不同浓度尿酸盐对人肝THLE-2细胞钙代谢的影响及机制研究

目的:观察不同浓度尿酸盐对人肝THLE-2细胞钙代谢的影响及机制。方法:体外培养人肝THLE-2细胞,取生长状态佳且处于对数生长期的THLE-2细胞,将其分为A组(阴性对照组)、B组(360 mol/L尿酸盐)、C组(600 mol/L尿酸盐)三个实验组;各组干预THLE-2细胞48 h后,采用Fluo-3/AM荧光探针测定细胞内Ca^(2+)浓度,实时定量RT-PCR及Western blot法检测细胞三磷酸肌醇受体(IP3R)mRNA及蛋白表达。结果:B组与C组中THLE-2细胞内Ca^(2+)浓度均高于A组(均P<0.05),B组与C组中IP3R mRNA的表达水平均高于A组(均P<0.05),B组与C组中THLE-2细胞中IP3R蛋白表达水平均高于A组(均P<0.05);B组IP3R mRNA和蛋白表达水平均低于C组(均P<0.05)。结论:高尿酸血症可明显影响人肝THLE-2细胞钙离子水平,其机制可能与升高THLE-2细胞IP3R mRNA及蛋白表达水平、影响内质网及线粒体钙稳态有关。