表没食子儿茶素没食子酸酯体外抗柯萨奇病毒的实验研究

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)体外抗柯萨奇病毒B3型(CVB3)的活性及作用机制。方法利用HEp-2细胞体外培养系统,通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑兰(MTT)比色法检测细胞活性,从药物抗病毒吸附、药物直接灭活病毒以及抑制病毒在细胞内的生物合成3个方面检测EGCG抗CVB3的作用方式,以治疗指数(TI)作为评价指标。结果 高浓度EGCG能阻止CVB3的吸附,EGCG具有较好的直接灭活病毒和抗CVB3生物合成的作用,TI分别为8.7和15.3,且随着药物浓度的增加,病毒所致CPE效应逐渐减弱而病毒抑制率则明显升高。结论 EGCG具有很好的体外抗CVB3的作用,其抗病毒方式是多途径的。

夏桑菊抗呼吸道合胞病毒的实验研究

目的评价夏桑菊抗呼吸道合胞病毒(RSV)的疗效。方法以病毒唑为对照,通过体外观察病毒致细胞病变效应(CPE)、病毒滴度、抗病毒指数;在体内观察其对染毒小鼠的死亡保护作用以及对小鼠心、脑、肺内病毒增殖的影响,从而判定夏桑菊抗RSV作用。结果夏桑菊能抑制RSV的增殖,其有效浓度为544.59μg/ml,并显示出病毒的感染性滴度随药物浓度的增加而下降;治疗RSV感染鼠结果发现夏桑菊对RSV感染鼠有保护作用,10g/(kg·d)时,RSV感染鼠的存活率为50%,平均存活天数为(10.9±2.3)d,随着药物剂量增加,疗效增强,该药物还能降低组织内病毒滴度,阻止体内病毒复制,抗RSV作用类似于同剂量的病毒唑。结论夏桑菊是一种抗呼吸道合胞病毒的有效药物。

复方大黄抗乙型肝炎病毒作用的研究

目的:观察复方大黄对HBV病毒复制的作用效果。方法:用MTT法测定复方大黄在不同浓度下对HepG 2.2.15细胞的毒性作用,ELISA法检测复方大黄对HepG 2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg抗原的影响。结果:在用药后第4、8天,复方大黄对HepG 2.2.15细胞的半数毒性浓度(TD50)分别为346ng/ml和212ng/ml(P>0.05);对HBeAg的治疗指数(TI)分别为2.84和5.30(P<0.05);对HB-sAg的治疗指数分别为0.00和0.42(P>0.05)。结论:复方大黄可抑制HepG 2.2.15细胞分泌HBeAg,具有体外抗乙型肝炎病毒作用。

P物质、神经激肽-1受体对人类免疫缺陷病毒的调节作用

生活紧张状态和抑郁是HIV感染各阶段直至发展为AIDS的重要辅助因素。Kopnisky等报道心理改变在HIV-1疾病进程中所起的作用．发现在免疫一神经传导中脑部趋化因子特别是SP的重要性。抑郁、焦虑和紧张状态与HIV发展相关，行为状态和脑力活动的改变所引起的免疫应答间接或至少有一部分是通过神经内分泌-免疫途径介导的。紧张状态反应导致神经肽的释放改变．

穿心莲内酯及其衍生物抗肠道病毒效果评价

目的:评价穿心莲内酯及其衍生物(XYP-1、XYP-2及XYP-3)抑制柯萨奇病毒B3型(CVB3)感染MA104细胞的效果。方法:采用MTT法检测3种中药注射液对MA-104细胞的细胞毒性,并通过感染阻断、直接杀伤、增殖抑制3种不同作用方式评价药物对CVB3感染细胞的体外抗病毒效果。结果:穿心莲内酯及其衍生物在阻断病毒感染细胞作用中,对CVB3的治疗指数(TI)分别为15.29,6.76,1.86;在阻止病毒增殖抑制作用中,对CVB3的TI分别为20.00,50.00,1.67;在直接杀伤病毒作用中,对CVB3的TI分别为7.65,25.00,1.83。结论:穿心莲内酯及其衍生物在不同作用方式下,对CVB3病毒具有不同程度的抑制效果,XYP-1主要阻断病毒的感染并抑制病毒增殖,XYP-2则能抑制病毒增殖并对病毒有杀伤作用,而XYP-3抗病毒效果较差。

