武汉大学与芝加哥大学CPPT病理学教学的异同

临床病理生理及治疗(clinical pathophisiology and therapy,CPPT)教学模式,即将原有的病理、病生、诊断学、内外妇儿等学科的部分或全部内容整合。病理学教学贯穿整个CPPT教学,其不仅教会学生病理学的基础知识,而且培养学生的临床思维、整合知识及解决问题的能力。文章探讨武汉大学与芝加哥大学CPPT教学模式中病理学教学的异同,以促进教师的自我学习和提高,更好地推广CPPT教学模式。

CPPT临床病理学线上教学效果分析

武汉大学第二临床学院CPPT教学模式中临床病理学的理论与实验教学已逐步趋于成熟与完善。文章旨在对武汉大学第二临床学院临床医学本科生病理学线上教学效果进行评估及分析,比较不同年级同一课程采用线上教学模式和采用线下教学模式的教学效果,评估采取线上教学能否完成学生的学习目标及要求,并总结心得体会。

转移性肾细胞癌14例临床病理学特征及鉴别诊断

目的探讨转移性肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法回顾性分析14例发生癌转移的RCC患者的临床资料、组织病理学特征以及免疫表型。结果发生癌转移的患者绝大多数为男性,最常见转移类型是透明细胞性RCC,转移性Ⅱ型乳头状RCC及肉瘤样RCC各1例。最常转移的部位为肺,其次是腹膜后,其余病例转移至少见部位。镜下观察转移灶肿瘤仍具有其对应类型RCC独特的形态特征。免疫表型:几乎所有病例PCK、vimentin及CD10阳性,少数病例表达CK7。结论 RCC的转移有其相对独特的组织学表现,仔细观察转移灶的形态特征,重视临床病史的采集及合理应用PCK、vimentin及CD10联合标记,有助于正确诊断及提示原发部位。

设计性病理学实验教学改革初探

病理学是介于基础医学与临床医学之间的重要的"桥梁"学科,病理学实验教学水平直接影响着这座"桥梁"的搭建质量。随着现代科技发展和医学教学模式的改变,培养和提高医学生的创新意识和实践能力已成为目前高校教学改革的趋势。文章针对病理学实验教学的特点,探讨了设计性实验教学在病理形态学实验教学中的运用,为医学教育的深化改革提供可靠的支持。

线上病理学实验课翻转课堂教学初探

全球新冠疫情不断反复,形态学实习课如何转化为线上教学急需探索。本研究介绍2020年初新冠疫情爆发时,武汉大学病理学教研室采用线上翻转课堂模式为2018级临床医疗专业学生进行病理学实验课教学。具体方案为提前布置需掌握的基本病变归纳形成的题目,让学生分组讨论并总结、完成线上课堂PPT演示,经过学生讨论、教师点评、总结,最后使用“问卷星”完成学生对课程的评价。学生对线上翻转课堂的接受度较高,且相较课前,学生们使用形态学网站的意愿显著提升(P<0.01)。

47例软组织颗粒细胞瘤临床病理分析

目的回顾性分析47例软组织颗粒细胞瘤(GCT)的临床病理特征并行增殖活性检测。方法收集1975至2008年武汉大学附属医院病理科GCT存档资料47例,分析其临床及组织病理学特征并随访,应用免疫组化方法行S-100、CD68、NSE及Ki-67染色。结果 GCT好发于舌部,女性多见。镜下观察所有肿瘤由多边形瘤细胞组成,胞质中有丰富的嗜酸性颗粒,且S-100、CD68及NSE染色均为阳性。24例良性GCT呈膨胀性生长,其余20例良性及3例细胞不典型性病例均为侵袭性生长。少数肿瘤细胞Ki-67染色阳性。随访的30例中1例肿瘤细胞明显呈不典型性者复发并死亡,1例细胞典型性者复发后组织学呈不典型性,1例细胞典型性者复发两次后组织学呈恶性,27例无复发。结论大多数软组织GCT为良性,少数具有潜在恶性,应注意随访。少数肿瘤细胞Ki-67阳性提示该肿瘤具有较低的增殖活。

