当归多糖对放射损伤小鼠细胞免疫的调节作用

目的 :了解当归多糖 (AngelicaPolysaccharide ,AP)的药用价值。方法 :将小鼠随机分为正常对照组 ,照射对照组 ,当归多糖治疗组 ,检测 3组的红细胞C3b受体花环率 (C3bR % )、免疫复合物花环率 (ICR % )和胸腺ConA诱导的T淋巴细胞增殖反应。结果 :照射对照组红细胞C3bR %、ICR %和胸腺T淋巴细胞增殖反应明显低于正常对照组 ,而当归多糖治疗组的红细胞C3bR %、ICR %和胸腺T淋巴细胞增殖反应显著高于照射对照组 (P <0 .0 1) ,有统计学意义。结论 :当归多糖能显著促进放射损伤小鼠的细胞免疫功能。

趋化性细胞因子与结核免疫

近年来研究发现趋化性细胞因子及其受体广泛参与机体一系列生理、病理过程 ,在机体防御、抗感染、抗肿瘤等方面发挥重要作用。

过继免疫治疗的新希望——CHAK细胞

目的 探讨CHAK细胞体外常规生物学活性。方法 采用血球计数板计算外周血单核细胞(PBMC)、LAK细胞及CHAK细胞三组细胞的增殖能力 ,MTT法检测各组细胞对K5 6 2肿瘤细胞株杀伤能力 ,免疫组化检测细胞表型。结果 与PBMC和LAK相比 ,CHAK细胞显示出更强增殖能力和较高的细胞毒活性 ,且CDl6+ 、CD56+ 细胞表型明显高于其它两组。结论 CHAK是一类不同与LAK细胞的新型高效杀伤细胞 。

趋化因子与结核免疫

近年来研究发现趋化因子及其受体广泛参与机体一系列生理，病理过程，在机体防御，抗感染，抗肿瘤等方面发挥重要作用。本文拟对趋化因子及其受体与结核免疫的研究进展作一综述。

生长激素对急性出血坏死性胰腺炎大鼠免疫功能的影响

目的研究生长激素(GH)对急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)大鼠免疫功能的影响。方法采用逆行胰胆管牛磺胆酸钠(TAC)注射造成大鼠AHNP动物模型。40只大鼠分为对照组(n=10)和GH治疗组(n=30)。于术后12、24、48h分批剖杀。观察治疗前后免疫功能指标IgG、IgA、IgM、CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的变化。结果相对于对照组,GH治疗组大鼠血清IgG、IgM、IgA、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+增高,两组差异显著(P<0.05)。结论GH可加强急性出血坏死性胰腺炎大鼠的免疫功能。

梅毒患者病程中宿主的免疫学变化

目的探讨梅毒螺旋体(TP)感染的不同病程与宿主免疫学变化的关系。方法采用ELISA法分别检测一期和二期梅毒患者血清抗TP抗体的滴度(用活动指数AI表示)。MTT比色法测定一期和二期梅毒患者血清对脐带血淋巴细胞增殖反应的影响(用刺激指数SI表示)。ABC鄄ELLSA法分别检测一期和二期梅毒患者血清中细胞因子IL鄄2、IL鄄4含量。结果二期梅毒患者抗TP抗体的活动指数(AI)显著高于一期梅毒(t=3.92,P<0.01)。一期和二期梅毒血清对脐带血淋巴细胞增殖反应的刺激指数SI显著低于无血清含PHA组(q1=12.99,P1<0.01。q2=12.04,P2<0.01),且二期梅毒血清SI亦显著低于一期梅毒(q=7.18,P<0.01)。一期梅毒血清中IL鄄2含量明显高于二期梅毒(t=3.50,P<0.05),IL鄄4含量与二期梅毒差异无显著性(t=1.31,P>0.05)。结论抗TP抗体随着梅毒病程由一期向二期进展其滴度越来越高,但与体液免疫有关的细胞因子IL鄄4没有发生显著性变化;宿主感染梅毒螺旋体后,其细胞免疫功能受到明显抑制,且随着病程由一期向二期进展,其抑制现象越来越显著。

