结核病专科医院结核分枝杆菌环境监测及消毒设备效果分析

目的:了解武汉市肺科医院(武汉市结核病防治所)院区环境中结核分枝杆菌污染情况,并评价不同类别环境消毒设备效果,为优化院区结核病预防控制措施提供参考。方法:根据医院风险等级,在院区高风险区域的44个场所如呼吸与危重症医学科和结核科病房、污物间、留痰室、内镜中心气管镜诊疗室、清洗消毒室等先后进行2次空气和物表采样。利用实时聚合酶链式反应(qPCR)检测样本中结核分枝杆菌基因组特异性片段IS6110及分枝杆菌培养,并分析阳性检出区域的消毒设备类别,评价其消毒效果。结果:分别连续采样7 d和10 d,共采集到55份空气样本和139份物表样本。经qPCR检测,各2份空气样本和物表样本检出结核分枝杆菌,阳性检出率分别为3.64%(2/55)和1.44%(2/139);但分枝杆菌培养均为阴性。qPCR阳性检出区域的消毒设备均为无空气动力的上层紫外线空气消毒灯和普通悬挂式紫外线灯管,阳性检出率[3.25%(4/123)]与有空气动力的环境消毒设备区域检出率[0.00%(0/71)]差异无统计学意义(χ^(2)=1.022,P>0.05)。结论:结核病专科医院院内环境样本中结核分枝杆菌阳性检出率低,未发现环境消毒设备有无空气动力对环境中结核分枝杆菌消杀效果的影响,但仍需加强污染高风险区域的消毒处理及医院感染控制措施的严格落实。

武汉市首次复治涂阳肺结核治疗结局及影响因素分析

目的探讨武汉市首次复治涂阳肺结核患者疗效影响因素，以便有针对性地采取措施提高复治肺结核疗效。方法采用整群抽样法，抽取武汉市2011年7月至2012年3月登记的全部首次复治涂阳患者（共232例）作为研究对象。面访式问卷调查，随访治疗结局。232份调查问卷中，219份合格，合格率94．40%。进行χ2检验及多因素逐步logistic回归分析疗效影响因素。结果219例首次复治涂阳肺结核患者中，治疗成功156例，成功率为71．2％。伴发糖尿病患者治疗成功率为51．2％（21／41），不伴发糖尿病患者治疗成功率为75．8％（135／178），差异有统计学意义（χ2=9．860，P=0．002）；耐药者治疗成功率为55．0％（33／60），不耐药者治疗成功率为73．7％（87／118），差异有统计学意义（χ2=6．351，P=0．012）；耐多药者治疗成功率为26．1％（6／23），非耐多药患者治疗成功率为73．5％（114／155），差异有统计学意义（χ2=20．538，P=0．000）。多因素逐步logistic回归分析显示，耐多药（0R=10．758，95％CI=3．481～33．247）是治疗不成功的危险因素，差异有统计学意义（P〈0．01）；伴发糖尿病（0R=2．838，95％CI：1．187-6．788）及未采用医生督导式管理（0R=1.678，95％CI=1．0872．588）是治疗不成功的危险因素，差异有统计学意义（P值均〈0．05）。结论武汉市首次复治涂阳肺结核患者治疗成功率不高，耐多药、伴发糖尿病及未采用医生督导模式管理是影响复治涂阳肺结核疗效的主要因素。

21例淋巴结瘘型气管支气管结核临床分析

淋巴结瘘型气管支气管结核是由胸内淋巴结结核穿透气管、支气管壁形成的一类较为特殊的气管支气管结核。其临床症状无特异性，影像学也容易误诊、漏诊。国内外对这一疾病的报道较少，并由于延误治疗或治疗不当导致肺不张、气道狭窄、支气管结核播散等并发症，严重者甚至危及患者生命。现就我院2009年6月至2013年6月收治的21例经病理检查确诊的淋巴结瘘型气管支气管结核的临床资料进行回顾性分析，以提高对此疾病的认识及诊治水平。

