南蛇藤素对肿瘤血管的抑制作用

目的探讨南蛇藤素对肿瘤血管抑制作用。方法通过建立动物肿瘤模型,对南蛇藤素予以实验治疗,结合免疫组化,检测其抑瘤率和肿瘤内血管密度,以及瘤体VEGF和bFGF的表达的改变。结果南蛇藤素具有明显的抑制S180肉瘤作用,其3mg/kg剂量组抑瘤率达46.86%,与5Fu联用抑瘤率达60.2%,联合给药组和南蛇藤素3mg/kg剂量组的微血管密度、VEGF、bFGF的表达均明显低于对照组间和5Fu组,差异有显著性(P<0.01)。结论南蛇藤素对小鼠S180肉瘤血管有一定的抑制作用,降低VEGF、bFGF的表达可能是其抑制肿瘤血管形成的机制之一。

转染pCE-GFP的重组骨髓间充质干细胞对Walker-256细胞的体外抗肿瘤作用

目的转染pCE-GFP质粒至大鼠的骨髓间充质干细胞(BMSCs),研究重组BMSCs(rBMSCs)对Walker-256细胞的体外抗肿瘤作用。方法贴壁培养法分离获得BMSCs,Lipofectamine 2000转染pCE-GFP质粒至BMSCs,rBM-SCs经肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)处理促进分化。采用ELISA法检测rBMSCs培养上清中白蛋白和甲胎蛋白水平;MTT法检测rBMSCs培养上清对Walker-256细胞生长增殖的影响;RT-PCR法检测rBMSCs培养上清对Walker-256细胞Bcl-2和Bax mRNA表达的影响;采用细胞共培养跨膜迁移实验,观察rBMSCs趋化能力的改变。结果 rBMSCs培养上清对大鼠Walker-256细胞增殖抑制作用较BMSCs强,差异有统计学意义(P<0.05);经HGF处理的rBMSCs组作用强于未经HGF处理的rBMSCs组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。经HGF处理的rBM-SCs组与其他3组比较,Bax mRNA表达显著上调(P<0.05);Bcl-2 mRNA表达在各组中未见明显改变。rBMSCs的趋化能力增强,与BMSCs组比较差异有统计学意义(P<0.05),且经HGF处理的rBMSCs组趋化能力强于未经HGF处理的rBMSCs组(P<0.05)。结论经HGF处理的rBMSCs通过调控Walker-256细胞的增殖和凋亡作用及增强对肿瘤细胞的趋化能力而发挥抗肿瘤作用。

平消片合并化疗治疗晚期恶性肿瘤132例疗效观察

目的探讨平消片与联合化疗治疗晚期肿瘤的疗效及副反应。方法将132例晚期恶性肿瘤随机分为两组，平消片加联合化疗组80例，化疗方案依不同类型肿瘤给予不同方案，均于化疗前一周开始予平消片口服，每天三次，每次6片，连服两月，化疗每周期为21-28天，均应用两周期以上；联合化疗组52例则采用与平消片加联合化疗组相同的化疗方案，同样化疗两个周期以上。结果两组化疗前后一般状况改变（KPS）差异具有显著性（P〈0．05），体重改变情况亦有显著性（P〈0．05），两组治疗后，临床缓解程度关系差异无显著性（P〉005），肝肾功能比较无明显差异（P〉0．05），白细胞则平消片组明显优于单用化疗组（P〈0.05）。

靶向肿瘤血管磁共振对比剂的制备及体外显像研究

目的制备针对肿瘤新生血管的靶向纳米磁共振(MR)对比剂,并用高场强MR检测其体外显像能力。方法通过碳二亚胺法将超小型超顺磁性氧化铁(USPIO)与环精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)肽连接。普鲁士蓝染色检测环RGD肽-超小型超顺磁性氧化铁复合物(RGD-USPIO)针对整合素αvβ3的特异性及靶向性。原子吸收分光光度计检测人脐静脉内皮细胞(HUVEC)对RGD-USPIO的摄取量变化。透射电镜检测RGD-USPIO的亚细胞定位。4.7 T MR检测不同时间梯度HUVEC摄取RGD-USPIO及单纯USPIO引起MR T2值的变化。结果 RGD-USPIO可特异性结合αvβ3,具有良好的靶向性,HUVEC摄取的RGD-USPIO主要位于细胞内,并可引起MR T2信号强度明显下降,与USPIO组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RGD-USPIO可特异性地与高表达整合素αvβ3的HUVEC结合,明显降低高场强MR T2值,是一种具有前景的靶向MR对比剂。

