以端粒酶为靶点的肿瘤治疗进展

端粒酶是维持端粒长度的逆转录酶,对细胞增殖、衰老及永生化和癌变起重要作用,在多数肿瘤中表达增高。以端粒酶为靶点的反义寡核苷酸、核肽酸及锤头状核酶已成为潜在的肿瘤抑制剂。现就这方面的研究进展作一综述。

顺铂和放疗联合应用在人喉鳞癌细胞中相互作用的研究

目的 研究CDDP和放疗联合应用于人喉鳞状细胞癌细胞的相互作用,以探讨放、化疗两种处理方式应用的顺序及与端粒酶活性的关系。方法 Hep 2 细胞分别经放化疗不同剂量及顺序处理,实验设对照组、CDDP组、放疗组、CDDP+放疗组及放疗+CDDP 组,分别用 MTT 法、端粒酶活性检测PCR ELISA法及聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染法分析各种处理后的细胞存活率及端粒酶活性的变化。结果 CDDP+放疗组比同等处理剂量的放疗+CDDP组的细胞存活率低,且有显著差异。CDDP及放疗均能使端粒酶活性明显增高,并表明为浓度依赖性。但在加入另一种处理后,端粒酶活性降低,其降低的程度与细胞存活率的变化一致(r=0.9445,b=13.61)。结论 对Hep-2 细胞先化疗后放疗的治疗效果优于先放疗后化疗,联合治疗后的端粒酶活性可反映治疗效果。

结肠直肠癌诊治研究新动向

在我国的肿瘤死因中，结肠直肠癌居第4～5位。加强结肠直肠癌的结合临床的基础研究，将基础研究的成果运用于指导临床实践，是提高结肠直肠癌诊治水平的必由之路。现将结肠直肠癌诊治研究的热点总结如下。

急性早幼粒细胞白血病细胞形态学分型与临床关系的研究(英文)

目的 解决急性早幼粒细胞白血病 (M3)目前国内因粗细颗粒混杂而造成的分型困难。方法 以粗颗粒型早幼粒细胞的百分率进行分型 ,规定 :粗颗粒型早幼粒细胞 >70 %为M 3a(粗颗粒型 ) ;30 % <粗颗粒型早幼粒细胞≤ 70 %为M3b(混合颗粒型 ) ;粗颗粒型早幼粒细胞≤ 30 %为M3c(细颗粒型 )。结果 三种亚型的发生率M 3a为 4 2 .31% ,M 3b为 30 .13% ,M 3c为 2 7.5 6 % ;性别分布M3a男性明显多于女性 ,M3b无性别差异 ,M3c女性明显多于男性 ;年龄分布M 3a <M3b <M3c;初诊时发热症状M3b最多见 ,M 3a次之 ,M 3c较少见 ;出血情况M 3a最多见 ,M 3b次之 ,M3c较少见 ;部分M 3a、M 3b的病例胸骨压痛明显 ,M3c未见有之。M3a部分病例有肝肿大 ,M 3b与M3c未见肝肿大者 ;三型的的部分病例均见有脾肿大 ;但三者之间无明显差异 (P >0 .0 5 )。淋巴结肿大以M3b为多 ,M3a次之 ,M3c未见肿大者。Hb、RBC、BPC、WBC的均值M3a <M3b <M 3c ;外周血中早幼粒细胞的数值M3c >M3a >M 3b ;骨髓有核细胞的增生M3a多为增生极度活跃 ,M3b、M 3c多为增生明显活跃 ;粒红比值、早幼粒细胞的百分率、粗颗粒型早幼粒细胞的比值均M 3a >M3b >M3c ;Auer小体的发生M 3b多见 ,M3c较少见 ,M 3a不易见。结论 三种亚型不论在性别、年龄分布上 ,还是在主?

腋淋巴结阴性乳腺癌外周血hMAM检测意义

目的:应用乳腺癌特异性标志物乳腺珠蛋白(hMAM)检测腋淋巴结阴性乳腺癌(axillarylymphnodeneg鄄ativebreastcancer,ALNNBC)外周血中微转移,并探讨其与临床病理因素的关系。方法:采用巢式RT-PCR方法,分别检测62例ALNNBC、6例乳腺良性疾患和6例健康成人女性外周血中hMAMmRNA的表达,并以MDA-MB415细胞为阳性参考检测该方法的灵敏度。结果:ALNNBC外周血hMAM表达阳性率为32.3%(20/62),乳腺良性疾患组和健康成人女性组全部阴性表达;该方法检测外周血微转移的灵敏度达1/106;C-erbB2基因阳性表达者微转移发生率高(P<0.01),月经状态、肿瘤大小、组织学类型、ER状态、p53表达等与微转移无关(P>0.05);复发转移组较无瘤生存组外周血中微转移率高(P<0.01)。结论:hMAM可作为乳腺癌外周血微转移的标志物;ALNNBC微转移与C-erbB2密切相关;外周血微转移可以作为ALNNBC预后指标。

