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circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达及对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用机制 被引量:1
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作者 胡志 付桥 +3 位作者 徐律 张炜 盖强强 孙伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第11期1878-1884,共7页
目的分析circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达与临床意义,探究circ-RACGAP1对膀胱癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制。方法通过TCGA数据库探究circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达,分析circ-RACGAP1表达与膀胱癌患者临床病理特征的关系... 目的分析circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达与临床意义,探究circ-RACGAP1对膀胱癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制。方法通过TCGA数据库探究circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达,分析circ-RACGAP1表达与膀胱癌患者临床病理特征的关系。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法分析细胞系5637、T24、J82、RT-4、UM-UC-3中circ-RACGAP1表达。通过脂质体转染技术将circ-RACGAP1敲降质粒转染T24细胞。克隆形成实验、划痕实验和Transwell实验分别分析敲降circ-RACGAP1对T24细胞增殖、迁移和侵袭的影响。采用deepBase、Circbank、CircInteractome、circRNABase数据库和荧光报告系统验证circ-RACGAP1和miR-4324之间的靶向结合。qPCR检测敲降circ-RACGAP1对T24细胞中miR-4324表达的影响。采用Western blot法检测敲降circ-RACGAP1对T24细胞中Rac-GTP酶激活蛋白1(RACGAP1)蛋白和磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路蛋白表达的影响。结果膀胱癌组织中circ-RACGAP1呈高表达(P<0.01),其表达随着患者临床分期恶性程度增高而升高(P<0.01)。膀胱癌细胞系中circ-RACGAP1表达明显高于人正常膀胱上皮细胞(均P<0.01)。与对照组比较,sh-sh-circ-RACGAP1组T24细胞增殖、迁移和侵袭能力均明显降低(均P<0.01)。circ-RACGAP1可靶向抑制miR-4324的表达(P<0.01)。与对照组比较,sh-circ-RACGAP1组T24细胞中RACGAP1蛋白表达水平降低(P<0.01),PI3K/AKT信号通路蛋白磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、核因子κB(NF-κB)表达水平均降低(均P<0.01)。结论膀胱癌组织和细胞系中circ-RACGAP1呈高表达,敲降circ-RACGAP1能够抑制T24细胞的恶性生物学行为,circ-RACGAP1是通过抑制miR-4324表达激活PI3K/AKT信号通路来发挥作用。 展开更多
关键词 膀胱癌 环状RNA circ-RACGAP1 miR-4324
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miR-519d-3p通过调控Toll样受体4/核因子-κB信号通路对前列腺癌细胞的影响机制研究 被引量:1
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作者 程耿 张朝阳 +2 位作者 万莉 杨军 周舰 《中国性科学》 2023年第1期39-43,共5页
目的 探讨通过微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)调控Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路对前列腺癌细胞的机制研究。方法 于2021年6月购买前列腺癌细胞株PC3,培养至对数时期,随机分为对照组、下调miR-519d-3p组、上调miR-519d-3... 目的 探讨通过微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)调控Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路对前列腺癌细胞的机制研究。方法 于2021年6月购买前列腺癌细胞株PC3,培养至对数时期,随机分为对照组、下调miR-519d-3p组、上调miR-519d-3p组。采用聚合酶链反应检测miR-519d-3p表达情况,对比干预24h、48h、72h细胞增殖、细胞迁移、侵袭率;检测细胞TLR4/NF-κB信号通路蛋白表达状况。结果 与对照组相比,下调miR-519d-3p组细胞增殖率、细胞侵袭数、迁移数、miR-519d-3p表达量、B淋巴细胞瘤-2基因/Bcl-2相关X基因(Bcl-2/Bax)、TLR4/β-actin、NF-κB/β-actin蛋白表达量上升,细胞凋亡率下降(P<0.05);与下调miR-519d-3p组相比,上调miR-519d-3p组细胞增殖率、细胞侵袭数、迁移数、miR-519d-3p表达量、Bcl-2/Bax、TLR4/β-actin、NF-κB/β-actin蛋白表达量降低,细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论 上调miR-519d-3p可抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭,其作用机制可能与TLR4/NF-κB信号通路相关。 展开更多
关键词 微小RNA-519d-3p TLR4/NF-κB信号通路 前列腺癌 细胞凋亡 细胞侵袭
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姜黄素对前列腺癌干细胞维持及细胞糖代谢的影响 被引量:4
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作者 程耿 周舰 +3 位作者 张朝阳 万莉 张景宇 杨军 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期690-694,716,共6页
