关节软骨细胞与CD105阳性滑膜间充质干细胞共培养并促进其成软骨分化

目的使用Transwell小室将大鼠关节软骨细胞(ACC)和CD105阳性滑膜间充质干细胞(CD105+SMSC)进行间接共培养,研究共培养体系下CD105+SMSC成软骨分化的能力和伴随的炎症反应情况。方法在体外分离培养大鼠SMSC,通过形态学观察和成骨、成脂、成软骨三系分化鉴定。使用磁珠分选方法(MACS)筛选出表面标记为CD105阳性的细胞,并用免疫荧光和流式细胞学方法鉴定。体外分离培养大鼠ACC,用形态学观察及甲苯胺蓝染色鉴定。ACC按一定比例(4∶1,2∶1,1∶1,1∶2,1∶4)与CD105+SMSC在Transwell小室中间接共培养,另设单独培养的CD105+SMSC作阴性对照,CD105+SMSC+成软骨诱导培养液(chondrogenic culture medium,CCM)作阳性对照。在培养的第14天提取各组CD105+SMSC总RNA,使用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测二型胶原(Col2A1),蛋白聚糖(aggrecan)、性别决定区Y框蛋白9(SOX-9)、转化生长因子-β3(TGF-β3)等相应的成软骨指标表达,检测聚蛋白多糖酶-5(ADAMTS-5)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、Runt相关转录因子-2(RUNX-2)等炎症指标的表达。结果分离培养后的SMSC可进行成骨、成脂、成软骨三系分化。MACS分选后可见免疫荧光和流式细胞学鉴定均提示CD105阳性。与软骨细胞间接共培养14 d后,Real-time PCR检测结果示,与阴性对照组相比,2∶1和1∶1实验组的各成软骨指标较阴性对照组上升,ADAMTS-5和RUNX-2炎症指标无明显改变,MMP-3和MMP-13指标显著下降。结论与ACC间接共培养可以促进CD105+SMSC向成软骨方向分化,并能够在一定程度上降低其分化过程中的炎症反应。

携带miRNAs的MSCs来源外泌体在软骨退变损伤修复中的研究进展

软骨退变损伤(骨关节炎等)发病率呈逐年上升的趋势,给家庭和社会带来沉重压力。间充质干细胞能修复受损软骨已成为共识,随着研究的深入越来越多的证据显示其作用归结于旁分泌系统,尤其是外泌体。外泌体是一脂质双分子层囊性结构,包裹有蛋白质、脂质、mRNA、microRNAs(miRNAs/miRs)等生物活性因子,能够调节细胞的生物学功能。作为细胞间传递重要信息的信号和载体,在软骨退变损伤的修复中发挥着非常重要的作用。文章主要对携带miRNAs的间充质干细胞来源外泌体在软骨损伤修复中的研究进行综述。

干细胞治疗闭合性不完全肌腱损伤的研究进展

随着体育事业和全民健身的发展,闭合性不完全肌腱损伤发病率逐年上升。目前,临床上常用的治疗方法如非甾体类抗炎药、针灸理疗和声光电刺激等都存在一定的局限性。近年来,基因工程和组织工程不断发展,为干细胞治疗闭合性不完全肌腱损伤打下良好基础。但纵观国内外文献,应用干细胞治疗运动员闭合性不完全肌腱损伤的专题研究较少,本文拟对相关研究做一总结,为后续研究和临床治疗提供参考。