干细胞与膀胱脱细胞基质构建组织工程管状移植物修复长段输尿管缺损

背景:临床上重建长段输尿管缺损的方法存在并发症多且创伤大等缺点,因此,需要寻找其他的修复方式。目的:探讨组织工程管状移植物修复长段输尿管缺损的可行性。方法:将兔骨髓间充质干细胞和膀胱平滑肌细胞种植到兔膀胱脱细胞基质的两面,培养7 d后制作成4 cm长的组织工程管状移植物,仅将膀胱平滑肌细胞种植到兔膀胱脱细胞基质构建组织工程管状移植物作为对照;新西兰兔25只,随机分为实验组20只和对照组5只,将2种组织工程管状移植物移植到兔体内修复输尿管缺损,修复同时利用网膜包裹,分别于术后2,4,8周取实验组标本做苏木精-伊红染色及免疫组化检测。结果与结论:组织学检查发现实验组尿路上皮层再生呈连续性,术后8周可见组织工程管状移植物管腔内覆盖多层尿路上皮结构及规则的平滑肌束,免疫组化可见uroplakinⅢa及CK AE1/AE3阳性,证实了组织工程管状移植物组织内有成熟上皮细胞覆盖,且上皮细胞之间有连接功能。对照组5只动物术后拔除输尿管支架管2周内均死亡,尸检见流出道瘢痕形成,组织工程管状移植物内腔闭锁,同侧肾脏重度积水,未作组织学观察。以上结果表明将骨髓间充质干细胞和膀胱平滑肌细胞种植于兔膀胱脱细胞基质上构建组织工程管状移植物修复长段输尿管缺损是可行的,组织工程管状移植物内腔有成熟上皮覆盖,骨髓间充质干细胞能促进尿路上皮再生。

尿路上皮细胞和膀胱脱细胞基质的相容性研究

目的 研究尿路上皮细胞（UCs）和膀胱脱细胞基质（BAM）的生物相容性.方法 分离培养兔UCs,以1.0×105/cm2均匀接种于BAM上,观察细胞的粘附、生长及增殖.将复合物种植于兔背部皮下检测其组织相容性.结果 典型的UCs呈多角形的“铺路石样”结构,抗CK AE1/AE3抗体免疫组化阳性证实为上皮细胞;BAM内部未见细胞碎片,可见排列规则而紧密连接成网状的胶原纤维;细胞种植到支架上一周后,行HE染色检测显示膀胱上皮细胞在BAM上贴附生长良好;生长曲线显示,实验组和对照组生长曲线相似.结论 UCs在BAM表面生长良好,相容性较好,是组织工程良好的种子细胞.

利用组织工程片状移植物修补兔尿道缺损的实验研究

目的 探讨将骨髓间充质干细胞（BMSCs）和膀胱平滑肌细胞（SMCs）种植于膀胱脱细胞基质（BAM）上构建组织工程片状移植物（TESG）,修复尿道缺损.方法 制作兔BAM,体外培养扩增兔BMSCs和SMCs,将BMSCs和SMCs种植到兔BAM的两面,培养7d后制作成3.0×1.5cm2的TESG作为实验组,将未种植细胞的BAM构建TESG作为对照组.新西兰兔25只,其中实验组20只,分4组,每组5只,对照组5只,修复尿道缺损后分别于手术后2周、4周、8周取标本做HE染色,16周后对TESG进行免疫组化检测.结果 脱细胞基质HE染色及扫描电镜未见细胞生长.实验组HE染色发现实验组尿路上皮层再生呈连续性;术后16周免疫组化可见TESG覆盖多层尿路上皮结构及规则的平滑肌束.对照组5只兔术后拔除尿管4周内均死亡,尸检见尿道明显狭窄,双侧肾脏重度积水,双测输尿管扩张,膀胱充盈明显.结论 将BMSCs和SMCs种植于BAM上构建TESG,修复尿道缺损是可行的,BMSCs能促进尿路上皮再生。

逆行肾内手术治疗＜2cm马蹄肾肾结石的疗效观察

目的 探讨逆行肾内手术（Retrograde Intra-Renal Surgery,RIRS）治疗马蹄肾肾结石的临床疗效.方法 回顾性分析2008年8月至2013年8月采用RIRS治疗11例马蹄肾肾结石患者,其中9例为肾结石,直接用输尿管软镜碎石;2例为输尿管上段结石,先用输尿管硬镜碎石,碎石过程中结石移至肾脏,后改用软镜碎石.分析其平均手术时间、平均住院天数、清石率和并发症,术后1个月作CT和KUB检查评估结石清除率（stone-free rate,SFR）.结果 11例患者结石大小为（1.5±0.3）cm,手术平均时间为（72.3±22.6） min,平均住院天数（5.2±1.8）d,术后1个月SFR为81.8％.2例二期行输尿管软镜碎石,二期SFR为100％;其中1例术后出现发热,1例术后出现腰痛,对症治疗后能缓解;所有患者无输尿管穿孔及狭窄,无肾功能衰竭等严重并发症.结论 对于＜ 2cm的马蹄肾肾结石,RIRS具有创伤小,住院时间短,并发症少,SFR高等优点,值得推广。