范例教学法在医学免疫学实验教学中的运用

以范例教学模式在医学免疫学实验教学中实施运用的教改过程,证实该教改方案可以切实提高医学生的学习积极性和主动性,明确范例教学模式在本科生医学免疫学实验教学中具有的良好作用,证实该教改方案可广泛地在基础医学其他科目的实验教学中推广实施。

提高医学免疫学教学效果探讨

通过"六个相结合"的教学模式,更新教学手段,改革教学方法、优化教学内容、发挥多媒体教学优势,对提高医学免疫学教学效果进行了探讨,收到良好教学效果。

PBL模式在临床医学专业教育中的应用及思考

分析了国内医学院校PBL教学应用模式、特点和存在的问题,并对PBL教学应用条件,包括PBL导师小组的组成及培训、教案的编写、讨论和学习以及考核体系的建立等方面进行阐述,在PBL教学实践中探索适合国内医学院校特点的医学教育模式。

临床免疫学PBL教学改革探讨

临床免疫学是实践性和应用性很强的学科,将PBL教学模式贯穿教学之中,引导学生适应以问题为基础的学习方法,是改善教学效果,全面提升学生综合素质的有效途径。文章阐述了PBL教学的特点和优势,总结了开展教学活动的实践经验,提出采用混合与渐进式相结合的PBL教学方法可起到事半功倍的教学效果。

医学免疫学实验课课程改革的必要性

医学免疫学实验是当代医学和生物学中的前沿学科，然而其五年制的本科卖验教学内容及思路相对弗后，存在一些弊端，不适应当今生物学科快速发展的现状。因此，对医学免疫学实验内容和指导思想进行改革，开设一些实践性、目的性较强的综合性实验，使各个实验内容及操作相五衔接，使学生有一个完整的科学实验思维和思路，受到一次科学实验全过程的训练，提高实验教学效率和效果。

医学免疫学教学改革的参与及思考

医学免疫学是一门基础性很强的学科，其知识点抽象、难懂，难学、难记、难考。而在教学实践过程中提高学生的学习兴趣，体现素质教育是教师和学生共同探讨并期望达到的一个目标。采用让学生参与少量的教学活动，并让学生讲授部分知识点的教学方式，可以激发学生的学习兴趣，锻炼学生的自学及综合运用所学知识的能力从而达到提高教学效果的目标。

人Gal-9基因的克隆及在CHO细胞中的表达

目的:构建β-半乳糖苷结合凝集素-9(Gal-9)的真核表达载体,在CHO细胞中表达,并检测其表达。方法:通过DNA重组技术和PCR方法从人外周血单个核细胞克隆Gal-9基因,插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,通过PCR、酶切及测序鉴定重组载体的正确性;采用脂质体转染技术将重组质粒pGal-9瞬时转染CHO细胞,通过Western blot和RT-PCR方法检测Gal-9的表达,MTT法检测Gal-9对同种异体淋巴细胞增殖的影响。结果:DNA测序和酶切鉴定证明Gal-9基因正确克隆至pcDNA3.1(+)的多克隆位点;以重组质粒pGal-9瞬时转染CHO细胞,通过Western blot和RT-PCR方法,在分子和蛋白水平证实Gal-9的表达,MTT法检测显示,Gal-9明显抑制同种异体淋巴细胞增殖反应,平均抑制率达85.43%。结论:成功构建pGal-9的真核表达载体,证实其在CHO细胞中可以成功表达,并抑制同种异体淋巴细胞增殖反应。

survivin反义寡核苷酸在体外诱导胰癌细胞凋亡

目的:探讨survivin反义核酸对胰腺癌细胞株Panc-1细胞凋亡的影响。方法:用脂质体瞬时转染法介导survivin反义核苷酸处理胰腺癌Panc-1细胞后,MTT试验测定转染细胞的相对存活率,RT-PCR检测survivin mRNA表达,琼脂糖凝胶电泳分析其对Panc-1细胞的凋亡诱导作用。结果:转染survivin反义核酸的Panc-1细胞增殖明显受抑制,与对照进行比较,具有显著性差异(P<0.05);经琼脂糖凝胶电泳,转染survivin反义核酸的Panc-1细胞可见到DNA梯形条带,而对照细胞未见到。结论:survivin反义核酸能够诱导Panc-1细胞凋亡。

Survivin-siRNA在体外诱导Panc-1细胞凋亡的实验研究

目的:探讨RNA干扰技术抑制Survivin对人胰癌细胞株Panc-1细胞凋亡的影响。方法:体外设计、合成针对sur-vivin基因的小分子干扰RNA(survivin-siRNA),应用脂质体介导survivin-siRNA转染Panc-1细胞后,MTT试验测定转染细胞的增殖抑制率,RT-PCR检测细胞survivin mRNA表达,琼脂糖凝胶电泳分析其对Panc-1细胞凋亡诱导作用。结果:转染survivin-siR-NA的Panc-1细胞增殖明显受抑制,与对照进行比较,具有显著性差异(P<0.01);经琼脂糖凝胶电泳,转染survivin-siRNA的Panc-1细胞可见到DNA梯形条带,而对照细胞未见到。结论:survivin-siRNA能够显著诱导Panc-1细胞凋亡。

