中性粒细胞与淋巴细胞比值、单核细胞与高密度脂蛋白比值对急性非ST段抬高型心肌梗死预后的预测价值研究

目的探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、单核细胞与高密度脂蛋白比值(MHR)对急性非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)预后的预测价值。方法回顾性队列研究2020年1月至2022年12月武汉市第四医院急诊科入院并最终确诊为NSTEMI患者144例的临床资料。根据患者出院后6个月内是否出现不良心血管事件(MACE),将其分为MACE组(49例)和非MACE组(95例)。比较两组患者临床资料,采用多因素logistic回归分析NLR、MHR与NSTEMI患者出现MACE的关系,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析NLR、MHR预测NSTEMI患者预后的价值。结果单因素分析中,与非MACE组比较,MACE组左心室射血分数较低,入院时Killip分级>Ⅱ级比例、白细胞计数、肌酐、NLR、B型钠尿肽前体、高敏肌钙蛋白均较高,差异均有统计学意义(P<0.05);两组MHR比较,差异无统计学意义(P=0.916);多因素logistic回归结果显示,NLR是NSTEMI患者发生MACE的独立危险因素(OR=1.261,95%CI 1.048~1.517,P<0.05);ROC曲线显示,NLR预测MACE的曲线下面积为0.793,灵敏度为83.7%,特异度为66.3%,最佳截断值为3.12(95%CI 0.72~0.87,P<0.001)。结论NLR是NSTEMI患者发生MACE的独立危险因素,具有良好的预测价值;该研究暂未发现MHR与NSTEMI患者出现MACE具有相关性。

盐酸纳美芬缺血后处理通过Sirt1/Nrf2/HO-1轴抑制铁死亡途径减轻大鼠肺缺血-再灌注损伤

目的研究纳美芬缺血后处理通过激活Sirt1/Nrf2/HO-1轴抑制铁死亡途径减轻肺缺血-再灌注损伤的作用及其机制。方法将60只大鼠随机均分为假手术组、模型组(I/R)、纳美芬组、纳美芬+EX527组、纳美芬+ML385组、纳美芬+Fe-柠檬酸盐组共6组,每组10只。假手术组大鼠不行缺血再灌注处理,未予药物治疗。I/R组大鼠采用阻断左肺门法建立肺缺血-再灌注模型,未给予药物治疗。纳美芬组大鼠于肺循环再灌注前5 min予尾静脉注射纳美芬(15μg/kg)。纳美芬+EX527组、纳美芬+ML385组、纳美芬+Fe-柠檬酸盐组分别于造模前2 h腹腔注射EX527(5 mg/kg)、ML385(30 mg/kg)、Fe-柠檬酸盐(15 mg/kg),同时在肺循环再灌注前5 min时尾静脉注射纳美芬(15μg/kg)。各组大鼠于再灌注3 h末留取处死后留取左肺上叶组织,检测肺组织湿/干重比值,评估各组大鼠肺组织损伤程度,检测肺组织Fe^(2+)、MDA和TNF-α、IL-6含量、GSH活性以及Sirt1、Nrf2、HO-1、ACSL4、GPX4表达水平。结果与假手术组比较,模型组湿/干重比值、肺组织损伤评分、ACSL4表达水平、Fe^(2+)、TNF-α、IL-6和MDA含量、Sirt1、Nrf2、HO-1信使RNA及蛋白表达水平显著增高(P<0.01),GPX4表达水平及GSH活性显著下降(P<0.01)。与模型组比较,纳美芬组、纳美芬+EX527组湿/干重比值、肺组织损伤评分、ACSL4表达水平、Fe^(2+)、TNF-α、IL-6和MDA含量显著下降(P<0.01),Nrf2、HO-1信使RNA及蛋白表达水平、GPX4表达水平及GSH活性显著增高(P<0.01);其中纳美芬组Sirt1信使RNA及蛋白表达水平显著增高(P<0.01)而纳美芬+EX527组无显著变化(P>0.05)。纳美芬+ML385组湿/干重比值、肺组织损伤评分、TNF-α、IL-6含量显著下降(P<0.01),Sirt1信使RNA及蛋白表达水平显著增高(P<0.01),Nrf2、HO-1信使RNA及蛋白表达水平、ACSL4和GPX4表达水平、Fe^(2+)、MDA含量和GSH活性无显著变化(P>0.05)。纳美芬+Fe-柠檬酸盐组湿/干重比值、肺组织损伤评分、TNF-α、IL-6、MDA含量显著下降(P<0.01);Sirt1、Nrf2、HO-1信使RNA及蛋白表达水平、GSH活性显著增高(P<0.01);Fe^(2+)含量、ACSL4和GPX4表达水平无显著变化(P>0.05)。与纳美芬组比较,纳美芬+EX527组、纳美芬+ML385组、纳美芬+Fe-柠檬酸盐组湿/干重比值、肺组织损伤评分、ACSL4表达水平、Fe^(2+)、TNF-α、IL-6和MDA含量显著增高(P<0.01)、GPX4表达水平及GSH活性显著下降(P<0.01);纳美芬+EX527组Sirt1、Nrf2、HO-1信使RNA及蛋白表达水平显著下降(P<0.01);纳美芬+ML385组Nrf2、HO-1信使RNA及蛋白表达水平显著下降(P<0.01),Sirt1信使RNA及蛋白表达水平无显著变化(P>0.05);纳美芬+Fe-柠檬酸盐组Sirt1、Nrf2、HO-1信使RNA及蛋白表达水平无显著变化(P>0.05)。结论盐酸纳美芬缺血后处理可通过激活Sirt1/Nrf2/HO-1轴抑制铁死亡途径减轻肺缺血-再灌注损伤。

