信号转导和转录激活因子3通路在心血管疾病中的作用研究进展

在心血管系统中,慢性炎症、氧化应激和压力负荷等因素都可以引起相应信号通路的激活及下游信号分子的转导,导致心血管结构和功能的改变而致病。信号转录和转导激活因子(Stat)在心血管疾病的过程中扮演着重要的角色。其中Stat3信号通路参与了高血压、心肌肥厚、缺血再灌注损伤、动脉粥样硬化、心房颤动、急性心肌梗死等,其被不同的配体激活以后发挥的生物学效应也不尽相同,甚至扮演着完全相反的作用。本文就Stat3信号通路在不同心血管疾病中的作用进行综述。

新型APJ配体-肽类激素Elabela在心血管系统中的研究进展

Elabela是一种新型的内源性血管紧张素受体AT1相关受体蛋白(APJ)配体,早期研究认为其主要表达于胚胎组织中,但近年来的研究发现作为一种内源性激素,Elabela在胚胎发育之后同样表达于心脏血管等组织器官中。APJ在哺乳动物心血管系统中发挥调控作用,而作为APJ配体之一的Elabela同样在心血管系统中有着重要作用。本文主要探讨Elabela在心血管发育及心血管疾病中的作用及其临床应用前景。

恶性肿瘤相关心房颤动防治的研究进展

恶性肿瘤患者心房颤动风险远高于普通人群,而在临床中针对于恶性肿瘤相关心房颤动的防治手段十分有限。本文将结合最新的研究简要,介绍恶性肿瘤相关的心房颤动如何管理,为降低这类患者的住院率、发病率和病死率提供治疗手段。

葱白提取物预处理对心肌缺血再灌注损伤及相关生化因素的影响

目的:观察葱白提取物(FOB)预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤(MIRI)及相关生化指标的影响,探讨FOB抗MIRI的机制。方法:利用Langendorff建立大鼠离体心脏缺血再灌注(I/R)模型,观察左心室发展压(LVDP)恢复和再灌注痉挛度。用生化技术检测冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)活性和心肌细胞线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、ATP酶活性以及丙二醛(MDA)含量。结果:(1)FOB(25g/L、50g/L、100g/L)预处理对心肌I/R损伤后的LVDP恢复和再灌注痉挛度有明显改善作用,并随浓度增加,对心脏保护作用逐渐增强而加强,100g/LFOB预处理后的LVDP恢复和痉挛度的改善均接近正常组值(分别与I/R组和25g/LFOB组相比,均P<0.01;与50g/LFOB相比,均P<0.05),心脏恢复跳动更迅速,收缩和舒张规则有力;(2)FOB(25g/L、50g/L、100g/L)预处理明显降低LDH、CK活性和MDA含量,显著增加SOD、GSHPx、ATP酶活性,且随FOB浓度增高,上述作用更加明显,100g/LFOB预处理组各项生化指标与Control组无明显差异。结论:FOB预处理能有效保护MIRI,其机制与FOB减少心脏I/R时心肌细胞内Ca2+超载和抗脂质过氧化有密切关系。

内皮—间质转化的研究进展

内皮一间质转化(EndMT)是内皮细胞受到外界刺激失去内皮细胞特征,获得间质细胞或肌成纤维细胞表型,表达间质细胞产物的一种生物过程。EndMT不仅在心脏和血管生长发育中发挥重要作用,其在纤维化疾病和肿瘤中也广泛研究。文章对EndMT的信号调节机制及其近期在纤维化和肿瘤发生中的研究进行总结,为临床疾病的治疗提供新的靶点。

分别转染TBX18后乳鼠成纤维细胞对心肌细胞搏动频率的影响

目的用TBX18分别转染成纤维细胞(CFs)与心肌细胞(NRVMs),探究转染的成纤维细胞对整个共培养系统的影响。方法用TBX18分别转染乳鼠心脏CFs与NRVMs,并分成5组:NRVMs组,TBX18-NRVMs组,TBX18-NRVMs+CFs组,TBX18-NRVMs+GFP(绿色荧光蛋白)-CFs组与TBX18-NRVMs+TBX18-CFs组。培养7d后观察并比较各组细胞的搏动频率。结果共培养7d后发现TBX18可显著提高心肌细胞的自发搏动[(94.20±7.38)b/min vs.(62.10±11.67)b/min,P<0.01],且相比TBX18-NRVMs组,GFP-CFs或CFs与TBX18-NRVMs共培养并没有明显改变搏动频率,但CFs具有减缓心肌自发搏动的趋势,经TBX18转染后的CFs与TBX18-NRVMs共培养可显著提高心肌细胞的搏动频率[(118.50±7.25)b/min vs.(82.80±15.82)b/min,P<0.01]。结论在分别转染TBX18的成纤维细胞与心肌细胞共培养系统中,成纤维细胞可显著提高心肌细胞的搏动频率。