中药黄芪对脊髓星形胶质细胞单核细胞趋化蛋白-1分泌的影响

目的 :研究黄芪对体外培养的脊髓星形胶质细胞趋化蛋白 1(MCP 1)分泌的影响。方法 :自Wistar大鼠脊髓组织分离、纯化星形胶质细胞 ,体外培养 ,分别予以TNF α及TNF α+黄芪处理 ,ELISA方法检测培养上清液中MCP 1的表达。结果 :TNF α可以显著刺激星形胶质细胞合成、释放MCP 1,而黄芪可下调其刺激作用。结论 :受炎症因子刺激活化的星形胶质细胞可能是损伤脊髓局部MCP 1的来源之一 ,黄芪可以减少脊髓损伤后内源性MCP 1的产生 ,从而缓解继发性脊髓损伤 ,发挥脊髓保护作用。

T_(H1)类细胞因子对结核病患者产生单核细胞趋化蛋白1的调节作用

目的 探讨TH1 类细胞因子干扰素γ(IFN γ)、白细胞介素 2 (IL 2 )对结核病患者外周血单个核细胞 (PBMC)分泌MCP 1的影响。方法 将 1 2例结核患者和 8例健康人PBMCs在LPS诱导前 ,用IL 2、IFN γ进行预刺激 1h ,采用ELISA法检测各组培养上清液中MCP 1的水平。结果 与单纯用LPS组相比 ,加入IL 2、IFN γ能明显上调结核患者及健康人PBMC的MCP 1分泌 ,且呈现浓度依赖性 ,两者联用具有协同效应。结论 TH1 类细胞因子IL 2、IFN γ通过上调MCP 1 ,使单核细胞、淋巴细胞向炎症部位趋化 ,参与组织炎症及肉芽肿形成 。

TNBS诱发大鼠结肠炎P选择素的表达及其与TNF-α、IL-8的相关性研究

目的 :研究P 选择素在三硝基苯磺酸 (TNBS)诱发的大鼠结肠炎组织中的表达、循环血中血小板膜表面含量的变化及其与组织TNF α和血清IL 8表达的相关性 ,探讨其在结肠炎发生发展中的作用及血栓并发症形成的可能机制。方法 :用TNBS 乙醇灌肠制作大鼠结肠炎模型 ,分别在制模后 2 4小时、1周和 2周取心脏血 ,放射免疫法测定P 选择素的含量 ,ELISA夹心法检测IL 8的含量 ,免疫组化法分析P 选择素及TNFα在病变部位的表达。结果 :与正常对照组比较 ,P 选择素在结肠组织炎症的各个时间点均有表达 ,阳性表达率大于 5 0 %。血小板膜表面P 选择素在灌肠后 2 4小时未见升高 ,第 1、2周明显升高(P <0 0 1)。血清IL 8含量及TNFα表达曲线变化情况相似 ,在 2 4小时升高最为明显 ,随着病程延长而下降。P 选择素与IL 8在同期炎症中呈正相关 ,而与TNF α无线性相关。结论 :P 选择素在结肠炎症早期介导局部的炎症反应 ,晚期仍然是维持炎症、血栓形成的重要因素之一。P 选择素含量升高和表达增强与IL 8呈正相关 ,与TNF α无线性相关。

Sal B对肝癌细胞株HepG2的促凋亡作用

目的揭示丹酚酸B(Salvianolic Acid B,Sal B)对肝癌细胞株HepG2的杀伤作用。方法用不同浓度的丹酚酸B处理HepG2细胞,37℃培养24h。用RT-PCR检测促凋亡基因Bax的转录水平,并用流式细胞术检测细胞凋亡的水平。结果①100μmol/L、50μmol/L、25μmol/L等浓度的Sal B处理都能使HepG2细胞促凋亡基因bax的转录水平升高,其中100μmol/L处理组最为明显。②不同浓度的Sal B处理都能使HepG2细胞发生凋亡,其中100μmol/L处理组最为明显。结论 Sal B有促进HepG2细胞凋亡的作用。

当归多糖对人头皮毛囊体外培养的影响

目的:评价当归多糖对体外培养人头皮毛囊生长的影响。方法:观察不同浓度的当归多糖对体外培养人头皮毛发生长的影响。结果:低剂量组(62.5μg/mL、125μg/mL)在培养初期和末期加速毛发生长并可延长毛发的生长时间,中剂量组(250μg/mL、500μg/mL)仅在培养初期加速毛发生长而对毛发生长时间的影响不明显,高剂量组(1000μg/mL)在整个生长周期抑制毛发生长,同时缩短毛发生长时间。结论:低剂量当归多糖对体外培养的人头皮毛囊生长有促进作用。

