A型肉毒毒素对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响

目的探讨A型肉毒毒素对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响。方法在体外分离和培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞过程中加入A型肉毒毒素(稀释成50 U/ml)进行干扰。实验组分为2组,各10例,分别加用2种不同剂量的A型肉毒毒素(1×10~6/ml细胞分别加入肉毒毒素1.0μl和2.5μl)并比较其影响效果。空白对照组8例,培养液中不加A型肉毒毒素。共同培养72 h后,采用免疫组化染色(LsAB法)检测细胞Ki67的表达状况。结果实验组:A型肉毒毒素作用后细胞增殖速度较慢,细胞数量变少。空白对照组:细胞Ki67的阳性表达率为63.2%,不同剂量肉毒毒素实验组细胞中Ki67的阳性表达率分别为33.6%和25.6%。空白对照组与实验组组间比较,其差异具有统计学意义(P<0.01);不同剂量A型肉毒毒素实验组组间比较,其差异也具有统计学意义(P<0.05)。结论 A型肉毒毒素可以抑制瘢痕疙瘩组织中成纤维细胞的增殖活性,且药物剂量越大抑制作用可能更明显。

人乳腺上皮细胞抽提物重编程人脂肪来源干细胞的实验研究

目的观察人乳腺上皮细胞抽提物重编程人脂肪来源干细胞(h ADSCs),使其向上皮细胞转化的可行性。方法采用胶原酶消化法分离并获得脂肪来源干细胞;将超声乳化人乳腺上皮细胞离心后获得抽提物冻存备用;培养第3代h ADSCs,链球菌溶血素O(SLO)处理后,实验组6例加入乳腺上皮细胞抽提液,对照组6例不加乳腺上皮细胞抽提液。细胞培养过程中观察h ADSCs的形态学变化,采用蛋白质印迹法检测卵透明带蛋白1(ZO1)和细胞角蛋白18(CK18)表达的变化。结果流式细胞仪检测结果显示,人脂肪组织分离培养的干细胞表达CD13、CD29、CD44、CD90和CD105呈阳性表达,而不表达CD45。实验组细胞重编程后第16天,细胞形态开始转变为上皮样的圆形;第18天蛋白印迹法检测上皮细胞抗原标志物ZO1和CK18表达增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论人乳腺上皮细胞抽提物可以重编程脂肪来源干细胞,使其向上皮细胞转化。