糖尿病周围神经病变大鼠疼痛模型的建立

目的:探讨建立糖尿病周围神经病变大鼠疼痛模型的可行性,为糖尿病周围神经病变疼痛的发生机制及治疗提供稳定的研究基础。方法:24只SD大鼠随机分为对照组和模型组,模型组腹腔注射60mg/Kg链尿佐菌素。造模前、造模后48小时、6周取尾静脉血测血糖;造模前、造模后1、2、3、4、5、6周测定大鼠50%缩爪机械阈值(PWT);造模后6周,透视电镜观察腓肠神经超微结构。结果:造模后48h模型组随机血糖高于16.7mmol/L比率为83.3%,与对照组比较,模型组48h、6周时血糖明显增高(P<0.01);造模后3周模型组PWT明显低于正常对照组(P<0.05),5周时PWT下降达高峰(P<0.01);模型组腓肠神经有髓纤维普遍出现明显脱髓鞘,髓鞘板层排列紊乱、肿胀。结论:腹腔注射链尿佐菌素建立痛性糖尿病大鼠模型成功率高、简单易行、模型稳定、外周神经病变确切。

右美托咪定对神经病理性疼痛大鼠脊髓背角白介素1β的影响

目的观察右美托咪定对神经病理性疼痛大鼠机械痛阈(PWT)和热痛阈(PWL))的影响,以及对大鼠脊髓背角白介素1β(IL-1β)的影响。方法雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为3组:假手术组(Sham组)、腰5脊神经结扎组(SNL组)和右美托咪定组(DEX组),每组各10只。各组大鼠先行L4-5鞘内置管,SNL组和DEX组大鼠行左侧腰5脊神经结扎,术后DEX组经鞘内注射右美托咪定2μg/10μL,Sham组和SNL组经鞘内注射等容生理盐水,各组大鼠给药1次/d,连续7 d,术前及术后第1 d、3 d、5 d、7 d检测各组大鼠PWT、PWL。7 d后处死大鼠,Western blot法检测各组大鼠左侧腰5脊髓背角IL-1β的表达。结果 SNL组、DEX组大鼠术后第1 d、3 d、5 d、7 d PWT明显低于Sham组(P<0.05); DEX组大鼠在各相应时间点PWT明显高于SNL组(P<0.05); SNL组、DEX组大鼠术后第3 d、5 d、7 d PWL明显低于Sham组(P<0.05); DEX组大鼠在各相应时间点PWL明显高于SNL组(P<0. 05); SNL组、DEX组大鼠脊髓背角IL-1β蛋白表达高于Sham组(P<0.05); DEX组大鼠脊髓背角IL-1β蛋白明显低于SNL组(P<0. 05)。结论脊髓IL-1β表达增高参与了脊神经结扎神经病理性疼痛;鞘内注射右美托咪定能明显缓解神经病理疼痛,其机制可能与抑制大鼠脊髓背角IL-1β表达有关。

肿瘤细胞减灭术联合腹腔内热灌注化疗术后谵妄发生的危险因素分析

目的筛选肿瘤细胞减灭术联合腹腔内热灌注化疗术后谵妄发生的危险因素。方法全麻下行肿瘤细胞减灭术联合腹腔内热灌注化疗患者150例，年龄18—75岁，性别不限，美国麻醉医师协会（ASA）分级Ⅰ-Ⅲ级，体重40～70妇。根据术后72小时内是否发生谵妄分为谵妄组和非谵妄组。记录患者性别、年龄、体重、ASA分级、术前空腹血糖和糖化血红蛋白；既往史包括肿瘤切除术史、化疗和放疗史；合并症包括抑郁症、高血压、冠状动脉粥样硬化性心脏病、慢性主观性头晕、慢性阻塞性肺疾病、腔隙性脑梗死和慢性肾功能衰竭；手术相关因素包括腹腔内热灌注时间、手术时间和术后机械通气时间；术后镇痛补救情况。将组间比较差异有统计学意义的因素进行多因素Logistic回归分析，筛选术后谵妄发生的危险因素。结果139例患者中42例发生术后谵妄，发生率为30．2％。Logistic回归分析结果显示，年龄≥65岁、术前抑郁、长时间腹腔内热灌注化疗和术后ICU长时间机械通气是肿瘤细胞减灭术联合腹腔内热灌注化疗术后谵妄的独立危险因素。结论年龄≥65岁、术前抑郁、长时间腹腔内热灌注化疗和术后ICU长时间机械通气是肿瘤细胞减灭术联合腹腔内热灌注化疗术后谵妄的独立危险因素。