多光谱成像系统在病理诊断中的应用

目的探讨多光谱成像(multispectral imaging,MSI)系统在病理诊断中的应用及其价值。方法利用量子点免疫荧光双重标记技术同时检测肺癌组织中CD147和p53蛋白的表达,以及乳腺癌组织中HER-2和CK蛋白的共表达。利用显色原位杂交(chromogenic in situ hybridization,CISH)技术检测乳腺癌组织中Her-2基因的扩增;以及子宫颈癌组织中HPV16/18的感染。对获得的图像均进行MSI系统分析处理。结果 MSI系统可以获得不同染料(如量子点、DAB、苏木精)标记的蛋白和DNA以及自发荧光的光谱曲线,然后通过复杂的光谱学算法,清除自发荧光,最后获得各指标的形态学、定量、空间分布和共定位信息。结论 MSI系统明显提高了组织切片的信噪比,还可将每种信号进行单独分离、定量,为多指标检测提供可行性,使之在病理诊断中有着很好的应用价值。

原发性中枢神经系统恶性淋巴瘤临床病理分析

目的：探讨原发性中枢神经系统恶性肿瘤的临床病理特点、诊断及鉴别诊断。方法：对10例原发性中枢神经系统恶性淋巴瘤进行临床资料分析及光镜和免疫组化研究。结果：临床上以颅内压高为主要症状,组织学特征：瘤细胞单一、异型、围绕血管呈套袖样排列,无滤泡形成；免疫组化：LCA、CD20或CD43阳性,CK、GFAP阴性,提示多为B细胞性。结论：原发性中枢神经系统恶性淋巴瘤有其独特的临床病理特点,需与其他颅内小圆形细胞肿瘤鉴别,光镜结合免疫组化染色可以确诊。

量子点免疫荧光技术在病理诊断中的初步应用

目的利用量子点(quantum dots,QDs)免疫荧光技术检测石蜡包埋组织中不同蛋白的定位与免疫酶法进行比较,以及两种蛋白的共表达,并探讨其初步应用价值。方法利用QDs免疫荧光和免疫酶组织化学方法分别检测正常阑尾组织LCA、乳腺肌上皮组织Calponin、肺癌组织p53蛋白的表达,并利用QDs免疫荧光双标法同时检测了宫颈上皮内瘤变组织内CK和PCNA蛋白、乳腺癌组织内Her-2和CK蛋白的共表达。结果QDs免疫荧光和免疫酶组织化学技术分别检测LCA、Calponin和p53蛋白的定位完全一致。QDs免疫荧光双标法结合多光谱成像可同时观察到宫颈上皮内瘤变组织内CK和PCNA蛋白、乳腺癌组织内Her-2和CK蛋白的共表达。结论QDs免疫荧光组织化学法具有与免疫酶法等同的应用价值。QDs免疫荧光双标法可同时检测不同蛋白的共定位。

医学本科生早期接触科研工作模式的探究

创新精神在任何领域都不容忽视,而科学研究应是医学生在本科阶段创新思维的最好体现。但是对于传统的本科生来说,科研只是一个可望而不可及的概念。而通过组建本科生的科研团队,不仅为本科生开展科研活动提供了有效途径,而且还能兼顾科学素养与实践能力的培养。本科生科研团队这一模式作为新时期下医学院校培育人才模式的探索,在提高学生创新意识和综合素质方面起到了模范作用。