重组人半乳糖苷结合凝集素-9质粒的构建及表达

目的构建人半乳糖苷结合凝集素-9(Galectin-9)的真核表达质粒pGalectin-9,并检测其表达。方法通过DNA重组技术和PCR方法从人外周血单个核细胞克隆Galectin-9基因,插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,通过PCR、酶切及测序鉴定重组载体的正确性;采用脂质体转染技术将重组质粒pGalectin-9瞬时转染中国仓鼠卵巢(Chinesehamster ovary,CHO)细胞,通过Western blot、RT-PCR和间接免疫荧光方法检测Galectin-9的表达。结果 DNA测序和酶切鉴定证明Galectin-9基因正确克隆至pcDNA3.1(+)的多克隆位点;以重组质粒pGalectin-9瞬时转染CHO细胞,通过Western blot、RT-PCR和间接免疫荧光方法,在分子和细胞水平证实Galectin-9的表达。结论成功构建pGa-lectin-9的重组质粒,并证实其在CHO细胞中可以成功表达。

Survivin特异性siRNA增强人胰癌细胞株Panc-1对顺铂的敏感性

目的探讨Survivin特异性siRNA对人胰癌细胞株Panc-1顺铂敏感性的影响。方法体外将Survivin特异性siRNA表达载体pSurvivin-siRNA转染人胰癌细胞株Panc-1,应用RT-PCR、蛋白印迹法(Western blot)检测转染siRNA后Panc-1细胞Survivin基因和蛋白的表达变化,应用MTT法检测干扰Survivin后Panc-1细胞对顺铂敏感性的变化。结果转染Survivin特异性siRNA后,Panc-1细胞Survivin基因和蛋白的表达水平明显下降;顺铂对Panc-1细胞的半数抑制量从(11.9927±1.1470)μg/ml下降到(1.2382±0.0857)μg/ml,Panc-1细胞对顺铂的敏感性增加了9.69倍。结论Survivin特异性siRNA抑制Survivin表达,能增加人胰癌细胞株Panc-1对顺铂的敏感性。

ASAP3真核表达载体的构建和鉴定

目的:构建ASAP3的真核表达载体并鉴定。方法:通过DNA重组技术和PCR方法从人肝癌细胞株HepG2克隆ASAP3基因,插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,通过PCR、酶切及测序鉴定重组载体的正确性。结果:DNA测序和酶切鉴定证明ASAP3基因正确克隆至pcDNA3.1(+)的多克隆位点。结论:成功构建ASAP3的真核表达载体p ASAP3。

β-半乳糖苷结合凝集素-9真核表达载体的构建和鉴定

目的:构建β-半乳糖苷结合凝集素-9的真核表达载体并鉴定。方法:通过DNA重组技术和PCR方法从人外周血单个核细胞克隆β-半乳糖苷结合凝集素-9基因,插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,通过PCR、酶切及测序鉴定重组载体的正确性。结果:DNA测序和酶切鉴定证明β-半乳糖苷结合凝集素-9基因正确克隆至pcDNA3.1(+)的多克隆位点。结论:成功构建β-半乳糖苷结合凝集素-9的真核表达载体pGal-9。

消退素E1对急性肺损伤小鼠炎症反应的影响

目的观察消退素E1（RvEl）对急性肺损伤（ALI）小鼠炎症反应的影响。方法建立小鼠ALI模型，12h后处死，观察RyEl治疗对肺组织形态、湿／干比、肺泡灌洗液（BALF）肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量、组织匀浆核因子-kB（NF—kB）蛋白水平的影响。结果给予RyEl治疗后，肺组织损伤明显减轻；RvEI治疗组肺湿／干比值（4．637±0．125）g／g、TNF-α含量（217．2±30．1）ng／L较ALI模型对照组肺湿／干比值（4．906±0．176）g／g和TNF—α含量（372．2±20．6）ng／L均明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）；RyEl治疗组肺组织匀浆中NF—kB蛋白表达水平较ALI模型对照组明显下降。结论RvE1能减轻肺部炎症反应，从而减轻肺组织损伤，对ALI具有保护作用。

Survivin特异性siRNA诱导胰腺癌细胞凋亡的研究

目的观察survivin特异性siRNA对胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖和凋亡的影响。方法体外构建Survivin特异性siRNA表达载体p-Survivin-siRNA,转染胰腺癌细胞株Panc-1细胞系,RT-PCR和Western印迹法检验其对胰腺癌细胞株Panc-1细胞的RNA干扰(RNAi)效果。采用MTT法分析其对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测其对细胞周期的影响。同时,采用Western印迹法检测半胱氨蛋白酶3(caspase3)的表达变化。结果p-survivin-siRNA表达质粒高效而特异地剔降胰腺癌细胞株Panc-1细胞中survivin的表达,抑制肿瘤细胞增殖(P<0.01),阻断胰腺癌细胞株Panc-1细胞在G1期。随着survivin基因被沉默,caspase3表达升高(P<0.01)。结论靶向survivin基因的siRNA表达载体可以显著抑制胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖,促进细胞凋亡。