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高糖诱导心肌细胞miR-26a/miR-197表达促进细胞凋亡的机制研究 被引量:4
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作者 刘祖霞 张斌 +4 位作者 汪伟 张康林 黄军利 朱小山 杨峰 《中国循证心血管医学杂志》 2019年第5期551-555,共5页
目的探讨miR-26a/miR-197在高糖诱导的心肌细胞表达及对细胞活力和凋亡率的影响。方法 H9c2心肌细胞分为低糖组(LG组)、LG+miRcramble组、高糖(HG)+miRcramble组、HG+miR-26ainhibitor组、HG+miR-197 inhibitor组和HG+miR-26a/miR-197 i... 目的探讨miR-26a/miR-197在高糖诱导的心肌细胞表达及对细胞活力和凋亡率的影响。方法 H9c2心肌细胞分为低糖组(LG组)、LG+miRcramble组、高糖(HG)+miRcramble组、HG+miR-26ainhibitor组、HG+miR-197 inhibitor组和HG+miR-26a/miR-197 inhibitor组,RT-PCR检测细胞中miR-26a和miR-197的表达;MTT法及流式细胞术分别检测细胞活力及凋亡率;Western blotting检测β-catenin、PCNA和Bax的蛋白表达。通过靶基因预测软件、miR-26a/miR-197的mimics/inhibitor转染后的细胞中MCL1表达检测及miR-NC、Wt-MCL1+miR-26a mimics、Wt-MCL1+miR-197 mimics、Mut-MCL1+miR-26a mimics和Mut-MCL1+miR-197 mimics共转染后的荧光素酶活性检测,确定MCL1与miR-26a/miR-197是否存在靶向关系。结果 HG诱导的H9c2心肌细胞miR-26a和miR-197的表达均明显高于LG组,而转染miR-26a/miR-197 inhibitor后miR-26a和miR-197表达均明显低于HG组(P<0.05)。HG+miRcramble组细胞活力及PCNA的蛋白表达均明显低于LG+miRcramble组,细胞凋亡率及β-catenin和Bax的蛋白表达均明显高于LG+miRcramble组(P<0.05),而HG+miR-26a inhibitor组和HG+miR-197 inhibitor组细胞活力及PCNA的蛋白表达均明显高于HG+miRcramble组,低于HG+miR-26a/miR-197 inhibitor组,细胞凋亡率及β-catenin和Bax的蛋白表达均明显低于HG+miRcramble组,高于HG+miR-26a/miR-197 inhibitor组(P<0.05)。MCL1是miR-26a和miR-197的靶基因。结论 miR-26a/miR-197可通过靶向MCL1促进高糖诱导心肌细胞活力和降低细胞凋亡率,机制可能与抑制Wnt信号通路有关。 展开更多
关键词 miR-26a miR-197 心肌细胞 高糖 凋亡 WNT信号通路
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