经支气管镜治疗淋巴结瘘型(Ⅵ型)气管支气管结核的几种方法比较

目的通过临床病例资料分析,评价支气管镜下不同组合方式治疗淋巴结瘘型气管支气管结核(TBTB)的效果,以提出最佳治疗方案。方法选择2009年6月—2012年12月收治的38例淋巴结瘘型TBTB患者,根据介入方式分为3组,A组采用局部注如抗结核药物及活检钳病灶清除术,B组采用局部注如抗结核药物及活检钳病灶清除术及冷冻消融术,C组采用局部注如抗结核药物及冷冻消融术。评价不同介入组合的疗效及并发症,各组间病例资料采用四格表χ2检验。结果 38例患者中治疗12月时治愈25例,治愈率为65.8%(25/38),好转13例,总体有效率100%。A组平均支气管镜介入次数(20±4.0)次,B组平均支气管镜介入次数(12±3.0次),C组平均支气管镜介入次数(11±4.0)次,C组与A组比较差异有统计学意义(P<0.05)。3组出血发生率分别为A组77.0%,B组84.0%,C组60.0%,与A B组比较(P<0.05)。C组患者治疗第2、第6月、12月的治愈率显著高于A B两组(P<0.05)。结论淋巴结瘘型TBTB采用支气管镜下局部注如抗结核药物及冷冻消融术可减少支气管镜介入治疗次数,出血并发症少。

鼻咽结核15例误诊分析

上呼吸道结核病尤其鼻咽部结核临床上罕见,Chopra等报道原发性鼻咽结核的发病率仅占结核病的0.12%。2003—2012年我院收治经活检病理确诊的鼻咽结核病患者15例,其中单纯鼻咽部结核9例,报道如下。

15例鼻咽结核临床分析

目的 分析鼻咽结核患者的临床特点.方法 回顾性分析武汉市医疗救治中心2003 2012年通过病理活检确诊的15例鼻咽结核的临床表现、检查结果、误诊、治疗转归等情况.结果 15例患者中2例有轻微低热、盗汗等全身症状,6例伴有颈部淋巴结肿大,2例以颈部包块为首发症状.PPD试验阳性14例,其中强阳性10例,阴性1例；痰结核分枝杆菌培养阳性1例,阴性14例.15例患者中13例均有不同程度的误诊,误诊为鼻咽癌10例,误诊为鼻咽炎2例,误诊为睡眠呼吸暂停综合征1例.15例患者通过正规、系统的抗结核治疗,临床症状均缓解.结论 鼻咽部结核临床表现缺乏特异性,容易误诊,临床医生要提高认识,尽早、反复送病理检查,争取尽早治疗.

GeneXpert MTB/RIF试验在检测利福平耐药及耐多药结核中的应用评价

目的探讨GeneXpert MTB/RIF试验(简称Xpert)在检测利福平耐药及耐多药结核(MDR-TB)中的应用价值,并对Xpert与比例法利福平药敏结果不一致的原因进行分析。方法选取2014年1月至2016年6月在该院就诊患者所送检的临床标本进行Xpert检测、分枝杆菌培养,培养阳性菌株进行比例法药敏试验。Xpert与分枝杆菌培养均阳性共1 300例。以比例法药敏试验为"金标准",对Xpert检测利福平药敏结果进行分析。对Xpert与比例法检测利福平药敏结果不一致的菌株进行rpoB基因的利福平耐药决定区(RRDR)测序和最小抑菌浓度(MIC)的测定。结果 Xpert检出利福平耐药的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为99.31%、97.82%、92.88和99.80%。在Xpert检出利福平耐药的309例(初治125例,复治184例)患者中,以E、D和B探针突变检出为主,分别占65.70%、14.56%和10.68%;MDR-TB患者占比为77.35%(239/309),在初复治患者中分别占75.20%(94/125)和78.80%(145/184)。在22株比例法敏感而Xpert检出耐药的菌株中,6株在RRDR区未检测到突变;16株在RRDR区检测到突变,以有争议的L511P突变(8例)和L533P突变(4例)为主。在2株比例法耐药而Xpert为敏感的菌株中,1株在RRDR区未检测到突变;1株在RRDR区外存在E546G突变。结论 Xpert试验适用于利福平耐药结核分枝杆菌的快速检测,可用于MDRTB的快速筛查。Xpert与比例法利福平药敏结果不一致主要与低度耐药相关的511、533位点突变有关。

