舒筋活血胶囊通过JAK2/STAT3通路缓解大鼠膝骨关节炎的机制研究

目的探讨舒筋活血胶囊调控酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活蛋白3(STAT3)信号通路对大鼠膝骨关节炎(KOA)的影响及其机制。方法采用Hulth法制备大鼠KOA模型,将60只大鼠分为假手术组(Sham组)、KOA组、舒筋活血胶囊组(SJHX组)(472.5 mg/kg舒筋活血胶囊灌胃)、AG490组(5.0 mg/kg的JAK2抑制剂AG490腹腔注射),每组15只。HE染色与番红O-固绿染色观察滑膜组织与软骨组织病理变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素(IL)-10、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,免疫荧光法检测M1/M2型巨噬细胞极化,免疫组化染色检测IL-1β、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、基质金属蛋白酶(MMP)-13蛋白表达,Western blot检测JAK2/STAT3通路相关蛋白。结果与Sham组比较,KOA组大鼠关节面不平整,滑膜组织与软骨组织结构破坏,病理评分增加,血清IL-1β、TNF-α水平明显升高,IL-10水平降低,滑膜组织IL-1β、iNOS、MMP-13、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3表达水平及M1、M2型巨噬细胞、M1/M2比值升高(P<0.05);与KOA组比较,SJHX组与AG490组大鼠滑膜组织与软骨组织病理损伤减轻,病理评分降低,血清IL-1β、TNF-α水平降低,IL-10水平升高,滑膜组织IL-1β、iNOS、MMP-13、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3表达水平及M1巨噬细胞、M1/M2比值降低(P<0.05)。结论舒筋活血胶囊可通过抑制JAK2/STAT3信号通路激活,调节M1/M2巨噬细胞极化,改善KOA大鼠滑膜炎症状。

藏红花素调节Hippo-YAP信号通路抑制膝骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡

目的探讨藏红花素(crocin)调节Hippo/Yes相关蛋白(YAP)信号通路对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨细胞凋亡的影响。方法SD大鼠分为CK组、Model组、低剂量crocin组(crocin-L组,10 mg/kg)、高剂量crocin组(crocin-H组,40 mg/kg)、塞来昔布组(CLCX组,10 mg/kg)、crocin-H+VTPF(YAP抑制剂)组(40 mg/kg+10 mg/kg),每组12只。观察并记录大鼠热痛阈值、压痛阈值的变化;ELISA法检测大鼠血清中基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;HE染色检测大鼠软骨组织病理变化并进行Mankin评分;TUNEL染色检测大鼠软骨细胞凋亡;免疫组化、Western blot检测Bcl2相关X蛋白(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、p-YAP、YAP蛋白表达。结果与CK组比较,Model组大鼠热痛阈值、压痛阈值、p-YAP蛋白表达降低,软骨组织病理损伤严重,MMP-3、MMP-13、IL-1β、IL-6水平、Mankin评分、软骨细胞凋亡率、Bax、Caspase-3、YAP蛋白表达升高(P<0.05);与Model组比较,crocin-L组、crocin-H组、CLCX组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);VTPF减弱了高剂量crocin对KOA大鼠软骨细胞凋亡的抑制作用。结论crocin可能通过激活Hippo/YAP信号通路抑制KOA大鼠软骨细胞凋亡。

应用交锁髓内钉治疗胫腓骨骨折并发症分析

目的:为提高交锁髓内钉治疗骨折效果,作者总结了1997年4月～2002年6月用交锁髓内钉治疗的56例胫腓骨骨折。方法:选用G-K钉治疗胫腓骨骨折56例,年龄18～60岁,平均年龄32岁。结果:经过随访,本组56例骨折全部愈合。适应证选择不当造成内固定失败1例,术中再骨折2例。膝内翻2例,远端锁钉断裂1例,退出2例。结论:应用交锁髓内钉治疗胫腓骨骨折,应注意:(1)严格掌握适应证;(2)交锁钉的使用需要专门的操作技术,要严格按规程操作;(3)术后负重和功能锻炼要在医生指导下逐渐进行。

应用髋臼旋转截骨术治疗髋臼发育不良32例分析

目的 :探讨髋臼旋转截骨术治疗髋臼发育不良的临床效果。方法 :应用髋臼旋转截骨术治疗髋臼发育不良 3 2例 (年龄组 14～ 2 1岁 ,平均年龄 17岁 ) ,从解剖结构上矫正髋臼发育不良。结果 :全部病例术后可使髋关节疼痛消失 ,功能改善 ,X线复查显示髋关节正常的解剖关系得以重建 ,恢复了髋臼和股骨头之间正常的匹配关系。结论 :髋臼旋转截骨术是从根本上治疗髋臼发育不良的有效方法。

lncRNA HOXA11-AS抑制骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡与基质降解的作用研究

目的研究长链非编码RNA(long-nocoding RNA,lncRNA)HOXA11-AS在骨关节炎(osteoarthritis,OA)的大鼠软骨细胞中的表达情况,及其对软骨细胞凋亡、基质降解以及核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路的影响。方法采用弗氏完全佐剂注射大鼠构建OA大鼠模型,造模后分离培养软骨细胞;小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术抑制软骨细胞中HOXA11-AS表达;细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测转染siRNA不同时间后软骨细胞的活力;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测软骨细胞中HOXA11-AS及基质金属蛋白酶13(matrix metallo protein-13,MMP-13)、血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶5(a disintesrin and metalloprotease with thrombospondin type 5 motifs,ADAMTS-5)、Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)、聚集蛋白聚糖(aggrecan)mRNA的表达情况;流式细胞术检测软骨细胞的凋亡情况;酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)检测软骨细胞上清液中Bcl-2相关X蛋白(Bcl 2-associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达情况;蛋白质印迹法(western blot)检测MMP-13、ADAMTS-5、CollagenⅡ、aggrecan和抗核因子κB抑制蛋白(anti-nuclear factor kappa B inhibitory protein,IκBα)、抗磷酸化核因子κB抑制蛋白(anti-phosphorylated nuclear factor kappa B inhibitory protein,p-IκBα)、抗核因子κB 65(nuclear factor kappa B,NF-κB 65)的表达,免疫荧光染色检测NF-κB在软骨细胞细胞核中的表达情况。结果与正常组大鼠软骨细胞相比,HOXA11-AS在OA大鼠软骨细胞中高表达;与NC siRNA组比较,HOXA11-AS siRNA组细胞活力显著下降,细胞凋亡率及促凋亡因子Bax、Caspase-3的表达水平显著升高,而抑凋亡因子Bcl-2的表达水平显著下降;同时,与NC siRNA组比较,HOXA11-AS siRNA组细胞collagenⅡ和aggrecan的基因和蛋白表达水平明显降低,MMP-13和ADAMTS-5基因及蛋白表达水平明显升高,IκBα蛋白表达水平显著下降而p-IκBα和NF-κB p65的表达水平显著增高,此外,NF-κB在HOXA11-AS siRNA组细胞核中明显表达。结论lncRNA HOXA11-AS可以抑制骨关节炎大鼠软骨细胞的凋亡以及基质降解,并阻止NF-κB信号通路的激活。