Kv1.5蛋白对内毒素致血管内皮细胞氧化应激损伤的影响

目的研究Kv1.5蛋白对内毒素(LPS)所致血管内皮细胞氧化应激损伤的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),给予5μg/mL LPS刺激建立脓毒症细胞模型,并分为:空白对照组、LPS组、LPS+MT1组(以Kv1.5特异性通道阻滞剂MT 250nmol/L预处理30min)及LPS+MT2组(MT浓度为500nmol/L)。采用MTT法检测内皮细胞存活率;ELISA法检测细胞上清液中内皮细胞E-选择素(E-selectin)、细胞间粘附分子(ICAM-1)浓度变化;激光共聚焦显微镜观察内皮细胞内ROS水平;比色法检测脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与空白对照组比较,LPS组内皮细胞存活率明显下降[(32.54±1.87)%vs.(98.64±0.92)%,P<0.01],而LPS+MT1组及LPS+MT2组内皮细胞存活率分别为(77.39±1.15)%、(93.22±1.15)%,均较LPS组上升(均P<0.01);LPS组内皮细胞E-selectin、ICAM-1分泌增加(均P<0.01),予以250、500nmol/L MT预处理后,E-selectin、ICAM-1分泌减少(均P<0.01);激光共聚焦显微镜观察内皮细胞内ROS水平发现,LPS组细胞内ROS水平升高为空白对照组的(3.39±0.42)倍(P<0.05),予以250、500nmol/L MT预处理后,ROS水平分别为空白对照组的(1.88±0.36)倍、(1.46±0.47)倍,与LPS组比较,差异有统计学意义(均P<0.05);且LPS组较空白对照组MDA水平上升、SOD活性降低(均P<0.01),而MT预处理可降低MDA含量、增加SOD活性(均P<0.01)。结论 Kv1.5蛋白与内毒素诱导的血管内皮细胞损伤密切相关;MT通过阻断Kv1.5通道可减轻内皮细胞脂质过氧化损伤。

右美托咪定对老年急性呼吸窘迫综合征患者免疫炎性反应的影响

目的探讨右美托咪定对需有创机械通气的老年急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者的免疫炎性指标的影响。方法将58例老年ARDS患者随机分为对照组和观察组,每组29例。对照组采用常规的有创机械通气及抗感染、吸痰、营养等对症支持治疗,观察组在对照组的基础上再给予右美托咪定。治疗前和治疗后7 d抽取上述两组静脉血,检测比较两组谷草转氨酶、肌酐值、免疫指标及炎性因子含量变化,抽取动脉血进行血气分析。结果治疗7 d后两组动脉血氧分压、二氧化碳分压、氧合指数明显改善,免疫指标均有所改善,炎性因子表达水平均降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);观察组炎性因子表达水平较对照组明显降低(均P<0.05)。观察组治疗7 d后谷草转氨酶和肌酐值水平较对照组明显下降(P<0.05)。结论右美托咪定可提高老年ARDS患者血气指标,改善免疫功能,减轻炎性损伤,对其康复有益。

灯盏花素调控miR-499对脂多糖所致心肌H9c2细胞损伤的保护机制

目的研究灯盏花素调控miR-499对脂多糖(LPS)所致心肌H9c2细胞损伤的保护机制。方法将细胞分为空白组、对照组和低、中、高剂量实验组以及转染组、空白转染组。空白组用细胞培养液正常培养;对照组给予含1μg·mL^-1 LPS的细胞培养液培养;低、中、高剂量分别给予含1μg·mL^-1 LPS和25,50,100 mg·L^-1灯盏花素的细胞培养液培养;转染组给予miR-499 inhibitor转染,并用含有1μg·mL^-1 LPS和50 mg·L^-1灯盏花素的细胞培养液培养;空白转染组给予inhibitor control转染,并用含有1μg·mL^-1 LPS和50 mg·L^-1灯盏花素的细胞培养液培养。用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和活性氧(ROS)水平,用流式细胞术检测细胞凋亡。结果空白组、对照组和低、中、高剂量实验组及空白转染组、转染组的LDH漏出率分别为(16.97±1.10)%,(46.63±1.84)%,(38.67±1.36)%,(33.33±1.62)%,(22.27±0.95)%,(33.03±3.49)%和(41.60±2.33)%,SOD活性分别为(173.67±10.67),(85.33±6.03),(119.00±6.56),(134.33±10.41),(161.33±8.96),(135.00±6.56)和(94.33±8.50)kU·g^-1,GSH-Px活性分别为(796.67±30.11),(397.67±27.61),(507.33±25.03),(586.67±12.90),(619.00±16.70),(556.67±5.13)和(400.33±15.04)kU·g^-1,ROS分别为(101.00±5.00)%,(259.67±11.50)%,(205.33±12.60)%,(173.00±4.36)%,(121.67±6.03)%,(99.27±5.65)%和(139.67±3.51)%,凋亡率分别为(4.50±0.66)%,(28.73±2.38)%,(20.03±1.99)%,(18.53±0.65)%,(11.23±0.74)%,(19.67±1.39)%和(25.97±1.50)%。对照组的上述指标和低、中、高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);转染组的上述指标和空白转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论灯盏花素通过上调miR-499表达,从而保护LPS所致心肌H9c2细胞损伤。

垂体后叶素治疗反应性对感染性休克患者的预后价值

目的探讨垂体后叶素治疗血流动力学反应性对感染性休克患者预后的影响。方法根据加用垂体后叶素后能否减少儿茶酚胺类药物剂量将感染性休克患者分为治疗反应组和治疗无反应组,比较两组患者28d病死率。并根据初始血乳酸水平高低分为2个组,比较垂体后叶素治疗反应性。结果治疗反应组病死率为24.62%,治疗无反应组病死率为42.86%,两组患者病死率比较,差异有统计学意义(χ2=5.53,P<0.05);低乳酸组垂体后叶素治疗反应性的比率为59.15%,高乳酸组垂体后叶素治疗反应性的比率为27.06%,差异有统计学意义(χ2=16.40,P<0.05)。结论对垂体后叶素治疗有血流动力学反应的感染性休克患者预后更好,血乳酸水平低的感染性休克患者更容易出现垂体后叶素治疗血流动力学反应性。

微小RNA-181b在脓毒症急性肺损伤大鼠中的表达及炎性机制研究

探讨微小RNA-181b(miR-181b)在脓毒症诱导急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)发生时的差异表达及其与炎性因子白细胞介素-17(IL-17)表达的相关性。将24只28日龄健康雄性SD大鼠随机等量分为正常对照组、脓毒症3,6,12 h时相组(各6只),腹腔注射脂多糖(LPS) 10 mg/kg构建脓毒症大鼠ALI模型,采用HE染色观察大鼠肺组织病理形态变化。应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)研究SD大鼠ALI肺组织和对照组miR-181b的表达情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定大鼠肺组织IL-17的含量并进行相关性分析。结果表明:HE染色示脓毒症组大鼠肺组织呈ALI改变;脓毒症各组大鼠肺组织miR-181b表达水平均明显低于正常对照组,差异均有统计学意义(P <0. 05);各实验组大鼠肺组织中miR-181b的表达与IL-17水平均呈高度负相关(r=-0. 878,P=0. 000)。说明miR-181b在脓毒症大鼠诱导ALI发生时的表达量下调,并与炎性因子IL-17表达水平呈负相关,有望成为脓毒症ALI早期诊断、治疗、预后评估的新生物学标志。