壳聚糖/Ⅰ型胶原复合支架与滑膜成纤维样细胞构建颞下颌关节盘的研究

目的 探讨利用滑膜成纤维样细胞（SFBs）及壳聚糖/Ⅰ型胶原（CS/COL-Ⅰ）复合支架构建颞下颌关节盘软骨的可行性.方法 获取兔颞下颌关节滑膜组织进行SFBs培养,第3～5代SFBs三维培养于通过冷冻干燥法制备的CS/COL-Ⅰ支架材料中7 d,用噻唑蓝（MTT）比色法分别在1、3、5、7 d检测支架材料对细胞增殖的影响.细胞支架复合物在体外经过人重组转化生长因子β1（rhTGF,10μg/L）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF,50 μg/L）诱导后,植入裸鼠体内4、8周后获取标本,进行组织学检测细胞在支架材料上的生长状态及黏多糖（GAGs）形成,免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）半定量分析Ⅱ型胶原的表达.结果 支架材料表面及内部均呈多孔隙蜂窝状结构.SFBs在CS/COL-Ⅰ中的增殖要明显高于平板培养（P＜0.05）.细胞支架复合物植入裸鼠体内4、8周后,组织学及免疫组织化学半定量分析显示在8周时GAGs（6.900±0.316）和Ⅱ型胶原（0.0952±0.0248）IA/μm2与4周时GAGs（3.600±0.699）和Ⅱ型胶原（0.0411±0.0127）IA/μm2差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 体外诱导后的SFBs/CS-COL-Ⅰ复合物具有应用于组织工程化颞下颌关节盘构建的可能.