四种大黄多糖体外抗轮状病毒的实验研究

目的研究4种大黄多糖(A、B、C、D)以及其配伍体外抗轮状病毒(RV)作用。方法在体外用MTT法检测药物的毒性作用,从抗吸附、直接杀伤和抑制病毒增殖3方面检测4种大黄多糖抗RV的效果;并依中效原理,对大黄多糖A、C进行配伍,研究其体外抗病毒的作用,并探讨最适配伍比例。结果4种大黄多糖体外有预防RV感染和抑制病毒增殖作用。A、C以1∶1配伍后,对病毒的直接杀伤的合用效应与合用指数关系:当fa为≤0.68时,CI≤1,两药作用相加或协同。对病毒的增殖抑制的合用效应与合用指数关系:当fa为≤0.57时,CI≤1,两药作用相加或协同。结论4种大黄多糖体外具有较好地抗RV病毒作用,且大黄多糖A、C合用效果对病毒的直接杀伤作用和抑制病毒增殖作用优于其单独使用。

肾综合征出血热（HFRS）、汉坦病毒肺综合征（HPS）和汉坦病毒（HV）研究进展——记第八届国际HFRS/HPS和HV学术会议

第八届国际肾综合征出血热（HFRS）、汉坦病毒肺综合征（HPS）和汉坦病毒（HV）学术会议于2010年5月20-22日在希腊首都雅典举行.大会共收到学术论文157篇,其中大会报告51篇.主要包括有关近年来HFRS/HPS病原学、流行病学、发病机制以及诊断治疗等一些新的研究进展.会议学术报告相关内容简述如下.

抗疱疹病毒药物的研究

单纯疱疹病毒（herpes Simplex virus，HSV）是人类病毒性疾病中最常见的病毒，可引起口唇疱疹，生殖器疱疹，脑膜炎和角膜炎等一系列疾病［1，2］。在全球范围内，HSV 有着极高的感染率和发病率［3］。阿昔洛韦（acyclovir，ACV）及其相关的核苷类似物是临床上主要用于治疗疱疹性疾病的药物，并已取得了较好的疗效［4］。但是在免疫抑制患者中 ACV 耐药毒株的出现，为开发更安全更有效的抗疱疹病毒药物提出了更多的要求［5，6］。

大黄抗炎抗病毒作用的研究

大黄为蓼科植物掌叶大黄 Rheum palmatum L.，唐古特大黄 Rheum tanguticum Maxim. ex Balf 或药用大黄 Rheum officinale Baill.的干燥去皮根茎及根入药，是-味疗效可靠，应用广泛的中药。现代药理研究发现大黄有抗肿瘤、抗菌消炎、抗动脉硬化、降血压、泻下利尿、保肝利胆、清除自由基等多种作用。研究发现大黄及其活性成分对多种细菌、病毒均有抑制作用［1］。

抗汉坦病毒药物的研究

汉坦病毒（Hantavirus）属于布尼亚病毒科（Bunya-viridae）汉坦病毒属，是一种有包膜的单负链 RNA 病毒［1］。黑线姬鼠、褐家鼠等小型啮齿动物是其主要宿主动物，人类通过呼吸道、消化道摄入或直接接触带病毒的宿主动物而感染，常引起肾综合征出血热（hemorrhagic fever with renal syndrome，HFRS）和汉坦病毒肺综合征（ Hantavirus pulmonary syndrome，HPS）两类疾病［2，3］。HFRS 多见于亚洲、欧洲，其中90%以上的病例在中国［3］，HPS 患者多见于美洲。毛细血管通透性增加和血小板减少是 HFRS 和 HPS 的共同病理特征，但 HFRS 以肾损害为主，HPS 侧重于心、肺损害，HPS 的病死率显著高于 HFRS，可达40%左右［4］。

EV71病毒感染的防治研究

人肠道病毒71型（human enterovirus 71，EV71）属于小 RNA 病毒科（picornaradae）肠道病毒属（ entero-virus）［1］。EV71病毒颗粒为二十面立体对称的球形结构，无包膜和突起，直径约为30 nm。病毒基因组为单股正链 RNA，全长7413 bp，基因组中仅有一个开放阅读框（ ORF），在其两侧为5＆#39;和3＆#39;-非编码区（UTRs），3＇非编码区的末端含有一个长度可变的多聚腺苷酸尾巴（poly - A）。病毒基因组编码2194个氨基酸，主要有 P1、P2和 P3这3种前体蛋白，P1前体蛋白被蛋白酶切割为 VP1、VP2、VP3和 VP4这4个病毒外壳蛋白，为组成病毒颗粒的结构蛋白；P2和 P3前体蛋白则被切割为7个有活性的功能蛋白，负责病毒RNA 的复制与蛋白组装［2］。病毒颗粒的衣壳由60个亚单位构成，每个亚单位由 VP1~ VP4拼装成五聚体样结构，其中 VPl 蛋白是最主要的衣壳蛋白，具有最多的型特异性中和位点，与病毒血清型相关性高，是EV71主要的中和决定因子，直接决定病毒的抗原性，成为 EV71基因分型和遗传进化分析的重要研究对象［3］，曾被多次报道用来研制病毒疫苗［4］。

