新型冠状病毒肺炎重症患者凝血功能的特征和影响因素分析

目的:分析新型冠状病毒肺炎(COVID-19)重症患者凝血功能的临床特点,并探讨凝血功能异常的可能原因与应对措施。方法:收集并回顾性分析2020年2月10日至2020年2月16日武汉市第三医院收治的COVID-19重症患者142例的临床资料,17例死亡患者设为观察组,125例治愈出院患者为对照组。观察2组患者的临床特点,实验室指标和影响因素,抗凝治疗现状,栓塞和出血事件。结果:142例患者平均住院时间为22 d。观察组患者平均住院时间为9.9 d,均较对照组患者有更高的D-二聚体(D-D)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞百分比(NEU%)和Padua评分。PT (OR=1.064,95%CI 1.012-1.119)、D-D(OR=1.045,95%CI 1.027-1.064)是导致COVID-19患者死亡的独立危险因素(P均<0.05)。36(25.4%)例患者进行了低分子肝素抗凝治疗,平均疗程9.6 d。观察组栓塞事件复合发生率为7例(41.2%),其中2例(11.8%)患者伴发深静脉血栓形成(DVT)和肺栓塞(PE),3例(17.6%)伴发脑梗死,2例(11.8%)心肌梗死,较对照组的2例(1.6%)有显著性差异。3例(17.6%)死亡患者合并有显性弥散性血管内凝血(DIC)。结论:COVID-19重症患者通常存在多种血栓事件的危险因素,存在出凝血功能障碍的患者死亡率较高,疾病进展速度快,应动态监测凝血指标,积极进行机械及药物预防。

无创血流动力学监测在严重脓毒症患者早期液体复苏治疗中的作用研究

目的探讨无创血流动力监测法(ICG)在指导严重脓毒症患者液体复苏及血管活性药应用中的作用。方法选取2012年1月-2012年12月在该院重症医学科住院治疗的严重脓毒症患者37例为常规组(A组);选取2013年1月-2013年12月在该院重症医学科住院治疗的严重脓毒症患者43例为对照组(B组)。A组以严重脓毒症的集束化治疗为指导进行治疗。B组则在集束化治疗为指导的基础上,以ICG监测指导进行液体复苏及血管活性药物的使用。观察6 h后平均动脉压(MAP)、中心静脉压(CVP)、血乳酸值<2 mmol/L和中心静脉血氧饱和度(Scv O2)>70%的比例、液体平衡、血管活性药物用量;ICU住院时间。结果在液体复苏前,两组患者的年龄、性别、病因、APACHEⅡ评分、血流动力学状态比较,差异无统计学意义;A组与B组液体复苏6h后Scv O2、血乳酸值比较差异无统计学意义(P>0.05)。但A组与B组比较,6 h液体复苏的量明显增多;血管活性药物去甲肾上腺素及多巴酚丁胺用量明显减少(P<0.05)。但ICU住院时间B组则明显缩短(P<0.05)。结论以ICG监测指导严重脓毒症患者液体复苏及血管活性药应用,能更精确进行液体管理,减少盲目补液,缩短ICU住院时间。

γ-分泌酶抑制剂在肺纤维化上皮间质转化中的作用

目的检测体外转化生长因子(TGF)-β1诱导肺纤维化上皮间质转化(EMT)的形成情况并检测Notch信号特异性抑制剂γ-分泌酶抑制剂(DAPT)对其影响及可能机制。方法将A549细胞分成对照组(RPMI 1640完全培养基培养)、TGF-β1组(在含有10μg/L TGF-β1的RPMI 1640培养基中培养)、TGF-β1+DAPT组(在含有10μg/L TGF-β1和2μmol DAPT的RPMI 1640培养基中培养)、DAPT组(在含有2μmol DAPT的RPMI 1640培养基中培养)。通过倒置显微镜观察细胞形态,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测肺泡上皮细胞特异性蛋白E-钙黏合素以及间质细胞特异性蛋白α-肌动蛋白(α-SMA)mRNA相对表达水平,Western blot检测E-钙黏合素以及α-SMA蛋白表达水平。结果倒置显微镜检查示,对照组细胞呈多边形,铺路石样,细胞间连接紧密;TGF-β1组细胞呈梭行,纺锤状,细胞间连接减少;TGF-β1+DAPT组仅有少量细胞呈梭形,多数细胞形态与对照组相似;DAPT组细胞形态大致同对照组。与对照组相比,TGF-β1组α-SMA蛋白及mRNA表达增加,而E-钙黏合素蛋白及mRNA表达减弱(P<0.05);与TGF-β1组比较,TGF-β1+DAPT组α-SMA蛋白及mRNA表达水平降低,而E-钙黏合素蛋白及mRNA表达水平增加(P<0.05);DAPT组与对照组2指标的蛋白与mRNA相对表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论TGF-β1可诱导肺上皮间质转化,而Notch信号抑制剂DAPT能够阻断、部分或全部逆转这一过程。