健康意识理论为框架的教育模式对胃肠道恶性肿瘤患者化疗疗效和毒副反应的影响

目的探讨健康意识理论为框架的教育模式对胃肠道恶性肿瘤患者化疗疗效和毒副反应的影响。方法采用随机数字表法,将108例胃肠道恶性肿瘤化疗患者随机分为对照组和观察组,每组各54例。对照组实施传统健康教育方法,观察组实施健康意识理论教育模式,观察两组患者化疗疗效和毒副反应。结果观察组患者化疗血液毒副、胃肠道毒副、皮肤毒副、心肺肾毒副反应程度均较对照组低;化疗有效率较对照组高,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论健康意识理论为框架的教育模式在胃肠道恶性肿瘤化疗患者中的应用,能降低毒副反应的发生或程度,进而提高其化疗疗效。

薏苡仁注射液对小鼠移植性S180肉瘤血管形成抑制的作用

目的 探讨薏苡仁注射液对肿瘤血管形成抑制作用。方法 通过建立动物肿瘤模型 ,运用薏苡仁实验治疗 ,检测其抑瘤率和肿瘤内血管密度 ,以及瘤体VEGF和bFGF表达的改变。结果 薏苡仁具有明显的抑制S180肉瘤生长作用。实验组的S180瘤体内微血管密度均明显低于对照组 ;免疫组化显示薏苡仁大、中剂量组均可下调S180瘤体内VEGF、bFGF的表达。结论 薏苡仁注射液对肿瘤血管形成均有明显抑制作用 ,降低VEGF、bFGF的表达可能是其抑制肿瘤血管形成的主要机制之一。

三氧化二砷逆转人肺腺癌A549/R细胞耐药及对GSTs表达的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对人肺腺癌A549/R细胞耐药的逆转及谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)表达的变化。方法分别采用生化方法及RT-PCR方法检测GSTs活性及GST-πmRNA表达水平的变化。结果0.15μmol/LAs2O3可使A549/R细胞内阿霉素(ADM)浓度增加,其IC50值由原来的0.495μmol/L降低至0.217μmol/L,逆转倍数为2.3倍。耐药细胞中GSTs活性增高,GST-πmRNA呈过表达状态。不同浓度的As2O3作用后,GSTs活性下降(P<0.05),GST-πmRNA表达水平下调,呈浓度依赖性变化。结论As2O3可部分逆转A549/R细胞对ADM的耐药性,GST-π的改变参与其耐药机制。

三氧化二砷抑制肝癌HepG2细胞侵袭转移及对RhoC基因表达的影响

目的了解三氧化二砷(As2O3)对肝癌HepG2细胞体外黏附、侵袭和迁移的抑制作用及对转移基因RhoC表达的影响,探讨As2O3抑制肝癌细胞转移的机制。方法分别采用MTT法、Transwell检测As2O3对HepG2细胞黏附、迁移、侵袭能力的影响;采用RT-PCR、Westernblot方法检测As2O3作用前后HepG2细胞中RhoC基因的表达及变化。结果As2O3作用后HepG2细胞黏附率、侵袭及侵袭细胞数较对照组明显下降(P<0.05)。As2O3作用4、6、8天后RhoC-mRNA及蛋白表达水平逐渐下降(P<0.05)。HepG2细胞中RhoC-mRNA表达和蛋白表达具有相关性(r=0.92,P=0.046)。结论As2O3可明显抑制HepG2细胞细胞黏附、迁移和侵袭的能力;并可通过下调RhoC基因的表达而抑制其侵袭转移。

