水稻红莲型细胞质雄性不育基因orfH79的表达对细菌生长的抑制

orfH79是水稻红莲型细胞质的雄性不育基因。为了进一步研究其分子机理,在大肠杆菌中分别构建水稻红莲型细胞质雄性不育基因orfH79的原核表达载体pET-28a-orfH79和pGEX5x-2-orfH79。分别转化大肠杆菌菌株BL21(DE3)后利用IPTG诱导分析其表达产物对细菌生长的影响,结果表明PET-28a-orfH79重组子诱导表达的微量的ORFH79天然蛋白强烈的抑制了细菌的生长,而pGEX5X-2-orfH79重组子诱导表达的在ORFH79蛋白N端带GST标签的融合蛋白对细菌的生长影响却并不明显。这一结果为思考水稻红莲型细胞质雄性不育的分子机理提供了研究线索。

Gateway技术构建盐和干旱胁迫下水稻根系混合cDNA文库及其质量鉴定

为研究水稻非生物胁迫响应信号转导的网络途径,揭示水稻抗逆的分子机制,以NaCl胁迫、干旱胁迫处理及正常生长的水稻根系为材料,采用Gateway技术构建了水稻根系受盐和干旱诱导的混合cDNA文库.cDNA文库质量分析表明,未经扩增的原始文库容量为1.5×106 cfu,插入片段大小主要为1 kb左右,重组率为100%.文库随机挑选克隆测序,结果显示插入序列完整性良好,文库中包含水解酶基因、逆境响应蛋白基因、氧化还原酶基因和富含甘氨酸的RNA结合蛋白质基因等.因此,本研究构建的盐和干旱诱导的水稻根系混合cDNA文库符合高质量文库的标准,可以用于进一步开展相关基因的克隆及功能研究.