罗哌卡因对白细胞介素-1β诱导的软骨细胞损伤的保护作用探究

目的 基于腺苷一磷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物西罗莫司靶蛋白(mTOR)通路探究罗哌卡因对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞损伤的保护作用。方法 对软骨细胞进行培养,将软骨细胞随机分为对照组、模型组和低、中、高剂量实验组。对照组常规培养,模型组用含10 ng·mL^(-1)IL-1β的培养基刺激细胞24 h,低、中、高剂量实验组在模型组的基础上,用25,50,100 mg·L^(-1)的罗哌卡因进行处理。用细胞计数法-8(CCK-8)检测各组细胞的增殖情况;用流式细胞术检测细胞凋亡情况;用蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞凋亡相关蛋白、细胞外基质降解相关蛋白及细胞中磷酸化AMPK(p-AMPK)和磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达的影响。结果 与对照组比较,模型组24,48,72 h OD值降低;与模型组相比,中、高剂量实验组24,48,72 h OD值均明显升高(均P<0.05)。对照组、模型组和低、中、高剂量实验组细胞凋亡率分别为(4.24±0.64)%,(18.13±1.53)%,(14.93±0.52)%,(11.19±0.74)%和(7.67±1.19)%。与对照组相比,模型组的凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、细胞外基质降解蛋白COL2A1及ACAN蛋白表达水平均明显降低,Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解的胱天蛋白酶-3(Cl-caspase-3)蛋白水平、基质金属蛋白酶13(MMP13)及ADAMTS5蛋白水平均明显升高(均P<0.05);与模型组相比,中、高剂量实验组的凋亡蛋白Bcl-2、细胞外基质降解蛋白COL2A1及ACAN蛋白表达水平均明显升高,Bax、Cl-caspase-3蛋白水平、MMP13及ADAMTS5蛋白水平均明显降低(均P<0.05)。结论 基于AMPK/mTOR通路,罗哌卡因对IL-1β诱导的软骨细胞损伤具有一定的保护作用。