人源性Rab38荧光融合蛋白表达载体的构建及功能鉴定

目的构建人源性Rab38与EGFP融合蛋白表达载体pEGFP-Rab38,观察Rab38在人黑素细胞瘤细胞系A375中的细胞定位情况,为进一步研究Rab38在黑素代谢中的作用提供实验依据。方法收集A375细胞,提取总RNA并逆转录成cDNA。特异性引物PCR扩增Rab38片段并插入pEGFP-C3载体,随后转化至感受态大肠杆菌DH5α中,挑取单克隆菌落进行鉴定。将鉴定正确的重组表达载体转染A375细胞,检测细胞中Rab38和Tyrp1(酪氨酸酶相关蛋白1)的表达并观察Rab38的亚细胞定位。结果 pEGFP-Rab38重组质粒经菌液PCR、双酶切和测序鉴定正确;转染A375细胞后,激光共聚焦显微镜观察到Rab38定位于胞浆中,且大量聚集于细胞核周围;实时定量PCR和Western blot可检测出细胞中EGFP-Rab38融合蛋白的表达,且细胞中Tyrp1的表达明显升高。结论融合蛋白表达载体pEGFP-Rab38成功构建,观察了Rab38在细胞中的定位并初步研究了其对黑素合成关键蛋白Tyrp1的影响,为进一步研究Rab38在黑素代谢中的作用奠定了良好的基础。

儿童急性荨麻疹78例临床分析

目的:分析儿童急性荨麻疹的临床表现及治疗效果。方法:收集2011年7月～2012年12月我院门诊及住院的儿童急性荨麻疹患者78例,采用抗过敏药物、抗菌药物及抗病毒药物治疗4～15天,观察其临床疗效。结果:患者全身症状一般都缓解,体温降至正常,瘙痒减轻甚至消失,风团、红斑颜色变浅至消失,血象恢复正常。随访一个月,无复发。结论:急性荨麻疹多发生于儿童,需采用抗过敏、抗感染及抗病毒药物联合治疗。

复方黄柏液联合氦氖激光照射治疗痤疮模型大鼠的实验研究

目的研究复方黄柏液联合氦氖激光照射对痤疮模型大鼠的疗效及相关机制。方法 SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组、模型对照组、复方黄柏液治疗组、氦氖激光治疗组和复方黄柏液+氦氖激光联合治疗组。采用煤焦油刺激联合痤疮丙酸杆菌注射制备大鼠右耳痤疮模型。各组分别予以对应治疗或处理,14天后观察大鼠一般情况,测定其右耳耳廓厚度和痤疮数量,计算肿胀率;使用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中TNFα、IL-1β的表达及变化;使用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠皮肤组织中的TNFα、IL-1β的蛋白表达及变化。结果与空白对照组比较,模型对照组右耳耳廓厚度显著增加(P<0.01),肿胀率显著增高(P<0.01),痤疮数量显著增多(P<0.01)。与模型对照组比较,复方黄柏液+氦氖激光治疗组显著降低大鼠耳廓的厚度(P<0.01)和肿胀率(P<0.01),减少痤疮个数(P<0.01);而复方黄柏液治疗组和氦氖激光治疗组虽也有改善趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。血清和皮肤组织TNFα、IL-1β的表达结果一致,即与空白对照组比较,模型对照组TNFα、IL-1β的表达均显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,复方黄柏液+氦氖激光治疗组的TNFα、IL-1β的表达则显著下调(P<0.01);复方黄柏液治疗组和氦氖激光治疗组虽也有下调趋势,但无统计学意义(P>0.05)。结论复方黄柏液联合氦氖激光照射治疗对痤疮模型大鼠有较好的治疗和改善作用,其作用机制可能与炎性因子TNFα、IL-1β被抑制有关。