肿瘤相关成纤维细胞对大肠癌LoVo细胞奥沙利铂化疗敏感性的影响

目的观察肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)对大肠癌LoVo细胞奥沙利铂化疗敏感性的影响,并探讨其可能的作用机制。方法取大肠癌患者癌组织及癌旁正常结肠黏膜组织分别分离培养CAFs和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),建立大肠癌LoVo细胞与CAFs或NFs共培养体系,奥沙利铂处理后CCK-8比色法检测LoVo细胞存活率,PI/Annexin V双染法检测细胞凋亡率;免疫印迹法(Western blotting)检测共培养体系中大肠癌细胞COX-2、上皮间质转化(EMT)相关蛋白(E-cadherin、Vimentin、Fibronectin)表达的改变,ELISA法检测共培养体系中细胞上清液中前列腺素E_2(PGE_2)含量。结果 CAFs可提高奥沙利铂处理后LoVo细胞存活率,并降低细胞凋亡率;LoVo细胞与CAFs共培养后,细胞COX-2蛋白表达上调,细胞上清液中PGE_2含量显著增加,且细胞EMT标志物蛋白E-cadherin表达降低,Vimentin、Fibronectin蛋白表达上调。结论 CAFs可降低大肠癌LoVo细胞对奥沙利铂的敏感性,其机制可能是通过上调大肠癌细胞COX-2表达和PGE_2合成,继而诱导EMT。

siRNA介导COX-2基因沉默对大肠癌LoVo细胞侵袭及上皮间质转化的影响

目的探讨靶向沉默环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达对大肠癌LoVo细胞侵袭能力及上皮间质转化的影响。方法在体外COX-2 siRNA转染大肠癌LoVo细胞,RT-PCR及免疫印迹法验证转染后COX-2 mRNA及蛋白表达,Transwell小室法检测细胞侵袭能力的改变;免疫印迹法检测EMT标志物(E-cadherin、Vimentin、Fibronectin)、ERK/MAPK和PI3K/Akt通路相关蛋白(Akt、p-Akt、p-GSK-3β、ERK、p-ERK)及MMP-9表达的变化情况。结果 COX-2 siRNA转染大肠癌LoVo细胞后,COX-2 mRNA及蛋白表达下调,同时细胞侵袭能力降低;上皮标记物E-cadherin表达上调,同时间叶标记物Vimentin和Fibronectin表达下调;细胞总的ERK、Akt蛋白表达水平无明显改变,而p-ERK、p-Akt表达降低,同时,Akt下游效应蛋白p-GSK-3β表达也下调; MMP-9表达下调。结论 COX-2 siRNA转染有效抑制了大肠癌LoVo细胞COX-2表达,并可能通过阻滞细胞ERK/MAPK和PI3K/Akt通路,进而抑制EMT,下调MMP-9表达,降低细胞侵袭能力。

肿瘤相关成纤维细胞对大肠癌LoVo细胞增殖和侵袭能力的影响

目的观察肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)对大肠癌LoVo细胞增殖和侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法从6例大肠癌患者癌组织及癌旁正常结肠黏膜组织分别分离培养CAFs和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),并鉴定CAFs,建立大肠癌LoVo细胞与CAFs或NFs共培养体系,CCK-8比色法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞侵袭能力的改变,免疫印迹法(Western blotting)检测细胞COX-2、MMP-9蛋白表达的改变,ELISA法检测细胞上清液中前列腺素E_2(PGE_2)的含量。结果成功分离CAFs,CAFs中成纤维细胞活化蛋白(fibroblast-activated protein,FAP)与平滑肌激动蛋白-α(α-smooth-muscle actin,α-SMA)表达较NFs细胞的表达量显著增加;LoVo细胞与CAFs共培养后其增殖和侵袭能力均较LoVo细胞单独培养或与NFs共培养组显著增强,且COX-2和MMP-9蛋白表达明显升高,细胞上清液中PGE_2含量显著增加。结论 CAFs可促进大肠癌细胞的增殖、提高其侵袭能力,其机制可能是通过上调大肠癌细胞COX-2表达和PGE_2含量。但CAFs如何调控大肠癌细胞COX-2/PGE_2表达有待进一步探讨。

重楼皂苷Ⅰ通过调节细胞自噬抑制胃癌细胞侵袭能力

目的探讨重楼皂苷Ⅰ对胃癌HGC-27细胞侵袭能力及自噬水平的影响。方法选择胃癌HGC-27细胞作为研究对象,用不同浓度的重楼皂苷Ⅰ(0、5、10、20μmol/L)在体外处理HGC-27细胞,Transwell小室法检测细胞侵袭能力的改变;蛋白质印迹法检测细胞上皮细胞间叶样表型转化(EMT)标志物如E-钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤维连接蛋白(Fibronectin)、自噬相关基因Atg5、LC3-Ⅱ和Beclin1蛋白、MMP-9蛋白表达情况。结果 Transwell侵袭实验结果显示,重楼皂苷Ⅰ处理后,随着药物浓度的升高,穿过Transwell小室基底膜的HGC-27细胞数逐渐减少;蛋白质印迹结果显示,重楼皂苷Ⅰ可促进HGC-27细胞EMT标志物蛋白E-cadherin的表达,同时抑制Vimentin、Fibronectin蛋白的表达,且抑制MMP-9蛋白表达;重楼皂苷Ⅰ也可促进自噬相关基因Atg5、LC3-Ⅱ和Beclin1蛋白的表达。结论重楼皂苷Ⅰ可抑制胃癌HGC-27细胞侵袭能力,其机制可能通过诱导HGC-27细胞自噬并抑制EMT。

具核梭杆菌与结直肠癌相关性的研究进展

结直肠癌(CRC)具有高发病率及死亡率,具核梭杆菌(Fn)与CRC发生发展及耐药性关系密切,但作用机制尚不明确,本文拟从炎症、免疫、表型遗传、代谢、耐药等途径对机制进行探讨。此外,Fn还可作为新型生物标志物用于CRC的临床诊断中,粪便检测、血清学检测、电喷雾电离质谱检测等极具临床诊断价值。同时,针对Fn的抗生素治疗及疫苗治疗为CRC治疗提供了新方向。本文拟Fn导致CRC发生发展及耐药机制、诊断价值、治疗方式进行综述。

深度学习技术在辅助结直肠腺瘤浸润深度鉴别中的应用研究

目的研究深度学习技术在肠镜电子染色模式下辅助内镜医师鉴别结直肠腺瘤浸润深度的价值。方法回顾性收集2016年11月-2021年6月武汉大学人民医院、南方医科大学深圳医院和宜昌市第一人民医院的3 714个病例的13 246张电子染色图像, 构建深度学习模型, 对结直肠腺瘤的黏膜下深层浸润和非深层浸润进行鉴别, 并在独立测试集与外部测试集中验证模型的性能。使用完整的测试集对比5名内镜医师与深度学习模型的诊断水平。前瞻性收集2021年1-6月来自武汉大学人民医院的35个高清内镜视频, 验证在模型辅助下内镜医师的诊断效果。结果该模型在图片测试集中的准确率93.08%(821/882), 约登指数0.86, 优于内镜医师[最高者分别为91.72%(809/882)和0.78]。在视频中该模型的准确率达97.14%(34/35), 约登指数0.94。在模型辅助下, 内镜医师的准确率显著提升[最高者97.14%(34/35)]。结论本研究开发的基于深度学习的结直肠腺瘤浸润深度鉴别系统能够准确地识别黏膜下深层浸润病灶, 辅助内镜医师提升识别深层浸润病灶的准确率。

