miR-146b-5p靶向ZNRF2影响IL-17a诱导乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:研究miR-146b-5p对IL-17a诱导的乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在分子机制。方法:免疫组织化学法检测20例乳腺癌组织和对应癌旁组织中IL-17a表达,qRT-PCR法检测组织中miR-146b-5p表达,Western blot检测组织中ZNRF2蛋白表达。Pearson相关性检验分析乳腺癌组织中IL-17a与miR-146b-5p及miR-146b-5p和ZNRF2表达的相关性。不同浓度的IL-17a处理乳腺癌细胞MDA-MB-231后,MTT法检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,qRT-PCR法检测细胞中ZNRF2 mRNA和miR-146b-5p表达,Western blot检测ZNRF2、MMP-2、MMP-9及STAT3信号通路蛋白STAT3和pSTAT3蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证细胞中miR-146b-5p与ZNRF2的关系。结果:与癌旁组织相比,乳腺癌组织中IL-17a表达呈阳性(P<0.05),miR-146b-5p表达水平明显降低(P<0.05),ZNRF2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。IL-17a处理MDA-MB-231细胞后,细胞增殖能力升高(P<0.05),迁移和侵袭数增多(P<0.05),细胞中MMP-2、MMP-9和p-STAT3蛋白表达水平升高(P<0.05),miR-146b-5p表达水平降低(P<0.05),ZNRF2的mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。miR-146b-5p靶向负调控ZNRF2表达。过表达miR-146b-5p或沉默ZNRF2后,细胞增殖能力降低(P<0.05),迁移和侵袭数减少(P<0.05),细胞中MMP-2、MMP-9和p-STAT3蛋白表达水平降低(P<0.05)。IL-17a可逆转过表达miR-146b-5p或沉默ZNRF2对MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭及STAT3信号通路的影响。结论:miR-146b-5p通过靶向下调ZNRF2表达并抑制STAT3信号通路降低IL-17a诱导的乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭。