在非洲爪蟾卵母细胞上表达大鼠肌肉乙酰胆碱受体的方法学研究

目的 :建立适合于研究肌肉松驰药作用的乙酰胆碱受体的实验模型。方法 :采用磁珠技术从大鼠肌肉中提取多聚腺嘌呤mRNA ,注入去膜的非洲爪蟾卵母细胞 ,表达为有功能的离子通道 ,并与未去膜和去膜未注射的卵母细胞比较 ,利用电压钳方法记录电压依赖性的离子通道电流 ,观察并分析三组电流特性。结果 :三组卵母细胞的静息膜电位和钳制到 - 6 0mV时的补偿电流之间无显著的统计学意义 ,通过去除卵母细胞的卵泡膜可以去除内源性受体的干扰 ,在注射大鼠肌肉mRNA的卵母细胞膜上记录到典型的N2 型ACh受体的电流。结论 :本实验建立的模型可作为在细胞和蛋白水平研究肌松药的方法。

大鼠老化过程中骨骼肌乙酰胆碱受体含量及功能的改变

目的 探讨大鼠老化过程中骨骼肌乙酰胆碱受体的含量及功能变化。方法 RT PCR 半定量法检测青年组、中年组、老年早期组和老年晚期组骨骼肌乙酰胆碱受体ε亚单位的表达。比较组间乙酰胆碱(Ach)引起的电流和维库溴铵作用强度的变化。结果 老年早期组和老年晚期组n AChRε亚单位平均辉度比值进行性下降(与青年组比较),其组间比较有显著性差异(P<0.05)。老年早期和老年晚期组Ach激动AChR的EC50 值明显高于青年组、中年组(P<0.05)。维库溴铵对青年组、中年组和老年早期组的n AChR作用强度无显著差异,但对老年晚期组的n AChR作用强度明显增强(P<0.05)。结论 骨骼肌乙酰胆碱受体数量随年龄的增加而进行性地减少,但其对肌松药的作用强度影响较小。老化的骨骼肌乙酰胆碱受体对Ach失敏感,使维库溴铵的作用明显增强。所以在老年人麻醉中,肌松药的使用应谨慎。