应用响应面法优化副猪嗜血杆菌冻干保护剂

旨在对副猪嗜血杆菌HS1712冻干保护剂进行优化,提高菌株在冷冻干燥后的存活率。以冻干存活率为评价指标,对配方中甘油、海藻糖、甘露醇、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、牛血清白蛋白(BSA)等5种成分缺失,考察其对副猪嗜血杆菌冻干存活率的影响。在此基础之上,结合单因素变量试验,应用Box-Behnken响应面法对脱脂奶粉、甘油、海藻糖的添加比例进一步优化。结果表明,配方中甘油、海藻糖缺失后,副猪嗜血杆菌冻干存活率显著下降(P<0.05)。通过对Box-Behnken试验结果进行回归模型拟合,得到最佳添加比例为脱脂奶粉6.8%、甘油2.2%、海藻糖2.7%,具体配方成分及添加比例为脱脂奶粉6.8%、甘油2.2%、海藻糖2.7%、PVP 0.5%。使用优化后配方进行冻干验证,副猪嗜血杆菌HS1712平均冻干存活率为79.20%,与预测值(80.87%)无显著性差异(P>0.05),表示模型可靠。上述结果表明,优化后的冻干保护剂可显著提高副猪嗜血杆菌HS1712冷冻干燥后的存活率。