Ribozyme是唯一的非酶生物催化剂吗?

人们一直认为酶是唯一的生物催化剂，酶和生物催化剂概念具有等价性。Ｒｉｂｏｚｙｍｅ的发现打破了这种等价性，生物催化剂上升为属概念，酶和ｒｉｂｏｚｙｍｅ并列成为种概念。随着研究的深入，人们发现ＤＮＡ也具有催化活性。本实验室对博莱霉素（ＢＬＭ）的研究表明，ＢＬＭ介导的ＤＮＡ断链反应具有许多类似酶促反应的特性，并推测ＢＬＭ和生物体内的许多辅酶可能是生物催化分子进化过程中保留下来的古老而简单的小分子生物催化剂。可以断言ｒｉｂｏｚｙｍｅ并非唯一的非酶生物催化剂。

博莱霉素A_5、Fe^（2＋）、O_2混合的化学发光研究

利用超弱发光仪测得博莱霉素Ａ５（ＢＬＭＡ５）、Ｆｅ２＋、Ｏ２混合物有微弱化学发光，最大发射波长约为５９０ｎｍ；发光强度随ＢＬＭＡ５或Ｆｅ２＋浓度增大而增强；·ＯＨ清除剂甘露醇对发光无影响；Ｃｕ２＋、ＥＤＴＡ、ＤＮＡ对化学发光均有不同程度的抑制作用。上述结果说明：ＢＬＭＡ５与Ｆｅ２＋、Ｏ２混合可形成某种激发态复合物，并显示该激发态的形成与·ＯＨ无关，提示该激发态复合物可能是ＢＬＭＡ５降解ＤＮＡ的启动因子。

化学标记技术及其在药物和临床检测中的应用

概述了多种化学标记技术（如荧光标记、化学发光标记、稀土离子标记、酶标记、生物素标记、地高辛标记、胶体金标记、同位素标记、自旋标记等）的原理及其在药物分析和临床检测中的应用。

牦牛血超氧化物歧化酶电泳多谱带现象研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳、线性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳、制备电泳、等电聚焦电泳以及不同试剂处理等多种方法对牦牛血铜锌超氧化物歧化酶电泳多谱带现象进行了研究。结果表明在不同的实验条件下 ,各带会发生相互转化。

韭菜细胞溶质超氧化物歧化酶的纯化和性质

经硫酸按沉淀、SephadexG－200凝胶过滤和DEAE－Sephacel层析3个步骤，将韭菜细胞溶质SOD纯化到均一程度。从500g叶片中得到2·4mm酶，酶比活力达13000U／mm蛋白。鉴定该酶是Cu·Zn—SOD。测得酶分子量约为30900道尔顿，亚基分子量约为15900道尔顿，N一末端氨基酸为丙氨酸。该酶在紫外与可见光区吸收峰分别在260urn和680urn。实验表明该酶热稳定性良好。

菲咯啉铜切割DNA反应的微量热法研究

利用流动式和间歇式微量热法研究了菲咯啉铜(Ⅱ)-巯基乙醇-O_2体系切割小牛胸腺双链DNA(ds DNA)反应的热力学,确定该DNA断链的总反应为较快的放热反应和焓驱动的反应,但该反应的前期为快速吸热过程,310.15K和pH=7.0时该反应的总摩尔反应焓(△_rH_(m,3))和前期摩尔反应焓(△_rH_(m,1))分别为-35.1和7.29kJ·mol^(-1).同时采用琼脂糖凝胶电泳法观察到了菲咯啉铜(Ⅱ)-巯基乙醇-O_2体系对DNA链的断裂现象.