目的探讨不同浓度姜黄素对前列腺癌干细胞维持和糖代谢的作用。方法采用MTT法检测姜黄素对人正常前列腺上皮细胞RWPE-1增殖活性的影响,选择毒性作用较小的安全浓度干预人前列腺癌细胞PC-3。将PC-3细胞分为5组:对照(Con)组、姜黄素低(0.1... 目的探讨不同浓度姜黄素对前列腺癌干细胞维持和糖代谢的作用。方法采用MTT法检测姜黄素对人正常前列腺上皮细胞RWPE-1增殖活性的影响,选择毒性作用较小的安全浓度干预人前列腺癌细胞PC-3。将PC-3细胞分为5组:对照(Con)组、姜黄素低(0.1μmol·L^(-1)Cur)、中(10μmol·L^(-1)Cur)、高浓度(50μmol·L^(-1)Cur)组、多烯紫杉醇(10 nmol·L^(-1)Doc)组。显微镜观察各组肿瘤细胞成球水平;流式检测CD44^(+)CD133^(+)细胞比例;比色法检测细胞ATP、乳酸和葡萄糖含量;Western blot检测细胞己糖激酶1(hexokinase 1,HK1)、己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)、葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1)、性别决定区Y框蛋白2(sex determining region Y-box 2,SOX2)、有机阳离子转运体4(organic cation transporter 4,OCT4)、Nanog蛋白表达水平。结果与对照组比较,姜黄素干预组与多烯紫杉醇组肿瘤细胞成球能力及CD44^(+)CD133^(+)细胞比例降低,细胞中葡萄糖、乳酸及ATP含量明显减少,细胞干性相关蛋白(SOX2、OCT4和Nanog)及糖代谢相关蛋白(HK1、HK2和GLUT1)表达均明显降低,且这些抑制作用呈现出一定的姜黄素浓度依赖性。结论姜黄素可抑制前列腺癌细胞的成球能力、干细胞维持及糖代谢。 展开更多
关键词 姜黄素 前列腺癌 肿瘤干细胞 糖代谢
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lncRNA CTD-2196E14.5通过海绵吸附miR-744-5p抑制膀胱癌细胞的增殖和侵袭 被引量:1
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作者 徐律 张炜 +3 位作者 胡志 陈旭 褚浩 付桥 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第23期4233-4238,共6页
目的:探讨CTD-2196E14.5通过调控miR-744-5p表达对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:通过检索TCGA数据库分析膀胱癌组织及癌旁组织中CTD-2196E14.5的表达水平及其与膀胱癌患者总生存期的关系。采用荧光实时定量聚合酶链反应(fluorescen... 目的:探讨CTD-2196E14.5通过调控miR-744-5p表达对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:通过检索TCGA数据库分析膀胱癌组织及癌旁组织中CTD-2196E14.5的表达水平及其与膀胱癌患者总生存期的关系。采用荧光实时定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测膀胱癌细胞株MGH-U3、T24、253J、J82和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中CTD-2196E14.5的表达水平。采用脂质体介导技术将pcDNA-CTD-2196E14.5质粒、pcDNA空载质粒分别转染253J细胞,即CTD-2196E14.5组和NC组。采用MTT法、流式细胞术和Transwell实验检测CTD-2196E14.5对膀胱癌253J细胞增殖、细胞周期和侵袭的影响。应用lncRNA2function软件预测和双荧光素酶报告基因实验验证CTD-2196E14.5与miR-744-5p的靶向关系。qPCR检测miR-744-5p的表达。Western blotting检测AMPK信号通路蛋白和细胞周期蛋白的表达。结果:CTD-2196E14.5在膀胱癌组织中低表达(P<0.01),CTD-2196E14.5表达较高的患者总生存期较长(P<0.01)。CTD-2196E14.5在膀胱癌细胞株MGH-U3、T24、253J、J82中低表达(P<0.05),在253J细胞中表达水平最低(P<0.01)。与NC组相比,过表达CTD-2196E14.5抑制253J细胞的增殖能力(P<0.05)、细胞周期进展(P<0.01)和侵袭能力(P<0.01)。lncRNA2function软件显示,miR-744-5p可能是CTD-2196E14.5的靶基因。双荧光素酶报告基因实验结果显示,CTD-2196E14.5互补结合miR-744-5p(P<0.01)。与NC组相比,过表达CTD-2196E14.5负调控miR-744-5p的表达水平(P<0.01)。与NC组相比,过表达CTD-2196E14.5的253J细胞中AMPK信号通路蛋白p-AMPKα、p-AMPKβ1、p-TSC2、HNF4α、p-mTOR及细胞周期蛋白CDK4、Cyclin D1表达明显降低。结论:CTD-2196E14.5在膀胱癌组织和细胞中表达显著降低,其通过海绵吸附miR-744-5p下调AMPK信号通路蛋白及细胞周期蛋白的表达水平,抑制膀胱癌细胞253J的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 膀胱癌 CTD-2196E14.5 miR-744-5p 增殖 侵袭
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1, 25-二羟基维生素D_(3)通过下调葡萄糖转运蛋白-1表达抑制膀胱癌细胞增殖 被引量:1
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作者 周舰 张朝阳 +3 位作者 程耿 杨军 张景宇 戚晓红 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期693-699,共7页