20例眼部黑色素瘤的临床影像及病理特征的分析

目的:分析眼部黑色素瘤的临床影像及病理特征以及影响预后的因素。方法:收集自2008年1月~2018年12月在某院就诊的20例眼部黑色素瘤的患者资料进行临床影像和病理特征的回顾性分析及预后相关性。结果:发生部位:葡萄膜有16例其中虹膜3例,睫状体1例,脉络膜12例;结膜2例,眼睑皮肤1例,眼眶继发性肿瘤1例;病理分型:梭A细胞型9例,梭B细胞型5例,混合细胞型3例,上皮细胞型2例,其他型1例,其中梭形细胞型占70%(14/20),显著高于其他亚型30%(6/20)(χ2=6.4,P=0.011);免疫组化显示:S-100蛋白阳性20例,HMB-45呈阳性18例,Melan-A阳性有15例。三者联合检测的灵敏度为100%,特异度为88.33%。临床表现无特异性,与发生部位有关,预后与病理分型、肿瘤大小及发病年龄等相关。结论:眼部黑色素瘤在临床上比较少见,恶性程度高,预后不佳,病理分型以梭形细胞型为主,早期诊断和扩大切除是改善眼部黑色素瘤预后的重要手段。

不同宫颈组织中PIK3CA、PTEN和p16蛋白表达及其与HPV16/18感染的关系

目的探讨PIK3CA、PTEN和p16蛋白在人正常宫颈上皮、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepitheli-al neoplasia,CIN)和宫颈鳞癌组织中的表达,以及PIK3CA、PTEN和p16蛋白表达与人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)感染之间的关系。方法采用免疫组织化学二步法在22例健康者宫颈组织、72例宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和30例宫颈鳞癌组织中检测PIK3CA、PTEN和p16蛋白的表达,显色原位杂交方法检测高危型HPV16/18的感染。结果 PIK3CA和p16蛋白表达阳性率和HPV16/18的感染率均随着宫颈上皮逐渐恶变而上升,PTEN蛋白表达却呈现相反的结果。PIK3CA、PTEN、p16蛋白和HPV16/18的感染率在宫颈鳞癌和CINⅡ～Ⅲ组中的表达分别与对照组和CINⅠ组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。在宫颈上皮内瘤变组织中,39例(76.47%)CINⅡ～Ⅲ中显示PIK3CA阳性,仅有9例(42.86%)CINⅠ中显示PIK3CA阳性,两组间差异有统计学意义(P=0.006),而PTEN和p16蛋白在宫颈上皮内瘤变不同组别中相比差异均无统计学意义。在81例CINⅡ～Ⅲ和鳞癌组织中,PIK3CA和p16蛋白呈显著正相关关系(P=0.000,r=0.544)。PIK3CA、p16蛋白与PTEN蛋白表达之间,两者均呈显著负相关(P<0.05)。HPV16/18阳性的47例标本中,PIK3CA和p16蛋白几乎均呈阳性表达,呈显著正相关(P<0.01),但PTEN蛋白却有37例呈阴性表达,无显著相关(P=0.116)。结论 PIK3CA、PTEN、p16蛋白表达以及高危型HPV感染与宫颈癌的发生发展均密切相关。PIK3CA、PTEN、p16蛋白和高危型HPV感染联合检测,可作为宫颈癌早期癌变的分子标志物。高危型HPV感染可能有助于PIK3CA和p16蛋白的高表达。

大环内酯类药联合糖皮质激素促进哮喘大鼠嗜酸性粒细胞凋亡

目的研究大环内酯类药联合糖皮质激素对哮喘大鼠肺组织的支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavagefluid,BALF)中嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)凋亡相关蛋白cleaved caspase-9、Bak表达的影响。方法以卵白蛋白致敏制作大鼠哮喘模型,将大鼠分为5组:对照组、哮喘模型组、干预组A1(红霉素)、干预组A2(地塞米松)、干预组A3(红霉素+地塞米松)组,每组10只。并对其BALF中嗜酸性粒细胞进行计数,TUNEL法检测EOS凋亡;ELISA法测定BALF中IL-5、IL-8水平;Western blot检测EOS中cleaved caspase-9、Bak蛋白的表达。结果模型组BALF中细胞总数、EOS所占比例均显著高于对照组和干预组(P<0.01);凋亡率显著低于对照组和干预组(P<0.01)。对照组及干预组BALF中IL-5和IL-8浓度均低于模型组(P<0.01);干预组A3中两者浓度又分别低于干预组A1和干预组A2(P<0.01)。对照组、干预组分别与模型组相比,cleaved caspase-9、Bak蛋白表达的差异均有统计学意义(P<0.01);干预组A3分别与干预组A1、A2相比,cleaved caspase-9、Bak蛋白表达均有统计学差异(P<0.01)。结论大环内酯类药可协同糖皮质激素通过上调cleaved caspase-9、Bak的表达促进EOS细胞凋亡,从而发挥抗炎作用。