纤维支气管镜灌洗液Xpert MTB/RIF检测对肺结核诊断和利福平耐药菌株筛选的临床价值

目的探讨利福平耐药实时荧光定量核酸扩增(Xpert MTB/RIF)技术对肺结核诊断和利福平耐药菌株筛选的价值。方法选取2014年4月至2015年4月武汉市结核病防治所收治的疑诊为肺结核的患者193例,进行纤维支气管镜(纤支镜)灌洗液抗酸涂片、结核培养以及Xpert MTB/RIF检测,对结果进行分析,以罗氏比例法药物敏感试验作为金标准对RIF耐药情况进行分析。结果193例疑诊肺结核患者中153例确诊和临床诊断为肺结核,其中结核培养阳性61例,结核培养阴性92例,余40例为非结核肺部疾病患者。纤支镜灌洗液抗酸涂片、结核培养和Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌(MTB)诊断肺结核的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及准确度分别为20.3%、39.9%、62.1%;90.0%、95.0%、100.0%;88.6%、96.8%、100.0%;22.8%、29.2%、40.8%;34.7%、51.3%、69.9%。三种检测方法的受试者工作特征曲线曲线下面积分别为0.551、0.674、0.810,显示Xpert MTB/RIF检验诊断效能最大,与结核培养和抗酸涂片比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。92份结核培养阴性标本经Xpert MTB/RIF方法检出MTB 35份,其中循环阈值为中等含量者7份,低含量16份,极低含量12份。Xpert MTB/RIF检测RIF耐药的灵敏度为100.0%(14/14),特异度为93.6%(44/47)。结论 Xpert MTB/RIF技术对结核辅助诊断的临床价值优于抗酸涂片和结核培养,在结核分枝杆菌及其对利福平耐药快速检测方面有良好的应用前景。

微量刃天青显色法快速测定结核分枝杆菌MIC及菌型鉴定

目的用刃天青显色法快速测定结核分枝杆菌(MTB)MIC及菌型初步鉴定,并确定抗结核药物折点浓度。方法用30株国家结核参比实验室熟练度测试质控菌株和64株临床分离菌株为试验菌株,在96孔培养板中,用Middlebrook 7H9液体培养基将抗结核药物进行连续双倍稀释后,加入一定浓度菌液,用刃天青显色法测定MIC。根据罗氏培养基药敏比例法结果,用ROC曲线分析建立显色法药物折点浓度。同时选择24株非结核分枝杆菌(NTM),用对硝基苯甲酸(PNB)进行初步的菌型鉴定。结果刃天青显色药敏试验5种抗结核药物链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇和氧氟沙星的折点浓度分别为1、0.5、0.5、2、2μg/mL,其敏感性分别为100%、97%、97%、88%和100%,特异性分别为100%、100%、100%、91%和100%。在菌型鉴定中,94株MTB在PNB中均未生长,24株NTM均生长。结论刃天青显色法测定MIC具有操作简便、快速、成本低廉和准确的优势,且能进行初步的菌型鉴定,适于结核病专业实验室应用。

结核性胸膜炎患者胸水ADA、TB-DNA联合检测的临床应用

目的为了探索诊断结核性胸膜炎的最佳方法。我室采用的酶法连续监测法检测胸水中A-DA,用PCR方法检测胸水中TB-DNA,经过计算分析发现ADA,TB-DNA联合检测对诊断结核性胸膜炎有较大的诊断价值。方法全自动分析仪连续监测法测定ADA,全自动荧光定量检测TB-DNA。结果ADA、TB-DNA联合检测对诊断结核性胸膜炎的敏感度、特异度、准确度分别是90.2%、86.2%、88.4%。结论联合检测胸水ADA、TB-DNA有助于结核性胸膜炎的诊断和提高临床应用的价值。

老年不典型肺结核支气管肺泡灌洗液检测结果分析

结核病（Tuberculosis,TB）是最常见并可致命的一种传染性疾病,由结核分枝杆菌引起。近年来,由于我国人口流动和HIV感染者的不断增加,其发病率和耐药性逐年递增,临床上不典型肺结核与肺病非常相似,依靠症状、体征及影像学等检查易造成漏诊和误诊,已成为临床诊断难点问题之一。