韭菜线粒体锰超氧化物歧化酶纯化及性质研究

经硫酸铵沉淀、DEAE－Sephacel层析和SephadexG－200凝胶过滤，将韭菜线粒体SOD纯化到均一程度。从6000g韭菜叶片线粒体中纯化得到2．5mg酶，酶比活力达1200U／mg蛋白。该酶对KCN和H2O2都不敏感，热稳定性弱，紫外光区吸收峰在280um，凝胶过滤法测得其分子量为82000D，SDS－PAGE法测得其亚基分子量为22000D，DNS法测得其N-末端氨基酸为缬氨酸。上述结果表明该酶是由4个相同亚基组成的Mn－SOD。

小葱叶胞质中3种Cu·Zn-SOD的纯化及性质研究

超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）是一种消除体内氧自由基损伤的重要因子，可分为ＣｕＺｎ－ＳＯＤ、Ｍｎ－ＳＯＤ和Ｆｅ－ＳＯＤ．作者在小白菜叶中曾发现５种ＳＯＤ，已鉴别其中一种为Ｍｎ－ＳＯＤ，来源于线粒体［１］；其余４种为ＣｕＺｎ－ＳＯＤ，其中２种分别来源于胞质［...

有氧溶液中博莱霉素A_5与铁的复合物的瞬态荧光的研究

利用停流仪观测到博莱霉素Ａ５、Ｆｅ２＋、氧形成的三元活性复合物，测得其激发波长为３２７．５ｎｍ，在ｐＨ７．４的ＰＢＳ中半衰期约９．３×１０２ｍｓ。中性及偏碱性ｐＨ有利于该活性复合物的形成，但其寿命随ｐＨ值升高而缩短。Ｆｅ３＋、Ｃｕ２＋、ＥＤＴＡ等物质对其形成有抑制作用。通过反应速率常数的比较表明，该活性复合物具有较强的氧化性，可被ＤＴＴ，ｐｈＣＯＯＮａ所清除，但不与甘露醇反应。该活性复合物具有一定的底物专一性，它与ＤＮＡ的反应活性远大于ＲＮＡ，对脱氧核糖的反应活性远大于其它单糖。它对４种碱基也有一定的反应活性，但远低于·ＯＨ。以上结果表明。

硬脂酸修饰超氧化物歧化酶的制备及其性质研究

报道了一种修饰ＳＯＤ的方法。所得硬脂酸修饰ＳＯＤ比活力为每毫克蛋白１００００单位，经鉴定已达均一程度。测得其分子量为３５０００．修饰ＳＯＤ和天然ＳＯＤ在紫外光区的最大吸收均在２６５ｎｍ。修饰ＳＯＤ对温度、ｐＨ、蛋白酶水解的稳定性比天然ＳＯＤ增强，且免疫原性消除。在低浓度的某些有机介质中活性比在水中高。

高分子聚合物在药物上的应用

通过高分子药物与低分子药物的比较,指出前者具有显著优点;缓释、长效、定向、低毒,具体介绍了一些新型高分子聚合物在缓释、增加选择性等方面的应用。

菲咯啉铜配合物与核酸结合特性的研究

用电化学方法研究了菲咯啉铜配合物分别与ＣｔＤＮＡ、热变性ＣｔＤＮＡ、ｐｏｌｙ（ＡＵ）作用的循环伏安行为，得到了（ｐｈｅｎ）２Ｃｕ＋与它们的表观结合常数Ｋ及结合位点数ｎ。

对SOD研究中若干问题的看法

本文对SOD基础研究、应用基础研究和开发工作中的若干问题,如活力测定、PAGE多谱带现象、SOD性能改造和有效性等、发表了看法。

聚磷酸酯修饰超氧化物歧化酶的制备及其性质

合成酪氨酸十八烷基酯盐酸盐、酪氨酸苄酯对甲苯磺酸盐和二氯磷酸乙酯,并用它们合成以酪氨酸为中心链的聚磷酸酯。用此聚磷酸酯修饰天然人血Cu,Zn-SOD,所得的聚磷酸酯-SOD对温度、pH值,蛋白水解酶的稳定性比天然SOD有较大提高,且可溶于二甲基甲酰胺、二氯甲烷,不溶于乙醚、丙酮和水。

