核转运蛋白基因2的表达在皮肤恶性黑素瘤临床预后中的作用

目的:探讨核转运蛋白基因(karyopherin, KPNA)2在皮肤恶性黑素瘤临床预后中的作用。方法:应用GEO数据库数据分析,比较KPNA2 mRNA在正常皮肤组织、恶性黑素瘤中表达的差异,并进一步利用两种在线数据库进行生存分析,分析KPNA2 mRNA与皮肤恶性黑素瘤的预后之间的关系。结果:KPNA2 mRNA水平在正常皮损组织中明显要低于恶性黑素瘤组织,差异有统计学意义(P<0.05);同时生存分析显示KPNA2 mRNA表达水平与皮肤恶性黑素瘤的预后具有的显著相关性,其表达水平高则预后差(P<0.05)。结论:KPNA2与皮肤恶性黑素瘤临床预后密切相关,为皮肤恶性黑素瘤治疗提供潜在靶点。

Anti-HIF-1α-pEGFP重组质粒的构建及表达

目的构建EGFP-HIF-1α反义重组质粒,转染人宫颈癌Hela细胞,用以探讨HIF-1α蛋白在宫颈癌的生长、转移中的作用。方法应用基因重组技术构建EGFP-HIF-1α反义重组质粒,通过脂质体介导将其转染入Hela细胞,倒置荧光显微镜观察转染效果,Western blot检测HIF-1α蛋白的表达。结果酶切鉴定结果显示含EGFP-HIF-1α反义重组质粒构建成功,并能在Hela细胞中封闭HIF-1α蛋白的表达。结果 EGFP-HIF-1α反义重组质粒构建及转染成功,封闭Hela细胞中HIF-1α蛋白的表达,为进一步研究HIF-1α蛋白在宫颈癌的生长、转移中的作用提供试验基础。

MUC16突变在皮肤恶性黑色素瘤患者预后中的作用分析

目的探讨粘蛋白16(MUC16)突变在皮肤恶性黑色素瘤(CMM)临床预后中的作用。方法运用癌症基因组图谱(TCGA)数据库数据集分析MUC16在CMM组织中突变情况,结合GEO数据库数据分析比较MUC16 mRNA在正常皮肤组织、CMM组织中的表达差异,并进一步运用在线数据库分析MUC16突变及其mRNA水平与CMM的预后之间的关系。结果MUC16在CMM中突变频率高达69.3%,其mRNA水平在正常皮肤组织中明显低于CMM组织,差异有统计学意义(P<0.05);生存分析发现MUC16突变的CMM患者具有较好的预后(P<0.05),且MUC16 mRNA表达水平与CMM的预后相关,MUC16表达水平高则预后差(P<0.05)。结论MUC16突变与CMM临床预后密切相关,可以为CMM治疗提供潜在靶点。

BAP1基因在皮肤恶性黑色素瘤临床预后中的作用

目的探讨BRCA1相关蛋白1(BAP1)基因在皮肤恶性黑色素瘤临床预后中的作用。方法运用GEO数据库数据分析比较BAP1 mRNA在正常皮肤组织、良性痣组织、恶性黑色素瘤组织中的表达差异,并进一步运用不同的在线数据库分析BAP1 mRNA水平与皮肤恶性黑色素瘤的预后之间的关系。结果BAP1在皮肤恶性黑色素瘤中mRNA水平明显高于正常皮肤组织及良性痣组织,差异有统计学意义(P<0.05);BAP1的mRNA高表达水平的皮肤恶性黑色素瘤的预后较差(P<0.05)。结论BAP1 mRNA水平与皮肤恶性黑色素瘤临床预后密切相关,可以为皮肤恶性黑色素瘤治疗提供潜在靶点。

抑制缺氧诱导因子1α对人宫颈癌细胞生长和侵袭的影响研究

目的探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对宫颈癌细胞的生物学行为的影响。方法选用Hela细胞、空载体EGFP-C1转染Hela、EGFP-HIF-1α反义Hela细胞,在37℃,5%CO2,1%O2培养环境中培养细胞对照;通过Western blotting检测各组细胞内HIF-1α蛋白表达,用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率、软琼脂克隆形成方法观察各组细胞的增殖、Transwell侵袭小室方法观察各组细胞的侵袭能力的改变。结果蛋白免疫印迹结果显示,在低氧环境中Hela细胞和仅转染EGFP-C1质粒的Hela细胞中有HIF-1α蛋白的表达条带,而EGFP-HIF-1α反义Hela细胞无表达。并且在低氧环境中EGFP-HIF-1α反义Hela细胞与Hela细胞和仅转染EGFP-C1质粒的Hela细胞相比,其细胞的凋亡率增加、细胞的侵袭能力及细胞集落的形成被抑制,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 HIF-1α能够对宫颈癌Hela细胞的恶性生物学行为产生影响,包括抗凋亡、促增殖、侵袭转移等,且在体外抑制HIF-1α的表达对宫颈癌细胞的凋亡有抑制作用。