武汉市耐多药结核分枝杆菌的MIRU-VNTR分子特征

目的描述武汉市耐多药结核分枝杆菌基因型分布及成簇特征。方法选取15个结核分枝杆菌重复序列(mycobacterial interspersed repetitive unit,MIRU),对98株耐多药结核分枝杆菌进行多位点数目可变串联重复序列分析(mycobacterial interspersed repetitive unit-variable number tandem repeat typing,MIRU-VNTR)分型,计算差异遗传值、Hunter-Gaston指数(Hunter-Gaston discriminatory index,HGDI)、成簇率以及近期感染率最小估计值。结果MIRU位点组合的多态性差异遗传值为0.960 4、HGDI为0.970 8,多态性和分辨指数最高的位点为Mtub 21及MIRU 26。共产生7个基因簇和65个独立基因型,成簇率为33.67%,近期感染率最小估计为26.53%。结论 15位点MIRU-VNTR分型法分辨指数较高,适合于武汉地区耐多药结核分枝杆菌的基因分型。尽管武汉市耐多药肺结核病的流行多半归因于内源性复燃,但仍有较高比例的近期传播。

聚合酶链反应检测mecA和mecI及其对葡萄球菌甲氧西林耐药的影响

目的了解葡萄球菌甲氧西林耐药基因mecA和调节基因mecR中的抑制基因mecI在葡萄球菌中的分布,探讨mecA、mecI和β-内酰胺酶对甲氧西林耐药性的影响。方法琼脂稀释法测定158株葡萄球菌苯唑西林MIC;聚合酶链反应检测mecA和mecI;用内切酶TrulⅠ进行mecI酶切分型。结果 158株葡萄球菌中,金黄色葡萄球菌(SA)66株,凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)92株,葡萄球菌对苯唑西林的总耐药率达44.3%(70/158)。158株葡萄球菌中,检出mecA阳性70株,其中SA 8株,CNS 62株。70株mecA阳性葡萄球菌中,检出mecI阳性12株,其中SA7株,CNS 5株;88株mecA阴性葡萄球菌中未检出mecI。对mecA阴性、苯唑西林MIC≥4μg/mL的菌株进行抑制实验后,再测定苯唑西林MIC,抑制后MIC下降8倍以上。结论耐甲氧西林葡萄球菌以mecA为其主要的甲氧西林耐药决定子;β-内酰胺酶和mecI基因对葡萄球菌甲氧西林耐药有一定的影响。

BacT/Alert 3D系统与罗氏培养基分离分枝杆菌的比较

目的评价BacT/Alert 3D系统从临床标本中分离分枝杆菌的价值。方法收集从2004年12月至2005年4月的临床标本共416份,每份标本接种BacT/Alert 3D系统的同时接种两支改良罗氏培养基和涂片作荧光染色。结果416份临床标本中,共分离出144株分枝杆菌,分离率为34.6%。BacT/Alert 3D系统分离130株,分离率为31.3%,罗氏培养基分离出126株,分离率为30.3%。BacT/Alert 3D系统平均阳性报告时间为是19.9 d,罗氏培养基平均阳性报告时间为26.4 d。BacT/Alert 3D系统的污染率为3.6%,罗氏培养培养基的污染率为5.8%。结论BacT/Alert 3D系统和罗氏培养基联合检测有助于提高检出率和降低污染率。

嵌合抗体技术研究进展

综述基因工程抗体中的重要组成部分———嵌合抗体的研究进展。基因工程抗体是第三代抗体,其应用日益受到重视,但是在临床治疗中人抗鼠抗体(HAMA)反应导致鼠源性抗体的应用受到了极大的限制。利用基因工程技术对鼠源性抗体进行改造,保留或增加天然抗体的特异性和主要生物学活性、减少鼠源成分,从而克服鼠源性单克隆抗体在临床应用方面的缺陷。