探究“八字缝合法”在大口径股动静脉鞘管拔除后对穿刺位点的止血效果

目的本实验欲比较"八字缝合法"与"指压法"在犬的急性心肌梗死(AMI)模型及Ⅲ度房室传导阻滞(Ⅲ°AVB)模型手术中股动静脉鞘管拔出后对穿刺位点的止血效果。方法把试验犬分成心肌梗死模型组及Ⅲ度房室传导阻滞模型组,每组再分成"八字缝合法"组与"指压法"组。心肌梗死模型中比较两种方法对股动脉穿刺位点的止血效果,而在Ⅲ度房室传导阻滞模型中比较两者对股静脉穿刺位点的止血效果。手术期间静脉使用肝素以防血栓形成。比较4组的止血时间,并在术后立即、12h后和24h后对两组穿刺位点进行超声多普勒检查,比较术前与术后穿刺位点的血管影像学检查,并观察4组术后的并发症。结果本实验分别对10只AMI模型犬及9只Ⅲ°AVB模型犬行"八字缝合"止血法,其余行指压止血法。组内比较平均体重与心率差异无统计学意义(P>0.05)。AMI模型与Ⅲ°AVB模型中按压止血所需时间分别为8.45±1.28min与6.61±0.80min。两种模型术后立即行超声多普勒检查发现"八字缝合"处回声增强且没有侧漏,术后12h与24h后增强影消失。模型犬在八字缝合后行静脉造影检查示缝合处明显狭窄。观察一周后AMI模型与Ⅲ°AVB模型犬中分别有两只发生血肿,分别有一只与两只发生感染。结论 "八字缝合"法可以对犬的大口径股动静脉鞘穿刺点进行安全有效的止血,与传统的指压止血法比较并不会增加血肿或再出血等并发症。

转录因子TBX18对乳鼠成纤维细胞的重编程作用

目的探讨窦房结促生长转录因子TBX18对乳鼠心脏成纤维细胞的重编程作用。方法构建携带人TBX18基因的重组腺病毒载体(Ad-TBX18)及只带有绿色荧光蛋白的腺病毒载体(Ad-GFP),转染乳鼠心脏成纤维细胞(CFs),分成实验组A(CFs-TBX18)、对照组B(CFs—GFP)和空白对照组C(CFs)。各组细胞培养8 d观察形态学变化并检测HCN4蛋白、Cox43蛋白及Cox45蛋白的表达情况;再检测心肌肌钙蛋白1(cTn1)蛋白的表达量并记录细胞内钙火花的数量;最后检测α-SMA蛋白的表达及Vimentin蛋白的荧光分布。结果成纤维细胞转染Ad—GFPTBX18后其形态学和搏动功能均未向iSANs转化。转染TBX18的成纤维细胞HCN4表达明显增高,Cox43与Cox45蛋白表达下调。钙火花检测结果显示,空白对照组细胞内有钙火花,而实验组和对照组中均未发现钙火花。cTn1蛋白检测结果表明,实验组中无cTn1蛋白表达。免疫荧光检测显示,各组中均有Vimentin蛋白的红色荧光,实验组中α-SMA高表达,而对照组α-SMA表达明显降低。结论 CFs经TBX18转染后可重编程为高表达HCN4蛋白,和低表达COX43、45蛋白表达较低的肌成纤维细胞(MCFs)。

银杏叶提取物对家兔心室肌细胞瞬时外向钾电流和动作电位的影响

目的:探讨银杏叶提取物(Egb761)对家兔心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)和动作电位的作用,揭示其抗心肌缺血及缺血引起的心律失常的离子机制。方法:酶解法分离家兔的心室肌细胞。全细胞膜片钳技术记录心肌细胞的Ito和动作电位及其被Egb761作用后的变化。结果:①在电压钳制方式下,60μg/L Egb761作用心室肌细胞5 min后,各个钳制电位下的Ito均明显增大,在钳制电位为+50 mV时,Egb761使Ito的电流密度由对照组的(7.59±0.19)pA/pF增加到(11.18±0.89)pA/pF(P<0.01,n=8),Egb761还使Ito的I-V曲线比对照组Ito的I-V明显抬高,但I-V曲线方向没有发生改变,表明Egb761引起了心肌细胞Ito的明显外流。②在电流钳制下,对照组心室肌细胞动作电位都具有从0期到4期的动作电位形态,60μg/L Egb761使心肌细胞动作电位形态呈三角形尖锥锋形,动作电位时程(APD)明显缩短,其复极化50%时程(APD50)和复极化90%时程(APD90)分别由(83.6±4.3)ms缩短为(51.3±3.2)ms和由(168.7±4.1)ms缩短为(93.8±4.4)ms(分别与对照组相比,P<0.01,n=8),尽管Egb761使动作电位幅度(APA)和静息电位(RP)降低,但与对照组相比,没有显著性差异(P>0.05)。结论:Egb761可使心室肌细胞Ito显著增加和APD明显缩短,从而减轻心肌缺血时细胞内阳离子超载对心肌造成的损伤和心肌缺血引起的心律失常的发生,以及增加心脏泵血功能。