阿霉素铁(Ⅲ)配合物与DNA结合作用的研究

应用吸收光谱法研究了阿霉素铁（Ⅲ）［ＡＤＭ·Ｆｅ（Ⅲ）］与ＤＮＡ的结合作用，结果表明ＡＤＭ·Ｆｅ（Ⅲ）作为一个整体嵌入ＤＮＡ碱基之间形成ＡＤＭ·Ｆｅ（Ⅲ）·ＤＮＡ三元复合物。应用荧光淬灭法得到了不同Ｎａ＋浓度下ＡＤＭ及ＡＤＭ·Ｆｅ（Ⅲ）与ＤＮＡ结合作用的结合常数（Ｋ）、结合位点距离（ｎ）及标准自由能（ΔＧ），并根据多聚电解质理论将ΔＧ分解为电荷作用部分（ΔＧｐｅ）及非电荷作用部分（ΔＧｔ）。结果表明ＡＤＭ·Ｆｅ（Ⅲ）中铁离子直接参与了与ＤＮＡ的作用，ＡＤＭ·Ｆｅ（Ⅲ）较ＡＤＭ更易与ＤＮＡ结合。

博莱霉素A_5的类酶性研究

研究了博莱霉素Ａ５（ＢＬＭＡ５）与ＤＮＡ作用前后的光谱性质及初步的动力学性质，发现ＢＬＭＡ５可催化ＤＮＡ氧化断链，而且符合米氏动力学．通过对ＢＬＭＡ５的催化效率、底物专一性以及温度、ｐＨ、金属离子对ＢＬＭＡ５催化ＤＮＡ断链反应影响的研究，发现ＢＬＭＡ５的作用行为在许多方面与酶的催化行为非常类似，提出ＢＬＭＡ５是一种小分子生物催化剂的看法．

对EcoRI作用于DNA的新认识

对ＥｃｏＲＩ作用于ＤＮＡ的新认识邹国林皮新春（武汉大学生物化学与生物物理学系，武汉４３００７２）关键词蛋白质与核酸相互作用ＥｃｏＲＩ模体蛋白质与核酸的相互作用是分子生物学研究的中心问题之一。当前以阐明ＤＮＡ结合蛋白的结构与蛋白质－ＤＮＡ复合物的结构为...

有机介质中酶催化反应研究进展

本文介绍了近期有机介质中酶催化反应研究的进展，比较系统地归纳了有机介质中酶催化反应的条件以及有机介质对酶性质的主要影响。

依赖PQQ甲醇脱氢酶对底物催化专一性差的原因分析

采用甲基营养杆菌NO .2为实验菌株 ,经超声波破细胞 ,酸处理 ,DEAE 纤维素和CM 纤维素柱层析等改进的纯化程序 ,可得到比活力为 12 .5u/mg的甲醇脱氢酶 (MDH)样品。该酶在测活系统中除能氧化甲醇等醇类化合物外 ,还能以较大速率氧化氯化铵、甲胺、脲等物质 ,MDH对不同底物亲和力的差异性主要取决于其辅基吡咯喹啉醌 (PQQ)与底物的结合力。

限制性核酸内切酶Bsp 63Ⅰ的纯化及性质研究

用Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ６３菌为材料，经ＤＮＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和ＣｉｂａｃｒｏｎＢｌｕｅＦ３ＧＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ两步亲和层析，将Ｂｓｐ６３Ⅰ纯化到均一程度。酶比活力达６１４００Ｕ／ｍｇ蛋白。用凝胶过滤法测得该酶分子量为１１３８００。该酶样品在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中呈现为一条蛋白带，并测得其亚基分子量为５６８００。用ＤＮＳ－Ｃｌ法测得该酶Ｎ－末端氨基酸为丙氨酸。上述结果表明该酶分子是由两个相同亚基组成。