不同剂量甲泼尼龙治疗老年AECOPD的疗效及其对炎症因子水平的影响比较

目的:观察和比较不同剂量甲泼尼龙治疗老年慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)的疗效及其对炎症因子的影响。方法:选取2014年1月到2017年1月收治的114例老年AECOPD患者,随机将患者分为A组、B组和C组各38例。A组采用甲泼尼龙40 mg/d静脉推注,B组采用甲泼尼龙80 mg/d静脉推注,C组不使用甲泼尼龙。对比三组患者的临床疗效以及治疗前后的改良版英国医学研究委员会呼吸问卷(mMRC)评分、动脉血氧分压(PaO_2)、动脉二氧化碳分压(PaCO_2)、下去白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及C反应蛋白(CRP)水平的变化。结果:治疗后,A组的总有效率为89.47%,B组的总有效率为92.11%,均显著高于C组(均P<0.05)。A组和B组治疗后的mMRC评分、PaCO_2水平均显著低于C组,而PaO_2水平显著高于C组(均P<0.05);B组治疗后的m MRC评分、PaCO_2均显著低于A组,而PaO_2显著高于A组(均P<0.05);A组和B组治疗后的血清IL-6、IL-8、TNF-α以及CRP水平均显著低于C组(均P<0.05);B组治疗后的血清IL-6、IL-8、TNF-α、CRP水平均显著低于A组(均P<0.05)。三组患者不良反应发生率的对比差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:与40 mg/d甲泼尼龙相比,短期80 mg/d甲泼尼龙静脉推注可更显著减轻AECOPD患者的炎症反应,提高临床疗效,同时具有良好的安全性。

自噬在急性肺损伤小鼠Treg/Th17细胞失衡中的作用研究

目的探讨自噬对急性肺损伤小鼠Treg/Th17细胞失衡的作用。方法24只雄性SD小鼠随机分为假手术组(S组)、脓毒症组(Sep组)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(Sep+3-MA组)。采用脂多糖气管滴注法制备ALI模型。在光镜下评估小鼠肺组织病理学损伤评分并计算肺湿干质量比值(W/D),通过流式细胞术检测小鼠气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中Th17细胞和Treg细胞计数及其相关细胞因子的水平,用Western blot法测定BALF中Th17细胞和Treg细胞内LC3-Ⅱ、Beclin-1和p62的表达。结果与S组比较,Sep组和Sep+3-MA组肺组织病理学评分、W/D比值升高(P<0.05);与Sep组比较,Sep+3-MA组BALF中Th17细胞计数下降,Treg细胞计数随着脓毒症的发展明显升高(P<0.05),IL-17、IL-10和TNF-α的水平均明显下降(P<0.05);而TGF-β1的水平在脓毒症的早期升高,而随着脓毒症的发展,TGF-β1的水平明显下降(P<0.05)。与Sep组比较,Sep+3-MA组小鼠BALF中Th17细胞和Treg细胞内LC3Ⅱ的表达呈下降趋势,但差异无统计学意义,Beclin-1表达则明显下降(P<0.05),而p62的表达明显升高(P<0.05)。结论异常激活的自噬参与了脓毒症急性肺损伤中Th17/Treg细胞的失衡,抑制自噬可恢复Th17细胞和Treg细胞的功能,使被打破了的平衡得到改善,通过抑制自噬改善Th17/Treg失衡可能成为调控脓毒症免疫紊乱的新思路。