罗哌卡因抑制Rac1/JNK1/FAK通路的活化抑制黑色素瘤M21细胞生长、侵袭和迁移

目的:本文旨在探究罗哌卡因(ropivacaine,RPC)对黑色素瘤M21细胞生长,运动和上皮间质形态转换的影响。方法:采用0、0.25、0.5、1 mmol/L剂量罗哌卡因处理M21细胞,将细胞随机分为四组:RPC 0 mmol/L组、RPC 0.25 mmol/L组、RPC 0.5 mmol/L组和RPC 1 mmol/L组进行后续试验。EDU染色检测细胞生长;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Transwell检测侵袭细胞数;划痕试验检测细胞迁移;显微镜观察上皮间充质转化形态学变化;蛋白免疫印迹检测E-cadherin、Vimentin、N-cadherin、Rac1、JNK1、p-JNK1、FAK、p-FAK蛋白表达水平。结果:结果表明,与RPC 0 mmol/L组相比较,RPC 0.5、1 mmol/L组EDU阳性细胞数显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),侵袭细胞数显著降低(P<0.05),划痕愈合率显著降低(P<0.05),上皮间充质转化受到抑制,E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05),Vimentin、N-cadherin、Rac1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),p-JNK1/JNK1、p-FAK/FAK比值显著降低(P<0.05)。结论:罗哌卡因抑制Rac1/JNK1/FAK通路的活化调节黑色素瘤M21细胞生长,运动和上皮间质形态转换。

星状神经节阻滞对缺氧性肺动脉高压家兔的血管舒缩因子及肺动脉压的影响

目的 观察星状神经节阻滞对缺氧性肺动脉高压家兔的血管舒张因子降钙素基因相关肽(CGRP)、前列环素(PGI_2)及血管收缩因子内皮素(ET)、血栓素(TXA_2)以及肺平均动脉压(PMAP)的影响。方法 健康成年日本大耳白家兔在无菌操作下暴露左侧星状神经节,置入并固定硬膜外导管,使其一端开口位于星状神经节附近,另一端自颈背部穿出。置管一周后,选择恢复健康兔24只随机分为四组(每组6只),正常对照组(N)、单纯星状神经节阻滞组(G)、单纯缺氧组(H)、缺氧+星状神经节阻滞组(HG)。用开胸直接测压法测平均肺动脉压(MPAP)、用放射免疫法测 CGRP、PGI_2、ET、TXA_2。结果 H组:与N组相比,肺动脉压显著升高伴有CGRP、PGI_2下降、ET、TXA_2升高(P<0.01);HG组:与H组相比,肺动脉压显著下降(P<0.05)伴有CGRP升高(P<0.01)、ET下降(P<0.05),而PGI_2、TXA_2无明显变化。结论 星状神经节阻滞后,可降低缺氧性肺动脉高压家兔的MPAP,其机制与CGRP升高、ET下降有关。

术中机械通气对小鼠海马CA1区突触可塑性的影响

目的 评价术中机械通气对小鼠海马CA1区突触可塑性的影响.方法 健康雄性C57BL/6小鼠36只,8～10周龄,体重20～25 g,采用随机数字表法,将其分成2组（n=18）：对照组（C组）和机械通气组（M组）.小鼠在麻醉后气管插管并行胫骨骨折切开复位内固定术.C组术后拔除气管导管,放入麻醉箱6h,通入1.5％异氟醚维持麻醉;M组术后继续机械通气6h,吸入1.5％异氟醚维持麻醉.于机械通气结束后2h、1和3d时,取6只小鼠进行恐惧条件化实验,记录僵直时间百分比.于机械通气结束后1d时取6只小鼠开始进行新物体识别实验,第4天时间隔5 min、2h和1d时,计算优先指数.于机械通气结束后1d时处死3只小鼠,取海马组织,电镜下观察海马超微结构,并记录突触数量.于机械通气结束后1d时处死3只小鼠,取全脑组织,进行高尔基染色,测定树突棘密度.结果 与C组比较,M组术后2h和1d时僵直时间百分比降低,不同时间间隔优先指数降低,海马CA1区突触数量减少,顶树突棘密度和基树突棘密度降低（P＜0.01）.结论 术中机械通气可改变小鼠海马CA1区突触可塑性.