盐酸纳美芬缺血后处理通过AMPK/Nrf2/HO-1途径减轻大鼠肺缺血-再灌注损伤的时效性研究

目的研究纳美芬缺血后处理通过AMPK/Nrf2/HO-1途径减轻肺缺血-再灌注损伤的作用机制及给药时效性。方法将90只大鼠随机(随机数字表法)均分为模型组、纳美芬A、B、C、D、E、F、G组、假手术组共9组,每组10只。模型组大鼠采用阻断左肺门法建立肺缺血-再灌注模型,未予药物治疗。造模后纳美芬A、B、C、D组大鼠分别于肺循环再灌注前5 min、再灌注后10 min、30 min、60 min时予尾静脉注射纳美芬(小剂量组,15μg/kg)。纳美芬E组大鼠于肺循环再灌注后60 min时予尾静脉注射纳美芬(30μg/kg)。纳美芬F、G组大鼠分别于造模前2 h腹腔注射化合物C(20 mg/kg)、ML385(30 mg/kg),同时在肺循环再灌注前5 min时尾静脉注射纳美芬(15μg/kg)。假手术组大鼠不行缺血-再灌注处理,未予药物治疗。各组大鼠于再灌注3 h末处死后均留取左肺上叶组织,通过病理切片观察评估肺组织损伤评分,检测肺组织湿/干重比值,以生化法检测肺组织TNF-α和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,RT-PCR法测定肺组织核因子E2相关因子2((nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2))mRNA、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)mRNA表达水平以及Western blot法检测大鼠肺组织AMP依赖的蛋白激酶(Adenosine 5'-monophosphate(AMP)-activated protein kinase,AMPK)、p-AMPK(磷酸化AMPK)、Nrf2、HO-1表达水平。结果与模型组比较,纳美芬D组湿/干重比值、肺组织损伤评分、p-AMPK、p-AMPK/AMPK、Nrf2mRNA、HO-1mRNA、Nrf2、HO-1表达水平、TNF-α和MDA含量、SOD活性差异均无统计学意义(均P>0.05)。与模型组、纳美芬D组比较,纳美芬E组湿/干重比值、肺组织损伤评分、TNF-α和MDA含量下降,差异有统计学意义(均P<0.01),p-AMPK、p-AMPK/AMPK、Nrf2mRNA、HO-1mRNA、Nrf2、HO-1表达水平、SOD活性增高,差异有统计学意义(均P<0.01)。与模型组比较,纳美芬F组湿/干重比值、肺组织损伤评分、TNF-α和MDA含量下降,差异有统计学意义(均P<0.01),Nrf2mRNA、HO-1mRNA、Nrf2、HO-1表达水平和SOD活性增高,差异有统计学意义(均P<0.01),p-AMPK、p-AMPK/AMPK表达水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。与纳美芬A组比较,纳美芬F组湿/干重比值、肺组织损伤评分、TNF-α和MDA含量增高,差异有统计学意义(均P<0.01),p-AMPK、p-AMPK/AMPK、Nrf2mRNA、HO-1mRNA、Nrf2、HO-1表达水平和SOD活性降低,差异有统计学意义(均P<0.01)。与模型组比较,纳美芬G组湿/干重比值、肺组织损伤评分、TNF-α含量下降,p-AMPK、p-AMPK/AMPK表达水平增高,差异有统计学意义(均P<0.01),Nrf2mRNA、HO-1mRNA、Nrf2、HO-1表达水平、MDA含量、SOD活性差异均无统计学意义(均P>0.05)。与纳美芬A组比较,纳美芬G组湿/干重比值、肺组织损伤评分、TNF-α和MDA含量增高,差异有统计学意义(均P<0.01),p-AMPK、p-AMPK/AMPK表达水平差异均无统计学意义(均P>0.05),Nrf2mRNA、HO-1mRNA、Nrf2、HO-1表达水平和SOD活性降低,差异有统计学意义(均P<0.01)。小剂量(15μg/kg)纳美芬缺血后处理各组在湿/干重比值、肺组织损伤评分、TNF-α和MDA含量方面呈现纳美芬D>纳美芬C>纳美芬B>纳美芬A的特点,在p-AMPK、p-AMPK/AMPK、Nrf2mRNA、HO-1mRNA、Nrf2、HO-1表达水平、SOD活性方面呈现纳美芬A>纳美芬B>纳美芬C>纳美芬D的特点,上述结果差异均存在统计学意义(均P<0.01)。结论盐酸纳美芬缺血后处理可通过AMPK/Nrf2/HO-1通路抑制氧化应激,减轻肺缺血-再灌注损伤,此作用具有时效性特点,超过某一特定有效时间窗口时,纳美芬治疗对肺缺血-再灌注损伤可能无效,增大药物剂量可能改变或延长有效时间窗。