心肌缺血再灌注损伤和维拉帕米预处理对大鼠心功能和心肌细胞内钙荧光强度以及L型钙电流的影响

目的探讨心肌缺血再灌注（I／R）损伤和维拉帕米预处理对大鼠心脏功能和心肌细胞内钙荧光强度和L型钙电流（ICa-L）的影响。为临床认识I/R损伤发生机制和防治措施提供实验依据。方法利用Langendorff灌流系统建立大鼠离体心脏I／R模型，选取sD大鼠20只分离心脏。正常组（n=6）的心脏由蠕动泵向心脏泵入37℃正常Tyrode液30min，采集数据完成；I／R组（n=7）的心脏先向心脏泵入37℃正常Tyrode液30min，后停灌30min，再用正常Tyrode液再灌注心脏30min，完成I／R过程；维拉帕米组（n=7）的心脏先用正常Tyrode液灌流心脏10min，待各监测指标稳定后，在正常Tyrode液中加入20μmol／L维拉帕米灌注心脏30min，然后停灌30min，再灌注心脏30min，采集数据。用酶解法分离单个心肌细胞，激光扫描共聚焦显微镜加Fluo-3／AM荧光染色技术和全细胞膜片钳技术分别观察心肌细胞内Ca2＋荧光强度和ICa-L大小。结果大鼠心脏经I／R损伤后，收缩无力，舒张顺应性差，心律失常频繁发生，心功能指标明显减弱。单个心肌细胞内Ca2＋荧光非常强烈（与正常组相比，P〈0．01），细胞产出量明显减少，形态特征发生改变ICa-L记录难度大，要求技术高，在电压钳制方式下，ICa-L的最大电流密度显著减小（与正常组相比，P〈0．01），I-V曲线显著上抬。20μmoL／L维拉帕米预处理可使心脏收缩和舒张顺应性流畅，心律失常发生明显减少，与I／R相比，左心室发展压恢复明显增加，再灌注痉挛度显著降低（均为P〈0．01）。心肌细胞内Ca2＋荧光强度明显减弱（P〈0．01），分出细胞质量好，可供长时间记录ICa-L维拉帕米预处理能明显抑制ICa-L最大电流密度发生显著改变（与正常组相比，P〈0．01；与I／R组相比，P〈0．05），I—V曲线处在中部。结论I／R损伤能引起心功能下降和心律失常发生，其机制可能与心肌细胞内钙超载有关。维拉帕米预处理通过减少ICa-L内流，使心脏处在抑顿中和避免Ca2＋诱导Ca2＋释放造成细胞内钙超载，起到抗I／R损伤作用。

生物起搏器的研究进展

临床上很多心动过缓的病人需要安装起搏器,但经过长期的发展起搏器仍有很多缺陷。为了弥补起搏器的不足,生物起搏器应运而生,且通过模拟起搏细胞功能到模拟起搏细胞表型和功能再到使正常心肌细胞重编程为起搏细胞及调节起搏细胞下游通路等研究,生物起搏器已经可以在大动物心脏中稳定且持久的起效。但投入到临床应用之前,生物起搏器还有很长的路要走。

大鼠背根神经节细胞的分离及特性探讨

目的探讨大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)细胞的分离方法以及细胞形态和电生理特征。方法采用显微外科技术获取大鼠DRG体,用双酶法急性分离大鼠DRG获得DRG细胞,全细胞膜片钳技术记录动作电位和钠电流。结果本实验能得到完整圆形或椭圆长条形的大鼠DRG体。正常的单个DRG细胞呈圆形或椭圆形,大小不等,胞膜清晰,折光性好,隐约可见细胞核。在DRG细胞上记录的动作电位都具有从0期到4期,呈正立锐角三角形,静息电位小,动作电位时程短。DRG细胞的钠通道最大电流密度在-30mV左右,几乎能被TTX完全抑制,具有可逆性恢复。结论本实验采用分离方法简单易行,DRG细胞容易获得和辨认,适合膜片钳技术要求,电生理特征明确可靠,值得推崇。