2组 (同基因BMT组 ) ;3组 (转染外源FasL的同基因BALB/CHC +正常BALB/C小鼠BMMC混合培养后移植组 ) ;4组 (H 2单倍型不同小鼠的allo BMT组 )。观察移植鼠的造血重建及细胞来源、GVHD、生存率和造血重建后的免疫学特征。结果 BMT后 +10d、+2 0d ,实验组、3和 4组的外周血白细胞、血小板计数均低于 2组 (P <0 .0 1) ,但 +30d后以上各组则均恢复正常。实验组中存活 2个月的 8只BALB/C小鼠 ,其BMMC中供体来源Y染色体出现率为 (81.14± 5 .3) % ,其中 1例脾细胞基因组DNA经PCR检出Neor 和mFasLcDNA整合 ;各组移植 2个月后的生存率为 :实验组 80 %、1组 0 %、2、3组均为 10 0 %、4组 2 0 % 。

通过Fas-FasL途径体外清除小鼠同种异体反应性T细胞

目的 通过Fas Fas配体 (FasL)途径清除小鼠同种异体反应性T细胞 (ARTC) ,为减轻异基因骨髓移植 (allo BMT)后的移植物抗宿主病探索新的手段。方法 用磁性细胞分离系统分离BALB c小鼠 (H 2 d)Sca 1+早期造血细胞 (HC) ,然后借助逆转录病毒基因转移技术对其转染外源小鼠FasL(mFasL)cDNA基因 ;扩增 1周后与异基因BAC小鼠 (H 2 d ×b)脾细胞进行单向混合淋巴细胞培养(OWMLC) 6d ,观察处理后的BAC小鼠脾细胞对Na251 CrO4标记的BALB c小鼠脾细胞的杀伤作用。结果 成功分离出BALB c小鼠Sca 1+HC ,纯度为 (89.0± 6 .1) %。BAC小鼠脾细胞与转染外源mFasL的BALB cHC以 1∶5比例共培养 6d后 ,对BALB c源脾细胞杀伤率在不同效、靶比例时均呈显著降低 (P<0 .0 1)。结论 体外反应中 ,转染外源mFasLcDNA并高表达的早期HC可清除针对自身MHC抗原的ARTC。

新型护理记录卡的设计

在临床治疗护理工作中，常有多种护理记录卡，常常分别挂在病床头、床尾、输液架和氧气瓶上，便于医护人员记录和了解病人的治疗情况。这些护理记录卡，不仅占据较多的位置，还影响管理和置放。为此，我们将各种护理记录卡片集成为一体，设计出一种新型护理记录卡，已获得国家实用新型专利（ZL200720084035．3）。使用时根据所需抽出对应的护理记录卡片进行记录或查看，现介绍如下。