EMMPRIN、HER-2蛋白表达与胃癌侵袭转移的关系

目的:探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)、人表皮生长因子受体2(HER-2/neu)蛋白表达与人胃癌侵袭转移的关系,以及2种蛋白表达之间的关系.方法:应用量子点免疫荧光组织化学技术检测人胃癌组织芯片150芯(包括70例胃癌组织和5例正常胃黏膜组织)中EMMPRIN和HER2的蛋白表达,并分析他们与临床病理特征的相关性.结果:胃癌和正常胃黏膜组织中的EMMPRIN阳性表达率分别为72.86%和20.00%,差异有显著性(P=0.029).在胃癌组织中HER-2蛋白的阳性率为47.14%(33/70),高于正常胃黏膜组织,但差异无显著性(P=0.063).EMMPRIN、HER-2蛋白表达与胃癌患者年龄、性别、分化程度、肿瘤的浸润深度以及临床TNM分期之间差异均无显著性(P>0.05),仅与淋巴结转移显著相关(P<0.05).在70例胃癌组织中EMMPRIN与HER-2蛋白表达之间呈显著正相关(r=0.383,P=0.001).结论:EMMPRIN与HER-2/neu可能协同促进了胃癌的淋巴结转移.

应用特异性突变抗体检测人非小细胞肺癌组织中EGFR突变

目的探讨应用特异性表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变抗体结合免疫组化Labvision染色检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中EGFR突变的可行性,并与罗氏454下一代测序法比较其灵敏度和特异性。方法随机选择68例NSCLC,通过特异性突变抗体结合免疫组化染色和罗氏454下一代测序系统检测EGFR的突变状态。结果 EGFR突变蛋白阳性定位于肿瘤细胞质和(或)胞膜。免疫组化检测显示NSCLC中EGFR突变阳性率为36.76%(25/68),其中鳞癌的突变率为9.52%(2/21),腺癌的突变率为48.94%(23/47),二者差异有显著性(P<0.05)。罗氏454下一代测序法检测NSCLC中EGFR突变阳性率为39.71%(27/68),其中鳞癌的突变率为9.52%(2/21),腺癌的突变率为53.19%(25/47),二者差异有显著性(P<0.05)。免疫组化染色与罗氏454下一代测序法检测EGFR突变具有极好的一致性(Kappa=0.876,P<0.001)。结论 EGFR突变特异性抗体的免疫组化检测是一种可在NSCLC中进行EGFR突变筛查,并对表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂治疗快速反应的方法,检测费用较低、耗时较短且结果易于判读,可以在临床进行广泛推广。EGFR突变在肺腺癌中更为常见。

藤梨根乙酸乙酯提取物促凋亡作用的实验研究

目的:探讨藤梨根乙酸乙酯提取物对肿瘤细胞的促凋亡作用。方法:MTT比色法检测藤梨根乙酸乙酯提取物在不同浓度及不同时间对人食管癌Eca-109细胞生长作用,TUNEL法检测其对癌细胞生长的诱导凋亡效应。结果:藤梨根乙酸乙酯提取物对人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强。提取物对瘤细胞有明显的凋亡效应。结论:藤梨根乙酸乙酯提取物通过促凋亡作用能有效抑制人食管癌Eca-109细胞的生长。