毒物代谢酶基因多态与胃癌的关联

目的:探讨CYP2E1 PstI多态与GSTT1空白基因型与胃腺癌的关联。方法:胃腺癌患者56例及健康人对照56名,分别采用PCR-RFLP技术与多重PCR方法,检测CYP2E1基因型和GSTT1空白基因型。结果:CYP2E1 C_1/C_1基因型在胃癌组和健康人对照组中的分布频率分别是69.6％和46.4％,差异具有显著性(x^2=6.27;P<0.05);GSTT1空白基因型在胃癌和健康人中的分布频率分别为 60.7％和 46.4％,在胃癌中分布频率较高,但未有统计学意义(x^2=2.30;0.1<P<0.25);CYP2El基因与GSTT1基因联合分析,结果显示GSTT1空白基因型/CYP2E1(C_1/C_1)基因联合型在胃癌中的分布频率显著高于其他基因联合型,差异具有统计学意义(x^2=3.98;0.025<P<0.05)。结论:CYP2E1 C_1/C_1基因型与胃癌遗传易感性相关;GSTT1空白基因型不增加胃癌的危险性;基因之间具有联合作用,GSTT1非空白基因型/CYP2El(C_1/C_2或C_2/C_2)基因联合是胃癌的保护因素,GSTT1空白基因型/CYP2E1(C_1/C_1)基因联合是胃癌的危险因素,即同时具有GSTT1空白基因型及CYP2E1 C_1/C_1基因型的个体罹患胃癌的危险性显著增加。

分泌抗CD71人-鼠嵌合抗体的转染瘤细胞分泌抗体的特异性与稳定性的研究

目的 研究在液氮中冻存 2年的分泌抗CD71人 鼠嵌合抗体的转染瘤细胞分泌抗体的特异性、稳定性及抗体产量。方法 利用人IgG和鼠IgG作为浓度标准 ,绘制浓度曲线 ,比较研究转染瘤细胞培养上清的抗体分泌量。腹腔接种转染瘤细胞诱导裸鼠产生腹水抗体 ,经离子交换法纯化 ,电泳鉴定纯化嵌合抗体。结果 1× 10 5个 5ml转染瘤细胞培养 5天的上清中 ,嵌合抗体分泌量为 (0 .5～ 5 ) μg ml。Balb c裸鼠腹腔接种转染瘤细胞后 ,每只裸鼠腹水量在 (3～ 5 )ml,腹水抗体经纯化 ,抗体产量约为 (1～ 2 )mg (ml腹水 )。经离子交换法纯化 ,电泳鉴定 ,在分子量 5 5kDa和 2 5kDa处 ,可见有抗体IgG蛋白质的重链和轻链的染色条带。结论 由我们制备的在液氮中冻存 2年的分泌抗CD71人 鼠嵌合抗体 (D2C)的转染瘤细胞体外生长良好 ,抗体分泌稳定 ,产量高 ,特异性强。

细胞色素p450基因多态与胃癌的关联

目的 近年来 ,环境因素在胃癌病因中的作用受到重视 .个体对肿瘤的易感性因人而异 .现探讨细胞色素p4 5 0 2E1基因多态与胃腺癌遗传易感性的关联 ,进一步揭示胃腺癌的病因 .方法 应用病例对照分子流行病学研究方法 ,采用PCR RFLP技术检测 5 6例湖北地区汉族原发性胃腺癌患者和5 6例健康人CYP2E1基因型 .结果 CYP2E1的C1/C1基因型在胃腺癌患者和健康人中的分布频率分别是 6 9.6 %和 4 6 .4 % ,差异有显著性 (χ2 =6 .2 7;P =0 .0 4 3,OR值为 1.915 ,95 %CI=1.0 5 1～ 3.4 89) .C1等位基因在胃腺癌组的分布频率显著高于健康人组 (χ2 =5 .30 ;P =0 .0 2 1,OR值为 2 .0 5 3,95 %CI =1.10 6～ 3.80 9) .结论 CYP2E1C1/C1基因型可能与胃腺癌遗传易感性相关 ,CYP2E1C1/C1基因型个体发展为胃腺癌的危险性高于C1/C2 及C2 /C2 基因型个体 .

