人肝癌细胞差异表达基因纤维蛋白原γ-多肽的克隆与鉴定

背景与目的:肝细胞癌(肝癌)的发生、发展与基因的异常表达有关,但详细机制还不清楚,原因在于目前所知的遗传学信息尚欠充分;本研究旨在探索新的人肝癌细胞差异表达基因。方法:应用抑制性消减杂交技术获得肝癌细胞消减cDNA,以T/A方法进行克隆,通过DNA测序分析、Northern印迹杂交、cDNA末端快速扩增(rapidamplificationofcDNAend,RACE)和RT-PCR等方法加以鉴定。结果:在被克隆的消减cDNA之中,一个长度为787个核苷酸的差异表达cDNA片段经Northern印迹分析,发现其在两种人肝癌细胞株SMMC-7721和HepG2中的表达均明显高于正常肝细胞;经过RACE后获得一个长度为1597bp、具有3'端polyA结构的基因序列,它含有完整的开放阅读框,编码437个氨基酸,经同源性分析证实该基因为编码人纤维蛋白原γ-多肽(fibrinogengammapolypeptide,FGG)的基因;RT-PCR分析证明癌组织中FGGmRNA表达水平较癌旁非癌组织明显增加,尤其是在肝癌转移灶中。结论:SMMC-7721和HepG2细胞中发现FGG高表达,FGG基因的上调表达是肝癌病理过程中一个重要分子事件。

菲咯啉铜与脂质体过氧化损伤

目的 :探讨菲咯啉铜配合物与脂质体过氧化损伤的相关性。方法 :采用紫外吸收法和TBA法研究了菲咯啉铜配合物启动的脂质体过氧化反应。结果 :发现菲咯啉 (Phen)与Cu2 + 螯合形成 (Phen) 2 Cu2 + ,还原剂是 (Phen) 2 Cu+介导的脂质体过氧化作用的重要条件。羟基清除剂及EDTA可抑制菲咯啉铜配合物介导的脂质体过氧化反应。结论 :Phen在还原剂存在下与Cu2 + 形成 (Phen) 2 Cu+ 后产生·OH ,·OH可能是 (Phen) 2 Cu+