目的:研究1,25-二羟基维生素D_(3)(1,25-(OH)_(2)-VitD_(3))对膀胱癌细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养膀胱癌细胞T24,MTT法检测不同浓度1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)对细胞活力的影响,并筛选1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)干预细胞... 目的:研究1,25-二羟基维生素D_(3)(1,25-(OH)_(2)-VitD_(3))对膀胱癌细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养膀胱癌细胞T24,MTT法检测不同浓度1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)对细胞活力的影响,并筛选1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)干预细胞的最佳时间及半数抑制浓度。将细胞分为4组:对照组、葡萄糖转运蛋白-1(glucose transporter-1,GLUT1)抑制组、1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)组、1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)+GLUT1抑制组。采用Hoechst 33258染色观察各组细胞形态变化;试剂盒检测细胞内葡萄糖摄取、三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)产生及乳酸形成水平;Real-time PCR及Western blot检测GLUT1、己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)、6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFP3)、丙酮酸激酶同工酶2(pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase A,LDHA)和低氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)mRNA和蛋白表达水平。结果:1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)可降低T24细胞增殖能力,且呈剂量依赖性。1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)组、GLUT1抑制组及1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)+GLUT1抑制组细胞凋亡水平高于对照组,而GLUT1、HK2、PFKFP3、PKM2、LDHA和HIF-1αmRNA及蛋白表达水平明显低于对照组。与GLUT1抑制组比较,1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)+GLUT1抑制组GLUT1、HK2、PFKFP3、PKM2、LDHA和HIF-1αmRNA(均P=0.000)和蛋白(均P=0.000)表达水平明显降低。结论:1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)可抑制膀胱癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用机制可能与下调GLUT1表达抑制细胞糖酵解过程有关。 展开更多
关键词 1 25-二羟基维生素D_(3) 膀胱癌 葡萄糖转运蛋白-1 糖酵解 增殖
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前列腺增生症不同临床阶段术后三个月疗效的临床研究
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作者 程耿 万莉 +1 位作者 周舰 张景宇 《航空航天医学杂志》 2019年第11期1322-1324,共3页
目的探讨前列腺增生(benign prostatic hyperplasia BPH)不同病理生理阶段手术疗效。方法收集2013年-2017年161例经尿道前列腺等离子剜除术术前尿动力学检测数据,根据尿动力学检查结果分为逼尿肌收缩力正常(A组)、逼尿肌收缩力正常伴有... 目的探讨前列腺增生(benign prostatic hyperplasia BPH)不同病理生理阶段手术疗效。方法收集2013年-2017年161例经尿道前列腺等离子剜除术术前尿动力学检测数据,根据尿动力学检查结果分为逼尿肌收缩力正常(A组)、逼尿肌收缩力正常伴有不稳定(B组)、逼尿肌收缩乏力(C组)。收集三组患者术前和术后3月的问卷调查前列腺增生症状评分(international prostate sym ptom scores,IPSS)、最大尿流率(mimum flow rate,Qmax)、残余尿(postvoid residual volume,PVR)、最大尿流率时逼尿肌压力(Pdet at Qmax)最大膀胱容量(Maximum cystometric capacity,MCC)的临床资料,分析及评价其临床疗效。结果三组患者术后3个月的IPSS、Qmax、PVR、Pdet at Qmax、MCC与术前进行组内比较,三组之间的组间比较,其中A组与C组差异很明显,但A组与B组明显弱化。结论经尿道前列腺等离子剜除术能够明显改善BPH患者排尿症状,及早手术治疗的患者术后效果确切,病情恢复快,能够减少患者的痛苦。 展开更多
关键词 尿流动力学 最大尿流率 逼尿肌 经尿道前列腺等离子剜除术
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侧卧位单通道微创经皮肾镜取石术与输尿管软镜碎石术治疗成人肾结石临床效果比较 被引量:21
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作者 张朝阳 周舰 +2 位作者 杨军 张景宇 程耿 《临床军医杂志》 CAS 2021年第7期791-792,共2页
目的比较侧卧位单通道微创经皮肾镜取石术(mPCNL)与输尿管软镜碎石术(RIRS)治疗成人肾结石的临床效果。方法选取武汉大学同仁医院(武汉市第三医院)自2018年1月至2020年5月收治的120例成年肾结石患者为研究对象。将患者随机分入A组和B组... 目的比较侧卧位单通道微创经皮肾镜取石术(mPCNL)与输尿管软镜碎石术(RIRS)治疗成人肾结石的临床效果。方法选取武汉大学同仁医院(武汉市第三医院)自2018年1月至2020年5月收治的120例成年肾结石患者为研究对象。将患者随机分入A组和B组,每组各60例。A组行mPCNL,B组行RIRS。比较两组的围术期指标、结石清除率、不良反应发生率,以及治疗前后的血红蛋白、血肌酐水平。结果B组手术时间和术后住院时间均短于A组,术中出血量少于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组结石清除率和不良反应发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,B组血红蛋白水平高于A组,血肌酐水平低于A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论侧卧位单通道mPCNL与RIRS治疗成人肾结石均安全有效,RIRS在改善血红蛋白和血肌酐水平、促进术后恢复方面更具优势,临床应根据患者实际情况合理选择术式。 展开更多
关键词 微创经皮肾镜取石术 输尿管软镜碎石术 肾结石
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