体外培育牛黄对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的观察体外培育牛黄对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用。方法采用改良线栓法制备短暂大脑中动脉阻塞(tMCAO)模型,大鼠随机分为假手术组、模型组、溶剂组、尼莫地平组及体外培育牛黄0.20、0.10、0.05 g/kg组,每组12只。术后72 h,评价神经功能和脑梗死体积,HE染色观察脑组织病理损伤情况,ELISA法检测大鼠血清VEGF、Ang-1、bFGF水平,分子对接预测其可能机制,Western blot、免疫组化(IHC)法检测p-PI3K、p-Akt、caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达,RT-qPCR法检测PI3K、Akt、caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA表达。结果与溶剂组比较,体外培育牛黄各剂量组大鼠神经功能评分、脑梗死率降低(P<0.05,P<0.01),海马区神经元与皮层的病理损伤改善,血清VEGF、Ang-1水平升高(P<0.05,P<0.01)。牛黄主要成分与PI3K、Akt、caspase-3的对接得分大于100分,契合良好。体外培育牛黄能升高p-PI3K、p-Akt、Bcl-2蛋白及mRNA表达(P<0.05,P<0.01),降低caspase-3、Bax蛋白及mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。结论体外培育牛黄可能通过激活PI3K/Akt通路对脑缺血再灌注损伤大鼠起到神经保护作用。

应用网络药理学分析牛黄治疗角膜炎的作用机制

目的应用网络药理学分析方法,从整体水平观察牛黄-靶点-角膜炎的复杂网络关系,探讨牛黄治疗角膜炎的分子作用机制。方法首先通过DisGeNET在线数据库收集角膜炎相关的基因,构建角膜炎相关蛋白质的互作网络,然后经中药系统药理学分析(TCMSP)平台、中国科学院化学数据库查询,结合文献报道,收集牛黄中分离鉴定的组成成分,导出各成分SMILES结构式信息,利用在线软件SwissTargetPrediction预测作用靶点,进而构建牛黄活性成分-预测靶点网络图,最后将角膜炎相关蛋白质的互作网络与牛黄活性成分-预测靶点网络进行合并,得到牛黄活性成分-潜在靶点网络,系统分析牛黄治疗角膜炎的潜在作用靶点及其在信号通路中的作用,构建成分-靶点-通路网络图,分析牛黄治疗角膜炎的作用机制。结果共搜索到39个已分离鉴定的牛黄组成成分,角膜炎相关靶点65个,牛黄治疗角膜炎的潜在靶点28个;28个潜在靶点中包含7个直接作用靶点,即肿瘤坏死因子、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1、Toll样受体9、C-X-C基序趋化因子配体8、白细胞介素(IL)6、丝裂原活化蛋白激酶8和神经营养受体酪氨酸激酶1。28个潜在靶点可被注释入12项生物过程、18项细胞组分、13个分子功能,经京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,共纳入10条KEGG信号通路,主要涉及人巨细胞病毒感染、阿米巴病、抗叶酸耐受性、PI3K-Akt信号通路、类风湿性关节炎、凋亡、细胞因子-细胞因子受体相互作用、疟疾、非酒精性脂肪肝、IL-17信号通路。结论牛黄可能通过抗炎、抗菌、抗病毒、免疫调节和炎症调控等作用发挥对角膜炎的辅助治疗作用。