DNA修复基因Rad51和ERCC1蛋白在人肺鳞癌中的表达意义

目的探讨DNA修复基因Rad51和ERCC1蛋白表达与肺鳞癌临床病理特征的关系。方法采用二步法(非生物素)检测系统结合组织芯片技术检测60例肺鳞癌和15例癌旁肺组织中Rad51和ERCC1的蛋白表达。结果在肺鳞癌组织中Rad51和ERCC1蛋白阳性表达率分别为33.33%(20/60)、41.67%(25/60),均显著高于癌旁肺组织(P<0.05)。但Rad51和ERCC1蛋白阳性表达率与肺鳞癌的临床病理参数均无关(P>0.05)。60例肺鳞癌组织中,Rad51和ERCC1蛋白共同阳性表达14例,共同阴性表达29例,二者呈显著正相关(r=0.406,P=0.001)。结论肺鳞癌中存在Rad51和ERCC1蛋白表达,二者协同作用可能与肺鳞癌的发生发展有关。

基质窖蛋白-1在食管鳞癌中的表达及与自噬的关系

目的探讨基质窖蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)在人食管鳞癌组织中的表达以及与自噬标志物——微管相关蛋白轻链3B(microtubule associated protein light chain 3B,MAP-LC3B,简称LC3B)的关系及其临床病理意义。方法利用量子点免疫荧光组织化学技术检测基质Cav-1和LC3B蛋白在76例食管鳞癌组织和15例非癌变食管黏膜上皮组织中的表达。结果基质Cav-1和LC3B蛋白在食管鳞癌组织的阳性表达率分别为28.9%和64.5%,与非癌变食管黏膜上皮组织比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。基质Cav-1的阳性表达与食管鳞癌TNM分期和淋巴结转移均显著相关(P<0.05),而与其他临床病理参数均无关(P>0.05)。LC3B与肿瘤浸润范围、TNM分期和淋巴结转移均显著相关(P<0.05)。基质Cav-1和LC3B蛋白在食管鳞癌中的表达呈正相关(r=0.353,P=0.002),二者缺失表达能更好地预示淋巴结的转移。结论基质Cav-1和LC3B表达缺失可协同促进食管鳞癌的形成和恶性进展。

shRNA抑制SGK1基因表达对人乳腺癌细胞系生物学特性的影响

目的建立稳定抑制血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)表达的人乳腺癌细胞系MDA-MB-231,观察SGK1基因沉默对人乳腺癌细胞生物学特性的影响。方法构建针对SGK1的shRNA干扰质粒pGen-3-siSGK1和阴性对照质粒pGen-3-control。转染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231,经G418筛选得到稳定抑制SGK1表达的乳腺癌细胞模型;实时定量PCR、免疫荧光以及Western blotting检测shRNA干扰组、阴性对照组及未转染组细胞中SGK1的表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞体外生长能力;体外浸润实验、细胞迁移实验检测各组癌细胞的侵袭和转移。结果成功构建针对SGK1基因的shRNA干扰质粒,建立了稳定抑制SGK1表达的乳腺癌细胞模型;与阴性对照组和未转染组相比,肿瘤细胞中SGK1的表达水平显著降低(P<0.01);SGK1基因沉默后,人乳腺癌细胞的生长能力、浸润和迁移能力均明显降低(P<0.05)。实验中还发现抑制SGK1基因表达之后,β-catenin的含量也出现明显下降。结论抑制SGK1基因的表达可以显著抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长,并降低其侵袭转移的能力,其中β-catenin参与了SGK1基因的抑制功能。

MMP-9和TIMP-1在不明原因不孕症患者子宫内膜的表达

目的检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)在不明原因不孕症子宫内膜和正常子宫内膜中的表达,探讨两者与不明原因不孕的关系。方法应用免疫组化SP法,检测MMP-9和TIMP-1在20例不孕症患者的种植窗期子宫内膜和20例正常子宫内膜中的表达。结果MMP-9/TIMP-1在2组子宫内膜的腺上皮细胞和基质细胞的胞浆中均有不同程度的表达。MMP-9/TIMP-1在正常子宫内膜中呈高表达状态;在不孕子宫内膜表达较低,与正常子宫内膜组织相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论不明原因不孕症妇女子宫内膜种植窗期MMP-9和TIMP-1的低表达,可能是导致不明原因不孕症的重要因素之一。