端锚酶反义寡核苷酸联合反义端粒酶催化亚单位对人肺腺癌A549细胞端粒动力学的影响

背景与目的:端锚酶是真核生物体内的一种重要的功能蛋白,对调节细胞端粒长度及参与细胞衰老和永生化过程起着重要的作用。本研究探讨端锚酶及端粒酶反义寡核苷酸联合作用对人肺腺癌A549细胞端粒相关蛋白表达和翻译的影响,以及对端粒缩短效能和细胞周期的作用。方法:将培养的A549细胞分为空白对照组、端锚酶正义寡核苷酸对照组(tankyrase sense oligonucleotide,sTANKS)、端粒酶催化亚单位正义寡核苷酸对照组(human telomerase reverse transcriptase sense oligonucleotide,shTERT)、端锚酶反义寡核苷酸实验组(tankyrase antisense oligonucleotide,asTANKS)、端粒酶催化亚单位反义寡核苷酸实验组(human telomerase reverse transcriptase antisense oligonucleotide,ashTERT)、端锚酶及端粒酶催化亚单位反义寡核苷酸联合实验组(asTANKS+ashTERT)。分别与不同的正、反义寡核苷酸作用,采用RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction)法观察端粒酶催化亚单位的mRNA表达,ELISA-PCR法测定端粒酶活性,Western blot法观察端锚酶活性,Q-FISH法检测各组端粒的平均长度;并通过传代实验观察不同正、反义寡核苷酸对A549细胞传代寿命的影响。结果:ashTERT能明显抑制端粒酶催化亚单位的mRNA表达及蛋白质活性,不影响端锚酶活性;作用48h后细胞平均端粒长度明显缩短[(7.59±0.07)kb];细胞在经过56.92±0.46个倍增时间(population double,PD)连续培养终止。asTANKS不影响端粒酶催化亚单位mRNA表达及蛋白质活性,却能明显抑制端锚酶活性;作用48h后细胞平均端粒长度明显缩短[(7.33±0.09)kb];细胞在经过(53.33±0.57)PD连续培养终止。ashTERT+asTANKS联合作用同时抑制端粒酶和端锚酶,其细胞平均端粒长度缩短更为明显[(3.55±0.08)kb],流式直方图上FITC荧光"左偏"更显著,与ashTERT、asTANKS比较差异有显著性(t=37.33、32.50,P<0.001);ashTERT+asTANKS组细胞在经(24.53±0.40)PD后培养终止,与ashTERT、asTANKS比较差异也有显著性(t=53.38、43.39,P<0.001)。结论:端锚酶反义寡核苷酸对A549细胞端粒长度的抑制有别于端粒酶途径,它不仅能通过影响端锚酶活性,缩短A549细胞端粒的平均长度,而达到缩短肿瘤细胞生存寿命的目的;而且可与端粒酶抑制剂产生协同作用,明显缩短肿瘤细胞的生存周期,可能成为抗癌作用的新靶点。

三氧化二砷对人肺腺癌A549/R细胞多药耐药相关蛋白表达的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对人肺腺癌A549/R细胞耐药性的逆转作用及对多药耐药相关蛋白(MRP)表达的影响。方法以荧光分光光度计测定细胞内药物浓度的改变,采用半定量逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)技术检测As2O3处理后A549/R MRP基因表达的变化。结果As2O3的非细胞毒性剂量可增加A549/R细胞内多柔比星(ADM)浓度,降低其IC50。A549/R细胞中MRP呈过表达状态,不同浓度的As2O3处理A549/R后MRP表达水平明显降低。结论As2O3可部分逆转A549/R细胞对ADM的耐药性,其逆转机制与改变MRP基因表达有关。

唑来膦酸治疗多发性骨髓瘤骨痛的疗效

目的:观察唑来膦酸在多发性骨髓瘤患者不同程度骨骼病变中的治疗作用。方法:按疼痛分级标准比较治疗前后骨痛缓解情况,检测治疗前后血钙水平变化情况,比较骨骼X线片影像学的改变,以及观察药物不良反应的发生。结果:唑来膦酸能降低各种骨骼病变的血钙水平和减轻骨痛,未见严重不良反应。结论:唑来膦酸能减轻多发性骨髓瘤骨痛。