住院艾滋病患者并发巨细胞病毒感染特点分析

目的分析武汉地区住院艾滋病患者合并巨细胞病毒(CMV)感染特点,比较不同体液标本CMV DNA阳性率及与CMV感染相关的因素。方法采用实时荧光定量PCR法检测患者体液中CMV DNA载量,采用微粒子酶学免疫化学发光法检测血清CMV IgM和IgG,流式细胞术检测患者血CD4+T细胞数。结果 117例住院艾滋病(AIDS)患者中CMV感染患者72例,阳性率为61.5%。血液、唾液、尿液及脑脊液CMV DNA阳性率依次为53.8%、59.2%、56.3%和20.0%。CMV IgM阳性者有8例,阳性率为6.8%,CMV IgG阳性者有59例,阳性率为50.4%。CMV感染患者中CD4+T细胞数低于50个/μl比例多于CMV阴性患者。结论住院艾滋病患者CMV感染阳性率较高,尤其是在血液、尿液及唾液样本中,CMV DNA是合并感染的监测指标。CMV感染多发生于CD4+T细胞低下的患者,感染可引起多器官损害。

病毒感染的特点与病毒性疾病的抗病毒治疗

病毒的概念尚未明确，多数人认为是最小的微生物，也有人认为是“一包基因”［1］。人类约80%的传染病为病毒感染所致［1］，病毒性疾病已涉及到临床医学的各个领域，最近几年新爆发流行的传染性疾病亦均是由病毒感染引起。2009年底至2010年在全球爆发流行的甲型 HINI 流感（曾称为“猪流感”）波及范围超过209个国家及地区，至少造成14142人死亡，它是由呼吸道传播的流感病毒引起的［2］。同时爆发的手足口病（hand - foot - mouth disease，HFMD）则主要由通过肠道传播的柯萨奇病毒（coxasckievirus）和肠道病毒71型（ enterovirus71，EV71）感染所致［3］，根据国家卫计委报道，近3年每年有130余万儿童发病，仅2010年就导致907人死亡［4］。此外，禽流感、发热伴血小板减少综合征、严重急性呼吸综合征（ SARS）等都是病毒流行的例证。因此，病毒感染已成为一种需要引起特别关注的重要的医学问题和社会问题，这些病毒性疾病不仅严重危害人体健康，还影响社会稳定和经济发展。

汉坦病毒感染宿主细胞后TRAIL受体的动态变化

两株汉坦病毒(HV 76/118株和H-114株)分别感染人胚肺成纤维细胞(HEPF)后,于感染后不同时间(6,24,96h)提取细胞总RNA,半定量RT-PCR的方法检测肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)的相关受体(TRAIL-R1～TRAIL-R4)在汉坦病毒感染细胞过程中的表达变化,以明确TRAIL受体在汉坦病毒感染细胞过程中的表达情况.结果显示,正常细胞内TRAIL-R4表达最高,其次为TRAIL-R2.汉坦病毒(HV 76/118株和H-114株)感染HEPF 6h时仅TRAIL-R1表达显著上升,TRAIL-R2、TRAIL-R4表达先下降后上升并在96h达到高峰.HV 76/118株感染HEPF细胞6h时TRAIL-R3表达减低并维持在低表达水平,而HV H-114感染后仅24h出现短暂下降.结果表明,TRAIL受体表达在汉坦病毒感染过程中呈动态变化,且不同毒株的变化趋势存在差异.

HBV X蛋白与宿主APOBEC3G蛋白之间的相互作用

将原核重组质粒双酶切后释放的x基因与真核表达载体连接,构建真核重组质粒pcDNA3.1-X,然后与真核重组质粒pcDNA3.1-APOBEC3G共转染HepG2细胞,提取蛋白进行免疫共沉淀并用Western blot分析结果.免疫共沉淀后,HA-APOBEC3G融合蛋白能够在抗HBx的免疫沉淀物中检测出来,在抗HA标签的免疫沉淀物中也能检测到HBx.揭示了这两种蛋白能在受体细胞内形成复合物.结果表明乙肝病毒X蛋白与APOBEC3G蛋白在细胞内能发生相互作用,提示APOBEC3G抗HBV作用可能与乙肝病毒X蛋白有关.

NKT细胞和HIV感染

NKT细胞是一群表达半不变量T细胞受体(TCR)的淋巴细胞亚群,它识别由非多态性MHC-Ⅰ类分子CD1d呈递的糖脂。NKT细胞有免疫调节功能,抵抗自身抗原和病原体。最近研究发现,NKT细胞是HIV-1感染的靶细胞之一,且在HIV感染者体内选择性减少。本文着重讨论上述发现的机制、后果以及HIV-1感染治疗前景。