人喉鳞癌细胞端粒长度与放射敏感性的关系探讨

目的 探讨人喉鳞癌细胞端粒长度与放射敏感性的关系,以寻求能够预测肿瘤细胞内在放射敏感性的分子标志物。方法 体外长期传代的人喉鳞癌细胞系Hep 2 经0、2、4、8、12Gy剂量照射3 次后的存活后代体外培养20代,以克隆形成实验测定其放射敏感性参数SF2,用Southern blotting法测定其端粒长度(TRF)。结果 体外长期传代的Hep 2 细胞系随着受照剂量的增加, 其放射存活后代的SF2逐渐升高(P<0.05),其TRF逐渐缩短(P<0.01);而且,SF2与TRF呈现明显的正相关关系(r=0.921,P<0.01)。结论 通过不同放射剂量处理体外长期传代的人喉鳞癌细胞系可获得不同放射敏感性的细胞存活后代,且放射存活后代的放射敏感性与其细胞端粒长度具有较好的负相关关系,提示端粒长度检测有望成为预测肿瘤细胞内在放射敏感性的分子标志物。

人喉鳞癌细胞端粒长度、端粒酶活性与放射敏感性的关系

背景与目的:肿瘤细胞的端粒长度、端粒酶活性与其增殖能力和恶性程度关系密切,而且端粒和端粒酶还可能参与放射诱导的DNA损伤的修复;由此推测肿瘤细胞的端粒长度、端粒酶活性与放射敏感性之间可能存在联系。本研究旨在探讨人喉鳞癌细胞端粒长度、端粒酶活性与放射敏感性的关系。方法:体外长期传代的人喉鳞癌细胞系Hep鄄2经0、2、4、8、12Gy剂量照射3次后的存活后代体外培养20代,以克隆形成实验测定其放射敏感性参数SF2,Southernblot法测定其端粒长度(meanlengthoftelomererestrictionfragments,TRF),TRAP鄄ELISA法测定其端粒酶活性(telomeraseactivity,TA)。结果:人喉鳞癌细胞不同放射剂量存活后代的SF2:0.47～0.64,TRF:3.76～9.43kb,TA:2.606～1.761,且它们各自的SF2、TRF、TA存在差异(P均<0.05);而且,SF2与TRF呈现明显的正相关(r=0.921,P<0.01),SF2与TA呈现明显的负相关(r=-0.929,P<0.01),TRF与TA呈现明显的负相关(r=-0.944,P<0.01)。结论:人喉鳞癌细胞接受不同放射剂量存活后代的放射敏感性与其端粒长度和端粒酶活性具有一定的相关性,提示端粒长度与端粒酶活性检测对预测肿瘤细胞放射敏感性有一定意义。

c-myc基因表达与胃癌病理进展无关(英文)

目的癌基因c-myc在许多肿瘤中都起重要作用。本课题研究胃癌组织中c-myc癌基因表达与胃癌主要病理特征的关系。方法应用非放射性原位杂交技术检测81例胃癌标本中c-myc基因的扩增情况,分析其与肿瘤分化、肿瘤浸润和淋巴结转移的关系。结果在81例胃癌标本中,c-myc基因扩增者有55例(67.9%)。c-myc基因扩增率在肠型胃癌是72.7%(24/33),弥漫型胃癌是64.6%(31/48)(P>0.05);在高分化肿瘤中占74.3%(36/35),低分化肿瘤中占63.0%(29/46)(P>0.05);在肿瘤浸润浅肌层者占81.8%(9/11),浸润深肌层者占65.7%(46/70)(P>0.05);有淋巴结转移者占66.7%(38/57),无淋巴结转移者占70.8%(17/24)(P>0.05)。结论 c-myc基因扩增可能是表示胃癌增生程度的独立指标,是晚期胃癌中常见的癌基因改变。

Survivin与宫颈癌

Survivin是凋亡抑制蛋白 (IAP)家族成员 ,其结构较为独特 ,具有抑制凋亡和调节细胞分裂的双重功能 ,在大多数肿瘤中都有表达。现有文献显示Survivin在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变中的存在、表达状况与正常宫颈上皮组织中有差异 ,可作为新的肿瘤标志物 ,指导宫颈癌的早期诊断及靶基因治疗。

