医学留学研究生病理生理学实验教学体会

留学生教育是我国高等教育的一个重要组成部分。针对近年来我校来华医学留学研究生教育持续发展的现状,我们从抓住学生特点,改进病理生理学教学方法和手段,重视实验教学等方面进行分析,从而探究适合我国的医学留学研究生病理生理学教学方法。

PKC-β抑制剂LY333531对糖尿病肾脏NADPH氧化酶与SOD蛋白表达的影响

目的研究蛋白激酶C（protein kinase,PKC）-β抑制剂LY333531对糖尿病肾脏尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide dinucleotide phosphate,NADPH）氧化酶与超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的影响。方法 24只SD雄性大鼠（240~260 g）,采用抽签法随机分为正常对照组（normal control,NC）、糖尿病组（diabetes mellitus,DM）及LY333531（LY）治疗组。LY组灌胃给予PKC-β抑制剂LY333531〔1 mg/（kg.d）〕治疗4周后测量血糖、肾质量/体质量、24 h尿蛋白、内生肌酐清除率（creatinine clearance rate,Ccr）、游离15-F2t-Isoprostane、总抗氧化浓度及SOD活性。Western blotting分析NADPH氧化酶亚基P22phox与P67phox,SOD亚型Cu/Zn-SOD与Mn-SOD蛋白改变。结果与NC组比较,DM组血糖、肾质量/体质量、24 h尿蛋白、Ccr、血浆与肾脏中15-F2t-Isoprostane、血浆总抗氧化浓度及P22phox与P67phox表达明显增加,而肾脏总抗氧化物浓度、血浆与肾脏SOD活性、Cu/Zn-SOD及Mn-SOD蛋白表达明显减少（P〈0.05）。LY333531除对血糖与Mn-SOD的表达无显著影响外,均能显著逆转上述变化。结论 LY333531通过抑制糖尿病肾脏NADPH氧化酶的活化与表达,及促进Cu/Zn-SOD的表达而恢复SOD活性,以减少早期糖尿病肾脏的氧化损伤,从而发挥其保护肾脏作用。

甘露醇与尼莫地平联合应用对大鼠创伤性脑水肿以及水通道蛋白-4表达的影响

目的观察甘露醇与尼莫地平联合应用对大鼠挫裂伤脑组织水通道蛋白-4(AQP-4)表达的影响。方法成年Wistar大鼠54只,随机分为挫裂伤组、甘露醇治疗组、甘露醇与尼莫地平联合治疗组。采用文献报告的方法制作大鼠左顶叶皮层局限性脑挫裂伤模型。各组分别于脑挫裂伤后24、48、72h取挫伤区脑组织,检测其含水量以及AQP-4的表达。结果随着伤后时间的增加,各组脑组织含水量增加,AQP-4 mRNA和AQP-4蛋白的表达均逐渐增高(P<0.05);与挫裂伤组相比较,甘露醇治疗组伤后各时间点脑组织含水量、AQP-4mRNA和AQP-4蛋白的表达均明显增加(P<0.05);甘露醇与尼莫地平联合治疗组伤后各时间点与前两组相比,脑组织含水量及AQP-4mRNA和AQP-4蛋白的表达均明显降低(P<0.05)。结论脑挫裂伤后,AQP-4mRNA和AQP-4蛋白的表达增加;脑组织含水增加,甘露醇联合应用尼莫地平后,能够下调AQP-4 mRNA和AQP-4蛋白的表达,有效缓解创伤性脑水肿。

重组人白细胞介素10的融合表达及鉴定

目的 研究重组人白细胞介素10(rhIL-10)载体在大肠杆菌BL21(DE3)pLyse细胞中的表达,为进一步研究IL—10在动脉粥样硬化中的作用机制奠定基础。方法 用构建成功的IL-10-PCR(?)T7/NT-TOPO(?)质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLyse细胞,并通过SDS-PAGE鉴定融合表达蛋白。结果 PCR(?)T7/NT-TOPO(?)质粒载体成功载入rhIL-10基因;在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下表达的蛋白质主要以包涵体形式存在。结论 在IPTG诱导下,重组的IL-10-PCR(?)T7/NT-TOPO(?)质粒载体在大肠杆菌BL21(DE3)pLyse细胞内成功表达。