糖尿病周围神经病变疼痛机制研究进展

痛性糖尿病周围神经病变（DPN）表现为对多数镇痛药物的抵抗。最近许多研究表明，背根神经节（DRG）钠离子通道、丝裂原激活蛋白激酶、一氧化氮、蛋白激酶C、去甲肾上腺素等在DPN疼痛信号转导和痛觉调制方面发挥重要作用。现就DPN疼痛的分子机制及治疗前景作一探讨。

长时间机械通气对小鼠术后早期海马炎症反应的影响

目的评价长时间机械通气对小鼠术后早期海马炎症反应的影响。方法健康雄性C57BL/6小鼠48只，8~10周龄，体重20~25 g，采用随机数字表法分为3组（n＝16）：正常对照组（C组）、手术组（O组）和术后长时间机械通气组（MV组）。O组和MV组行胫骨骨折切开复位内固定术，O组术后吸入异氟醚麻醉6 h；MV组术后异氟醚麻醉下机械通气6 h。于机械通气结束后1、3 d时取8只小鼠，进行恐惧条件化实验，以评价认知功能，计算僵直时间比率；随后取静脉血样和海马组织，采用ELISA法检测血浆和海马IL-6、TNF-α和IL-1β的水平。结果与C组比较，O组机械通气结束后僵直时间比率降低，血浆和海马IL-6、TNF-α和IL-1β的水平升高（P〈0.01）；与O组比较，MV组机械通气结束后僵直时间比率降低，血浆和海马IL-6、TNF-α和IL-1β的水平升高（P〈0.01）。结论长时间机械通气导致小鼠术后早期认知功能障碍的机制与诱发海马炎症反应有关。

右美托咪定对犬机械通气相关性肺损伤时NF-κB活性的影响

目的 评价右美托咪定对犬机械通气相关性肺损伤时NF-κB活性的影响.方法 健康比格犬30只,体重10 ～ 12 kg,采用随机数字表法分为5组（n=6）：对照组（C）、机械通气（MV组）和不同剂量右美托咪定组（DEX1-3组）.C组行气管插管术自主呼吸,MV组呼吸机机械通气4h,吸入氧浓度50％、通气频率15次/min、潮气量20ml/kg、PEEP 2 cm H2O.DEX13组于气管插管前20 min内静脉输注右美托咪定0.5、1.0、2.0 μg/kg负荷剂量5ml,0.5、1.0、2.0μg· kg-1 ·h-1维持4h.分别于基础状态、机械通气1、2和4h时取股动脉血测定PaO2,机械通气4h后处死动物取肺,称重,计算肺组织湿干重比（W/D）,测定髓过氧化物酶（MPO）活性,Western blot法测定NF-κB p65蛋白的表达水平.采用PCR法检测肺组织TNF-α mRNA表达.结果 与C组比较,MV组肺组织W/D、MPO活性、NF-κB p65蛋白和TNF-α mRNA表达水平升高（P＜0.05）;与MV组比较,DEX2和DEX3组肺组织MPO活性、NF-κB p65蛋白和TNF-α mRNA表达水平降低,W/D差异无统计学意义（P＜0.05）.结论 右美托咪定可抑制NF-κB活性减轻炎性反应,从而改善犬机械通气相关性肺损伤.

腹腔内热灌注化疗因素对肿瘤细胞减灭术患者术后谵妄的影响

目的：探讨腹腔内热灌注化疗因素对肿瘤细胞减灭术患者术后谵妄的影响。方法择期全麻下行肿瘤细胞减灭术患者120例，年龄18～64岁，性别不限，ASA分级Ⅰ－Ⅲ级，体重40～70 kg。根据是否采用腹腔内热灌注化疗将患者分为3组（ n＝40）：肿瘤细胞减灭术组（ CS组）、腹腔内热灌注化疗1 h组（ IPHC1组）和腹腔内热灌注化疗2 h组（ IPHC2组）。 IPHC1组和IPHC2组肿瘤细胞减灭术后，用化疗药物分别灌注1和2 h。分别于术后1～3 d时采用ICU意识模糊评估法评估术后谵妄的发生情况。结果 CS 组术后谵妄发生率为15％， IPHC1组术后谵妄发生率为28％， IPHC2组术后谵妄发生率为38％。与 CS组比较，IPHC1组和 IPHC2组术后谵妄发生率升高（ P＜0．05）；与IPHC1组比较，IPHC2组术后谵妄发生率升高（ P＜0．05）。结论腹腔内热灌注化疗可增加肿瘤细胞减灭术患者术后谵妄的发生。