血清胱抑素C在MDR-TB患者化疗中的临床应用

目的探讨血清胱抑素C(CysC)在耐多药结核(MDR-TB)患者化学治疗中的临床应用。方法对MDR-TB患者按照化疗时间不同分7组检测血清CysC,来判断患者化疗过程中氨基糖甙类注射剂及高尿酸血症对患者肾功能损伤情况,同时将7个组的血清肌酐(Scr)、尿素(Urea)、尿酸(UA)的浓度作为观察指标来测定。结果七组的血清CysC、Scr、UA的差异有显著性意义(P<0.05),血清Urea的差异无显著性意义(P>0.05),但与治疗前组相比血清CysC的浓度的变化较Scr的浓度变化出现早;在MDR-TB患者化疗过程中血清SCr、Urea无一例异常,血清UA在治疗不同时期大多数患者间或或者持续升高,血清CysC有两例在治疗2个月后出现异常,经调减注射剂剂量后恢复正常。结论血清CysC是监测MDR-TB患者化疗过程中早期肾功能损伤更敏感的指标。

刃天青显色法测定氟喹诺酮对结核杆菌的最小抑菌浓度

目的:用刃天青显色法快速测定4种氟喹诺酮对结核分枝杆菌的最小抑菌浓度(MIC),探讨不同氟喹诺酮对结核分枝杆菌的作用和可能的交叉耐药性。方法:用65株对氧氟沙星敏感的菌株(包括42株MDR-TB)和60株氧氟沙星耐药的菌株为试验菌株,在96孔酶标板中,用Middle brook 7H9液体培养基将药物进行连续对倍稀释后,加入一定浓度菌液,用显色法测定MIC。结果:氧氟沙星通过ROC曲线分析所确定的折点浓度为2μg/ml,敏感度为98.3%,特异度为96.9%,准确度为97.6%。加替沙星和莫西沙星对结核分枝杆菌的MIC50和MIC90比氧氟沙星、环丙沙星要低4～8倍,具有比氧氟沙星和环丙沙星更好的抗结核分枝杆菌活性。结论:新一代氟喹诺酮加替沙星和莫西沙星具有比第3代氟喹诺酮氧氟沙星和环丙沙星更低的MIC,更好的抗菌活性,有可能用于低度氧氟沙星耐药MDR-TB的治疗。

湖北地区人群乳腺癌易感基因FGFR2多态性研究

目的:探讨湖北地区人群成纤维细胞生长因子受体-2基因(FGFR2)第2内含子单核苷酸多态性(SNP)与乳腺癌易感性的关系。方法:采用PCR及DNA测序方法,对汉族204例女性乳腺癌患者(乳腺癌组)和192名正常女性(对照组)FGFR2基因第2内含子区的2个多态性位点(rs2981582和rs10510097)进行分析,计算基因型和等位基因频率。结果:汉族人群正常对照组FGFR2基因第2内含子SNP位点rs2981582的C/C、C/T和T/T基因型频率分别为31.82%、54.54%和13.64%,而乳腺癌组分别为34.02%、53.61%和12.37%,其基因型和等位基因频率两组相比差异均无统计学意义,P值均>0.05;另一位点rs10510097正常对照组的C/C、C/T和T/T基因型频率分别为60.00%、33.33%和6.67%,乳腺癌组分别为55.31%、36.87%和7.82%,其基因型和等位基因频率两组相比差异均无统计学意义,P值均>0.05。结论:湖北地区人群FGFR2第2内含子2个多态性位点和乳腺癌并无明显相关性。

598例复治涂阳痰培养和药敏结果分析

目的:通过对598例复治涂阳痰培养和药敏结果分析,了解复治涂阳患者的分枝杆菌的菌种分布及复治患者耐药情况,指导临床医生合理选择抗结核药物和治疗方案。方法:对598例复治涂阳痰培养和药敏数据进行分析。结果:598例复治涂阳痰共分离结核分枝杆菌535株,非结核分枝杆菌29株。结核分枝杆菌复合群对6种抗结核药物的耐药率:链霉素26.9%、异烟肼35%、利福平30.7%、乙胺丁醇15.5%、氧氟沙星12.9%、卡那霉素1.5%;MDR耐药率为23.2%;XDR耐药率为1.1%。结论:复治涂阳患者的耐药率比较高,需根据药敏结果合理选择治疗方案。部分复治涂阳患者为NTM病,应引起临床医生的重视。