槲皮素抑制磷脂酰肌醇-3激酶／Akt通路的体外抗肿瘤作用研究

目的 研究槲皮素对白血病NB4细胞的抗肿瘤效应和磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）／Akt、bcl-2及Bax在槲皮素诱导NB4细胞凋亡中的作用，探讨其可能的作用机制。方法 采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖活性，Hoechst 33258荧光染色及流式细胞术观察槲皮素对NB4细胞凋亡的影响，Western blot检测槲皮素对NB4细胞相关蛋白的表达变化，激光共聚焦显微技术检测细胞凋亡时Akt的胞核、胞质分布变化。结果 槲皮素（20～160 μmol／L）能明显抑制NB4细胞增殖，具有剂量-时间依赖性。20、40、80 μmol／L槲皮素作用24 h后，其总凋亡率分别为（9.25±0.11）%、（20.83±2.10）%、（41.43±2.90）%，与空白对照组的（2.17±1.12）%比较差异有统计学意义（t值分别为4.14、6.56、7.02，P＜0.05），细胞凋亡呈剂量依赖性并伴随明显的凋亡细胞形态学改变，而槲皮素的凋亡诱导效应可能与其诱导NB4细胞周期阻滞于G2／M期有关。槲皮素对PI3K／Akt表达水平显著降低，导致凋亡抑制因子bc1-2表达受阻，同时Bax表达增加，但对总Akt蛋白没有明显影响，Akt在胞核表达减少，胞质表达增多，与空白对照相比差异具有统计学意义（F＝15.12，P＜0.05）。结论 槲皮素能够通过多条信号途径促进白血病NB4细胞发生凋亡，发挥较强的抗白血病效应，因而PI3K／Akt通道有望成为白血病诊治的新靶标。