南蛇藤醇介导的PTEN过表达增强顺铂对食管癌细胞的化学敏感性并抑制裸鼠成瘤能力

目的探究南蛇藤醇介导的PTEN过表达对食管癌细胞化学敏感性的影响。方法构建食管癌肿瘤模型小鼠,使用南蛇藤醇(1、5 mg/kg)和顺铂(5 mg/kg)单独或联合对其进行瘤内治疗,观察其肿瘤体积变化和检测30 d时肿瘤质量;免疫组化检测Ki67,VEGF和Caspase 3的表达情况。用不同剂量的南蛇藤醇(0.5、1、2.5、5、10、20、50、80、100μmol/L)处理人食管上皮细胞系(HET-1 A)24 h,CCK8分析检测细胞存活率。顺铂(4μg/m L)预处理EC109/DDP细胞后分别用不同剂量的南蛇藤醇(1、2.5、5μmol/L)处理EC109/DDP细胞,对照组用PBS代替顺铂,CCK8检测细胞存活率;Transwell检测细胞的侵袭情况,Western blot检测细胞中EMT相关蛋白以及凋亡相关蛋白表达情况,Hoechst染色检测细胞凋亡情况。结果南蛇藤醇1 mg/kg和5 mg/kg处理后的食管癌肿瘤模型小鼠体内肿瘤质量和体积均显著降低(P<0.05);PTEN蛋白表达水平显著升高(P<0.05);Ki67,VEGF和Caspase 3阳性细胞数均显著减少(P<0.05)。用南蛇藤醇(1、2.5、5μmol/L)处理后,与对照组比较,EC109细胞存活率和侵袭力均显著降低(P<0.05);Ki67、PCNA、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平显著降低(P<0.05);E-cadherin、cleaved PARP和cleaved caspase 3蛋白表达水平以及细胞凋亡率显著升高(P<0.05);干扰PTEN后细胞存活率以及侵袭力显著升高(P<0.05);凋亡率显著降低(P<0.05)。结论南蛇藤醇介导的PTEN过表达增强顺铂对食管癌细胞EC109生长、侵袭和EMT的抑制作用,促进顺铂诱导的食管癌细胞EC109凋亡,从而增强顺铂对食管癌细胞的化学敏感性。