华夏小葱制剂对氧化低密度脂蛋白诱导内皮细胞损伤的影响及相关机制

目的:观察人脐静脉内皮细胞在氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,Ox-LDL)损伤作用下,其细胞形态、活力和凋亡率的改变及华夏小葱制剂的干预作用,并探讨其可能的分子作用靶点。方法:体外培养脐静脉内皮细胞,制备Ox-LDL,将100μg/L Ox-LDL和不同药物分别作用于内皮细胞,24h后观察各组的细胞形态,显微镜下细胞计数,甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定各组和空白对照组的细胞活力以及细胞上清液中一氧化氮(nitric oxide,NO)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性,用逆转录-多聚酶链反应(reverse transcription polymerase chain reac- tion,RT-PCR)技术结合图像分析技术观察过氧化物酶体增殖激活受体γ(peroxisome proliferators activa- ted receptorγ,PPARγ)及内支型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)表达的变化,用蛋白免疫印迹(Western blot)技术测定细胞PPAR-γ及eNOS蛋白的表达。结果:Ox-LDL能抑制内皮细胞分泌NO的活性并增加内皮细胞的凋亡,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。华夏小葱制剂能通过上调PPAR-γ及eNOS的表达来刺激内皮细胞分泌NO的活性,同时减少内皮细胞的凋亡,与Ox-LDL组比较差异有统计学意义(P<0.05),其效果仅次于平福注射液,优于丹参滴丸及立普妥。结论:华夏小葱制剂使内皮细胞NO活性增强的同时降低了细胞凋亡率,其保护内皮细胞的作用机制可能与调节PPAR-γ及eNOS表达有关。