基于深度学习的内镜超声胆管扫查辅助分站系统构建

目的构建基于深度学习的人工智能内镜超声(endoscopic ultrasonography,EUS)胆管扫查辅助分站系统,以期辅助医师学习多站成像技术,提高操作水平。方法回顾性收集武汉大学人民医院和武汉协和医院2016年5月—2020年10月522例EUS视频资料,基于视频截取图像,获得来自武汉大学人民医院的3000张白光胃镜,31003张超声胃镜图像和来自武汉协和医院的799张超声胃镜图像,用于EUS胆管扫查系统的模型训练和模型测试。模型包括:白光胃镜图像过滤模型,标准站图像与非标准站图像区分模型和EUS胆管扫查标准图像分站模型,用以将标准图像分为肝窗、胃窗、球窗、降窗。然后从测试集中随机抽取110张图像进行人机大赛,比较专家、高级内镜医师与人工智能模型对胆管扫查多站成像每个站点识别的准确度。结果白光胃镜图像过滤模型准确率为100.00%(1200/1200),标准站图像与非标准站图像区分模型准确率为93.36%(2938/3147),EUS胆管扫查标准图像分站模型在内部测试集中各分类的准确率分别为肝窗97.23%(1687/1735),胃窗96.89%(1681/1735),球窗98.73%(1713/1735),降窗97.18%(1686/1735);外部测试集中准确率分别为肝窗89.61%(716/799),胃窗92.74%(741/799),球窗90.11%(720/799),降窗92.24%(737/799)。人机大赛中,模型分站的正确率为89.09%(98/110),高于内镜医师[85.45%(94/110),74.55%(82/110),85.45%(94/110)],接近专家水平[92.73%(102/110),90.00%(99/110)]。结论本研究构建了一种基于深度学习的EUS胆管扫查系统,可以较为准确地实时辅助内镜医师进行标准多站扫查,提高EUS完整性及操作质量。

以重度贫血为首发表现的小肠非霍奇金淋巴瘤一例

患者，男，49岁，因“面色苍白伴头晕1年余，加重1周”于2017年6月30日入院。患者1年前无明显诱因出现面色苍白伴头晕，不伴发热、心慌、胸闷、恶心、呕吐、腹部不适、腹泻及黑便等，于当地医院行胃镜检查示“浅表性胃炎”，结肠镜检查示“正常结肠黏膜”，骨髓穿刺示“增生性贫血（小细胞低色索性贫血）”，初步诊断为“慢性缺铁性贫血”，予以口服铁剂与维生素C治疗数月（具体不详）后症状缓解。

胃癌、结直肠癌患者以慢性贫血为首发表现的危险因素分析

[目的]探讨无明显消化道症状以慢性贫血为首发表现的胃癌、结直肠癌患者危险因素。[方法]回顾性搜集2015-06-2018-06期间以慢性贫血为首发表现的胃癌、结直肠癌患者72例的临床资料,采用χ^2检验和Logistic回归分析癌患者与性别、年龄、计算机断层扫描(CT)、肿瘤标志物、病理特征的相关性。[结果]①72例中,胃癌39例(54.2%),结直肠癌33例(45.8%)。39例胃癌患者中男25例,女14例,平均年龄(67.6±11.5)岁;33例结直肠癌患者中男19例,女14例,平均年龄(62.4±13.0)岁。②χ^2检验结果显示,胃癌患者中以慢性贫血为首发症状者与非慢性贫血者的年龄、CT表现、肿瘤分期、大便潜血上比较差异有统计学意义(P<0.05~0.01);结直肠癌患者中以慢性贫血为首发症状者与非慢性贫血患者在肿瘤部位、肿瘤直径、大便潜血、血清CEA、血清CA199上比较差异有统计学意义(P<0.05~0.01)。③二分类Logistic回归分析结果显示,无明显消化道症状的胃癌患者中,年龄≥60岁、CT阳性、Ⅲ/IV期、大便潜血阳性的慢性贫血风险高;无明显消化道症状的结直肠癌患者中,右半结肠、肿瘤直径≥5 cm、大便潜血阳性、血清CEA阴性、血清CA199阴性的慢性贫血风险高。[结论]无明显消化道症状的胃癌患者年龄、CT表现、肿瘤分期、大便潜血是发生慢性贫血的危险因素,无明显消化道症状的结直肠癌患者肿瘤部位、肿瘤直径、大便潜血、肿瘤标志物是慢性贫血的危险因素,当患者合并高危因素时应考虑到消化道恶性肿瘤可能。