盐酸纳美芬缺血后处理抑制TLR2/MyD88/NF-κB p65炎症信号途径减轻大鼠肺缺血-再灌注损伤作用的研究

目的研究纳美芬缺血后处理减轻肺缺血-再灌注损伤的作用机制,探讨全病程中的最佳药物治疗时机。方法将60只大鼠随机均分为假手术组、模型组,以及纳美芬A、B、C、D组共6组,每组10只。假手术组大鼠不行缺血再灌注处理,未予药物治疗。模型组采用阻断左肺门法建立肺缺血-再灌注模型,未予药物治疗。缺血处理后纳美芬A、B、C、D组分别于肺循环再灌注前5 min、再灌注后10、30、60 min时予尾静脉注射纳美芬(15μg/kg)。全部大鼠于再灌注3 h末处死后留取左肺上叶组织,评估各组大鼠肺组织损伤程度,检测肺组织湿/干重比值、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)mRNA、MyD88 mRNA以及TLR2、MyD88、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65、p-NF-κB p65表达水平。结果模型组和纳美芬A、B、C、D组均可见不同程度的肺泡间隔破坏,肺间质水肿明显、间质内炎症细胞浸润和红细胞渗出,部分肺泡萎陷。在湿/干重比值、肺组织损伤评分、MPO活性和TNF-α、TLR2 mRNA和MyD88 mRNA以及TLR2、MyD88、NF-κB p65、p-NF-κB p65、TNF-α表达水平等方面,模型组各检测值均显著高于假手术组(均P<0.01);纳美芬D组各检测值与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05),纳美芬缺血后处理各组相应检测值呈现纳美芬D组>纳美芬C组>纳美芬B组>纳美芬A组的特点,差异有统计学意义(P<0.01)。结论纳美芬减轻肺缺血-再灌注损伤与抑制TLR2、MyD88、NF-κB p65表达和NF-κB p65磷酸化,减轻炎症反应密切相关,此作用可能存在给药时间-效应性特点。