长时间机械通气对小鼠术后早期海马小胶质细胞活化的影响

目的评价长时间机械通气对小鼠术后早期海马小胶质细胞活化的影响。方法清洁级健康雄性C57BL／6小鼠80只，8—10周龄，体重20～25g，采用随机数字表法分为2组（n=40）：手术组（s组）和术后机械通气组（MV组）。两组均行胫骨骨折切开复位内固定术，术后s组置于异氟醚麻醉箱内自主呼吸6h；MV组异氟醚麻醉下机械通气6h。于机械通气结束后1d时随机取8只小鼠行新物体识别实验，第4天训练结束后时间间隔为5min、2h和1d时进行测试，计算优先指数。于机械通气结束后1和3d（T1,2）时进行恐惧条件化实验，T1，2时处死小鼠取海马，采用免疫荧光法检测小胶质细胞的活化水平，采用ELISA法检测IL一6的表达水平，Western blot法测定NF—κB p65的表达水平。结果与S组比较，MV组T1时条件诱导僵直时间比率和场景相关僵直时间比率降低，新物体识别实验训练后时间间隔为5min、2h和1d时优先指数降低，T1时海马小胶质细胞活化水平升高，T1时海马IL-6和T2时NF—κB p65表达上调（P〈0．05）。结论长时间机械通气可通过促进海马小胶质细胞活化，加重炎性反应，导致小鼠术后早期认知功能降低。

围术期感染因素对小鼠术后海马神经元凋亡的影响

目的评价围术期感染因素对小鼠术后海马神经元凋亡的影响。方法健康雄性C57BL／6小鼠96只，8-10周龄，体重20-25g，采用随机数字表法，将其分为4组（n=24）：正常对照组（c组）、手术组（s组）、感染组（I组）和感染＋手术组（I＋s组）。s组和I＋s组行胫骨骨折切开复位内固定术，I组和I＋S组分别于术前1d、术前2h、术后1d、2d和3d时腹腔注射LPS100μg／kg，连续5d。每组于术后1、3d时取12只小鼠，进行恐惧条件化实验，记录僵直时间比率，以评价认知功能；于术后1d时采集静脉血样，检测血清促。肾上腺皮质激素（ACTH）和血浆皮质酮的浓度；恐惧条件化实验后，取海马，检测神经元凋亡情况、活化型caspase-3、活化型聚腺苷二磷酸核糖聚合酶．1（PARP-1）、Bax和Bcl-2的表达，计算Bax与Bcl-2表达的比值（Bax／Bcl-2比值）。结果与c组比较，s组僵直时间比率降低（P〈0．01），其它指标比较差异无统计学意义（P〉0．05）；与s组比较，I＋S组僵直时间比率降低，血ACTH和皮质酮的浓度升高，海马神经元凋亡指数和Bax／Bcl-2比值升高，海马活化型caspase-3和活化型PARP-1表达上调（P〈0．01）。结论围术期感染因素加重小鼠术后认知功能障碍的机制与诱发海马神经元凋亡有关，其通过增强应激反应诱发海马神经元凋亡。

基因组学技术在机械通气相关性肺损伤基因活化中的应用

机械通气是临床广泛应用的通气方式，它大大增加了重危患者抢救的成功率。然而，不合理的应用也可能产生和加重原有肺损伤，引起机械通气相关性肺损伤（VILI）。目前，VILI的基因表达及基因产物研究取得了很大进展，如早期诱导基因活化、临床敏感基因定位、基因信号传导通路等。而探讨基因组学技术在VILI中病理生理机制的应用，丰富和完善VILI理论，并为VILI提供有效的药物治疗方法。通过识别VILI中的相关因素，我们可利用其对VILI的危险人群进行识别。随着VILI的学科机制的完善与发展，关于VILI发病机制的完整性描述将会成为可能。

细胞骨架与机械应力在机械通气相关性肺损伤中的病理生理作用

背景机械通气相关性肺损伤（ventilator induced lung injury，VILI）是机械通气治疗中常见的严重并发症，过度牵拉引起的细胞机械应力是由细胞骨架以及细胞蜘胞间和细胞-细胞外基质的相互作用调节完成。目的探讨细胞骨架在VILI中的病理生理机制，丰富和完善VILI理论。内容描述了机械通气刺激被转化为细胞内的生理信号，从而诱导细胞活化、增加肺血管通透性导致肺损伤。对细胞骨架与机械应力在VILI中的病理生理作用进行详尽的阐述。趋向关于细胞骨架及其相关结构在VILI的病理生理变化中作用的体外研究已广泛开展，但体内VILI模型较少，需进一步的研究。

酪氨酸激酶-信号转导和转录激活因子信号通路参与神经病理性疼痛的研究进展

背景神经病理性疼痛（neuropathic pain，NP）是一种最常见的、最棘手的慢性疼痛之一。酪氨酸激酶信号转导和转录激活因子（janus kinases-signal transducer and activators of transcription, JAKs-STATs）信号通路是介导细胞反应的重要信号通路系统，近年有研究表明JAKs-STATs信号通路参与NP。目的探讨JAKs-STATs信号通路参与NP的机制。内容分别从JAKs-sTATs信号通路生物学特性、JAKs-STATs信号通路对NP调节机制的研究现状进行综述。趋向为更好地治疗NP提供理论依据。