甘草次酸对黑素瘤细胞侵袭力及明胶酶表达的影响

目的探讨甘草次酸(GA)对黑素瘤细胞侵袭能力和明胶酶表达的影响。方法体外培养黑素瘤细胞系SK-MEL-1,用MTT法检测不同浓度GA对细胞增殖的影响;采用Transwell小室基质胶侵袭实验观察GA对SK-MEL-1细胞株侵袭能力的影响;应用半定量RT-PCR检测GA对明胶酶A和B mRNA表达的影响;明胶酶谱法检测GA对SK-MEL-1细胞明胶酶活性的影响。结果SK-MEL-1细胞增殖抑制率与GA浓度及用药后培养时间呈正相关。GA对SK-MEL-1细胞侵袭能力的抑制与浓度相关,各浓度处理组与对照组差异均有显著性意义(P<0.01);GA能抑制SK-MEL-1细胞明胶酶A和B mRNA表达,与浓度呈正相关,各处理组与对照组差异有显著性意义(P<0.05);GA能够抑制SK-MEL-1细胞明胶酶活性,随浓度增高抑制作用增强,与对照组相比,120,240μmol/L浓度组差异具有显著性意义(P<0.05)。结论GA能够抑制黑素瘤细胞的增殖与侵袭能力,可能与抑制明胶酶的表达有关。

甘草甜素对HepG2细胞的影响及其作用机制

目的研究甘草甜素在HepG2细胞恶性增殖中的作用及其分子机制。方法取对数生长期的HepG2细胞分别用50,100,200μmol·L^(-1)不同浓度的甘草甜素培养12 h、24 h、48 h。采用MTT法检测甘草甜素对HepG2细胞增殖的影响;采用TUNEL染色法和GFP-LC3质粒转染法检测甘草甜素对HepG2细胞凋亡及自噬的影响;采用Western blot检测甘草甜素对P13K/AKT/mTOR信号通路中关键蛋白的影响。结果甘草甜素可显著抑制HepG2细胞增殖,促进细胞凋亡及细胞中自噬小体的形成。与对照组相比较,甘草甜素处理HepG2细胞48 h后,细胞中mTOR、S6、PI3K以及AKT的磷酸化水平明显降低。结论甘草甜素通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路诱导凋亡和自噬,进而抑制HepG2细胞的恶性增殖。

早期肠内营养对结肠癌患者化疗期间营养状况及免疫功能的影响

目的探讨采用双腔营养管进行早期肠内营养对结肠癌患者化疗期间营养状况及免疫功能的影响。方法晚期结肠癌患者178例,根据随机数字表法分为治疗组与对照组各89例,所有患者都常规给予FOL-FOX4化疗方案(奥沙利铂^+亚叶酸钙^+5-氟尿嘧啶),治疗组在化疗期间采用双腔营养管进行早期肠内营养,对照组采用普通营养管进行早期肠内营养。结果化疗后两组血清白蛋白水平均明显高于化疗前(P<0.05);化疗前后两组血清白蛋白水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。化疗前两组血清CD4^+、CD8^+水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);化疗后两组血清CD4^+水平均明显高于化疗前(P<0.05),而血清CD8^+水平明显低于化疗前(P<0.05);化疗后治疗组血清CD4^+水平明显高于对照组(P<0.05),而血清CD8^+水平明显低于对照组(P<0.05)。治疗组每次化疗的出院时间、胃管拔管时间与营养管拔管时间都明显少于对照组(P<0.05)。治疗组化疗期间并发症发生率为6.74%,明显低于对照组的20.22%(P<0.05)。结论早期肠内营养能明显改善结肠癌患者化疗期间的营养状况;采用双腔营养管进行早期肠内营养能更加有效促进患者免疫功能的提高,降低并发症发生率,利于患者康复。

奥沙利铂对肝癌HepG2细胞生长及侵袭转移的抑制作用

目的观察奥沙利铂(L-OHP)对人肝癌HepG2细胞生长、凋亡、黏附及侵袭行为的影响。方法分别采用MTT法及Annexin V/PI双染色流式细胞术检测不同浓度L-OHP对肝癌HepG2细胞生长及凋亡的影响;分别以MTT法及Transwell实验检测L-OHP对HepG2细胞黏附、迁移及侵袭力的影响。结果在(10.0～40.0)mg/L浓度的L-OHP作用下,HepG2细胞增殖明显降低,抑制作用呈浓度和时间依赖性(P<0.01);5.0mg/L以下浓度无明显的细胞毒作用;(2.5～10.0)mg/L的L-OHP可使凋亡细胞明显增多(P<0.05);无毒剂量(2.5mg/L)的L-OHP作用时,HepG2细胞的黏附力明显下降(P<0.05),30、60、90和120min的黏附抑制率分别为29.2%、27.3%、26.6%和24.8%;HepG2细胞的迁移及侵袭细胞数明显减少(P<0.01),迁移、侵袭抑制率分别为53.68%和54.38%。结论 L-OHP既可通过抑制肝癌细胞增殖、诱导凋亡,又可通过抑制肝癌细胞黏附、迁移、侵袭能力发挥抗转移的作用。