辐射诱导辐射耐受鳞癌细胞株的建立及其生物学特性

目的 通过辐射人喉鳞癌细胞株Hep- 2获得辐射耐受细胞株Hep- 2R ,建立一个放射敏感性研究的对比模型。方法 用γ线反复照射Hep- 2细胞,建立辐射耐受细胞Hep- 2R。成克隆实验法测定两株细胞不同剂量照射后的细胞存活分数,拟合细胞存活曲线比较两种细胞株的放射生物学参数。光镜、电镜、活细胞计数、染色体分析及流式细胞仪周期分布比较其生物学差异。结果 经7个月辐射诱导得到了一个放射敏感性不同于亲本细胞株的Hep -2R细胞株,并已稳定传30代以上且辐射耐受性能稳定。其SF2 =0 .6 80、D0 =3.2 4Gy、Dq=1.90Gy、N =1.80 ,而Hep 2细胞SF2 =0 .4 15、D0=2 .0 6Gy、Dq=1.0 1Gy、N =1.6 4。Hep -2R细胞形态及染色体数目发生了改变,群体倍增时间较亲本细胞延长。细胞周期分析显示G1期细胞增多,S、G2 期细胞减少。结论 通过辐射诱导可以从Hep -2细胞株得到辐射耐受细胞株Hep -2R ,这种相同背景、不同放射敏感细胞株为进一步研究放射敏感性的分子机制提供了一个良好对比模型。

鳞癌细胞株放射敏感性与端粒酶活性及端粒长度变化的关系

目的探索放射抗拒鳞癌细胞株放射敏感性的改变与端粒酶活性、端粒长度变化的关系。方法以人喉鳞癌细胞株Hep2为实验对象,用γ射线反复照射获得具有放射抗拒性细胞株Hep2R,拟合细胞存活曲线比较两种细胞株的放射生物学参数及端粒酶抑制剂AZT(azidothymidine,叠氮胸苷)作用后的变化,用TRAP-ELISA法测定端粒酶活性(OD值),Southernblotting法分析端粒平均长度(TRF),比较端粒酶活性、端粒平均长度的变化。结果辐射诱导出一个具有放射抗拒性的Hep-2R细胞株,并已稳定传代培养30代以上且放射抗拒性能稳定,测得其SF2=0.6798、D0=3.24,Hep-2R细胞的端粒酶活性较Hep-2细胞升高(0.982±0.005vs0.604±0.015),端粒长度延长了2倍(11.12kbvs3.76kb),AZT作用后Hep2R细胞株SF2=0.4892、D0=2.51,端粒酶活性下降为0.708±0.011、端粒长度缩短为10.18kb。Hep2细胞对应的参数SF2=0.4148、D0=2.06,AZT作用后Hep2细胞SF2=0.3843、D0=1.81,端粒酶活性下降为0.364±0.003、端粒长度缩短为2.76kb。结论辐射诱导细胞获放射抗拒性后其端粒酶活性升高、端粒平均长度增长,端粒酶抑制剂能通过降低端粒酶活性、缩短端粒长度而对其有增敏效应。

细胞角质蛋白19与肝癌临床病理关系的探讨

目的 分析原发性肝细胞癌(HCC)患者血清中细胞角质蛋白(CK)19水平与临床病理指标的关系。方法 用放射性核素标记的免疫吸附试验(ELISA)检测101例正常人血清中CK19浓度,确定参考范围;然后测定108例HCC患者术前血清CK19浓度,分析CK19升高者的临床病理特征。结果 正常人血清CK19浓度单侧98％可信区间上限是2.3μg/L。108例HCC患者中,24例(22.2％)CK19水平升高,浓度范围是2.4～4 5.5μg/L,其中12例(11.1％)只有CK19升高而AFP正常。低分化癌的比例在CK19升高者中(37.5％,9/24)高于CK19正常者(20.2％,17/84,x^2=7.362,P<0.05)。门静脉癌栓的比例在CK19升高组(25.0％,6/24)高于CK19正常组(6.0％,5/84,x^2=7.403,P<0.01);TNM Ⅲ/Ⅳ期肿瘤的比例在CK19升高组(54,2％,13/24)亦高于CK19正常组(21.4％,18/84,x^2=13.300,P<0.005)。结论 部分HCC患者血清中CK19升高,可能与肿瘤门静脉癌栓、分化程度更低、病期更晚有关。

γδT细胞的扩增及其信号转导分子ζ链相关蛋白-70的免疫印迹检测

目的 检测人外周血γδT细胞的信号转导分子ζ链相关蛋白-70 （ZAP-70）的表达.方法 应用淋巴细胞分离液常规分离获取健康人外周血单个核细胞（PBMC）,用结核杆菌低分子多肽抗原（Mtb-Ag）刺激PBMC增殖培养,10d后收集细胞,用免疫磁珠阳性分选法分离获取高纯度的γδT细胞；采用免疫印迹方法检测γδT细胞内的ZAP-70分子.结果 新鲜分离的PBMC中γδT细胞的比例仅为4.9％,Mtb-Ag刺激培养10d后升为69.2％,免疫磁珠阳性分选后达99.3％.免疫印迹显示检测到γδT细胞内相对分子质量为70 000的ZAP-70分子的表达.结论 ZAP-70分子在活化增殖的人外周血γδT细胞内高表达.