豚鼠心室肌细胞急性分离法中的要则

目的:探讨酶解分离豚鼠心室肌细胞过程中容易忽视的因素及应予重视的要求。方法:采用Lan gendorff灌流,先用无钙液灌流4 - 5min ,再用含胶原酶I 0 . 1g/L、蛋白酶E 0 .0 1g/L、BSA 0 5g/L的无钙液灌流8-10min ,接着用KB液冲洗4 - 5min后剪下心室肌,剪碎,过滤,静置后复钙进行膜片钳实验。结果:通过仔细调整和控制细胞分离过程中的各种问题和影响因素,得到结构完整、长杆状、耐钙的心室肌细胞。结论:积极探索和总结细胞分离过程中的关键问题,可顺利得到适于膜片钳记录的单个心室肌细胞。