VEGF促进人黑素瘤SK-MEL-1细胞侵袭性的自分泌机制初探

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)对人黑素瘤细胞SK-MEL-1侵袭力以及对该细胞中基质金属蛋白酶9(MMP-9)的影响,初步研究VEGF对肿瘤侵袭能力的影响及可能的作用机制。方法使用VEGF体外培养人黑素瘤SK-MEL-1细胞,免疫组化法检测该细胞VEGFR-1水平;通过细胞体外侵袭实验检测细胞侵袭能力的改变,再分别使用含20,40,80μg/LVEGF培养液培养SK-MEL-1细胞,以正常培养SK-MEL-1细胞为空白对照组,使用半定量RT-PCR和Western blot法对4组细胞中MMP-9 mRNA表达和蛋白水平进行分析。结果 VEGFR-1在SKM-EL-1细胞胞核和胞浆中均有表达。外加VEGF培养后,细胞侵袭力明显增强(P<0.01);MMP-9mRNA表达和蛋白水平在外加VEGF组明显高于空白对照组,且高浓度和低浓度组之间差异有统计学意义(P均<0.05)。结论人黑素瘤SK-MEL-1细胞系中存在有自分泌机制,VEGF可通过自分泌机制上调人黑素瘤SK-MEL-1细胞MMP-9mRNA表达及蛋白水平,进而促进肿瘤的侵袭转移。

三氧化二砷抑制肝癌细胞侵袭转移的实验研究

目的了解三氧化二砷(As2O3)对肝癌HepG2细胞体外黏附、侵袭和迁移的抑制作用。方法采用MTT法观察As2O3对HepG2细胞黏附能力的影响,以Transwell检测As2O3对HepG2细胞迁移、侵袭能力的影响。结果As2O3作用后30、60、90、120min时的细胞黏附率较对照组均明显下降,不同时间组与对照组之间差异均有显著性(P<0.05);As2O3作用后游走及侵袭穿膜细胞数也较对照组明显下降(P<0.01)。结论As2O3可明显抑制HepG2细胞细胞黏附、迁移和侵袭的能力。

复方苦参注射液对rBMSCs细胞增殖和迁移能力的影响

目的采用不同浓度复方苦参注射液在常氧或缺氧条件下作用不同时间后,观察rBMSCs细胞增殖和迁移能力的变化情况。方法 MTT法检测rBMSCs增殖的情况;ELISA法检测rBMSCs培养上清中SDF-1水平的变化;Transwell检测rBMSCs迁移能力的改变。结果在100μL/mL、200μL/mL和300μL/mL组处理24h和48 h后细胞的存活率,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。在200μL/mL处理24 h组,细胞上清液中SDF-1含量上升,差异有统计学意义(P<0.05)。200μL/mL组细胞迁移率与其他剂量组比较,差异有统计学意义。结论在适当浓度复方苦参注射液作用下,在低氧条件下能提高rBMSCs细胞存活率,能促进rBMSCs分泌SDF-1,利于rBMSCs细胞发生迁移。

重组人促红细胞生成素治疗化疗后贫血29例临床观察

目的观察重组人促红细胞生成素(rhEPO)治疗恶性肿瘤化疗后贫血的疗效。方法56例恶性肿瘤化疗后贫血患者随机分为两组:rhEPO治疗组29例,在化疗的同时给予rhEPO治疗,对照组27例,在化疗时给予中药或支持治疗,两组患者均给予铁剂口服。结果两组治疗前血红蛋白(Hb)、红细胞比容(HCT)、红细胞(RBC)总数各值比较差异无显著性意义(P>0·05),治疗后两组各值比较差异均有显著性意义(P<0·05),治疗组治疗后各值较治疗前差异有显著性意义(P<0·05)。治疗组在使用rhEPO后,2周和8周对贫血的有效率为18·3%和78·2%。结论rhEPO对恶性肿瘤化疗后贫血有确切疗效。