1型糖尿病模型大鼠白细胞介素-17A和B细胞活化因子水平变化及其作用分析

目的:分析白细胞介素-17A(IL-17A)和B细胞活化因子(BAFF)在1型糖尿病(T1DM)发病中的作用。方法:15只SD大鼠随机分为正常对照组(CON组)、T1DM组和2型糖尿病组(T2DM组),链脲佐菌素(STZ)造模成功6周后,称取每只大鼠体重(BW),检测三组大鼠空腹血糖(FBG)和C肽(FCP)及血清、脾脏组织IL-17A、BAFF水平和脾脏抗凋亡基因Bcl-2 mRNA水平,比较各组各指标差异。结果:T1DM组FBG显著高于CON组和T2DM组(P<0.01),FCP和BW显著低于CON组和T2DM组(P<0.01)。T1DM组血清IL-17A和BAFF水平显著高于CON组和T2DM组(P<0.01)。三组间脾组织IL-17A和BAFF蛋白表达T1DM组和T2DM组均高于CON组(P<0.01),T1DM组更高于T2DM组(P<0.01)。三组间脾组织Bcl-2 mRNA表达水平与BAFF蛋白表达趋势一致,T1DM组和T2DM组脾组织Bcl-2 mRNA基因表达均高于CON组(P<0.01),T1DM组更高于T2DM组(P<0.01)。结论:T1DM大鼠外周血和脾组织IL-17A、BAFF及Bcl-2 mRNA表达变化具有相同趋势,提示它们共同参与了T1DM的发生。

RNA干预与microRNA

RNA干预 (RNA mediatedinterference,RNAi)已逐渐成为基因功能研究的重要工具。RNAi主要通过双链RNA的介导 ,特异性地降解相应序列的靶mRNA ,从而阻断相应基因表达的转录后水平的基因沉默 (genesilencing)。microRNAs(miRNAs)是近年才研究发现的一类新型的小分子RNAs。随着对miRNAs进一步研究 ,表明miRNAs具有组织特异性 ,并在生物生长发育阶段中起到重要的调控作用 ,但具体机制还在进一步研究中。随着对microRNAs功能及RNAi作用机理的深入研究 。

GSTM_1基因多态与Hp感染的胃癌关联研究

为研究胃腺癌患者Hp感染和谷胱甘肽 S 转移酶M1(GSTM1)空白基因型的关联 ,探讨Hp感染和GSTM1在胃癌发生过程中的可能机制 ,采用多重PCR法检测 5 6例胃腺癌患者的GSTM1基因型 ,并用组织学染色、快速尿素酶试验及血清Hp抗体检测Hp感染。结果显示胃腺癌患者中Hp感染阳性率为 66.0 7% ,GSTM1空白基因型在Hp+胃腺癌患者中的频率为 67.5 7% ,在Hp 胃腺癌患者中的频率为 3 1.5 8% ,差异有显著性 (P <0 .0 2 5 )。结果表明GSTM1空白基因型在Hp感染的胃腺癌患者中更常见 。

桂皮酸诱导NB_4细胞分化及c-myc和c-fos蛋白表达

目的:探讨桂皮酸对NB4细胞诱导分化的作用及其机制。方法:采用光镜观察形态变化,嗜银蛋白染色检测各组细胞AgNORs颗粒数,流式细胞术检测CD11b和CD33,免疫组化测定细胞c-myc、c-fos蛋白表达。结果:桂皮酸作用NB细胞后,CINN可诱导NB4细胞向终末细胞分化,分化率较对照组差异明显（P<0.01）;细胞AgNOR3颗粒数明显减少（P<0.01）;CD11b表达升高,CD33表达下降;c-myc表达下降,c-fos蛋白表达升高（P<0.05）。结论:桂皮酸能使NB4细胞分化成熟,增殖能力下降,其机制可能是通过凋控NB4细胞的增殖、分化相关的基因c-myc、c-fos表达来抑制细胞增殖,诱导细胞分化。

Granulysin真核表达载体的构建与鉴定

目的:构建颗粒溶解素(granulysin)cDNA真核表达载体。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术从健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC)中扩增出颗粒溶解素蛋白cDNA,经限制性核酸内切酶消化后,插入真核表达载体pcDNA3.1(-)的相应酶切位点,将此重组质粒进行序列测定,并将重组质粒转染COS7细胞,进行基因表达鉴定。结果:重组质粒插入基因序列测定证实为颗粒溶解素cDNA,并能在COS7细胞稳定表达。结论:成功构建颗粒溶解素真核表达载体,为进一步研究其抗结核作用奠定了基础。