MFGE8在缺血性脑损伤中表达及对巨噬细胞极化的调控作用

目的探究蛋白质酪氨酸激酶2(MFGE8)在缺血性脑损伤(IBI)中的表达及对巨噬细胞极化的调控作用。方法ELISA检测缺血性脑卒中患者和大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠模型外周血中MFGE8蛋白表达;IF检测MCAO模型MFGE8在脑组织中的定位表达;流式细胞术检测脑组织巨噬细胞极化比例;采用稳转Mfge8的N2a神经元细胞(Mfge8CA)培养上清处理BV-2小胶质细胞,流式细胞术检测巨噬细胞极化比例;免疫印迹检测MFGE8、αv/β3-整合素、FAK、NF-κB、ERK1/2、Jnk1/2、p38、PI3K、AKT、m TOR蛋白表达。结果IBI患者和MCAO模型大鼠外周血中MFGE8含量明显低于对照组(P=0.0446,P=0.0259);MFGE8与神经元细胞标志(Neu N)高度共定位表达;MCAO模型大鼠脑组织中M1型(CD45+F4/80+i NOS+Arginase1-)巨噬细胞比例明显高于对照组(P=0.0004);M2型(CD45+F4/80+i NOS-Arginase1+)巨噬细胞比例明显低于对照组(P<0.0001);Mfge8CA组N2a神经细胞系培养上清处理的BV-2小胶质细胞M1型巨噬细胞比例明显低于野生组(WT,P=0.0230);M2型巨噬细胞比例明显高于WT(P<0.0001);Mfge8CA组BV-2小胶质细胞αv/β3-整合素、FAK、p-P85、P85、p-AKT(Ser473)、p-mTOR(Ser2481)和p-mTOR(Ser2488)蛋白表达明显高于WT组。Mfge8CA组BV-2小胶质细胞p-P65蛋白表达明显低于WT组。结论MFGE8高表达于IBI患者外周血,神经元细胞来源的MFGE8可能通过激活PI3K/AKT/m TOR信号促进BV-2小胶质细胞M2型巨噬细胞极化,并抑制M1型巨噬细胞极化。

饮食护理对溃疡性结肠炎患者营养状况的干预效果分析

目的:探讨饮食护理对溃疡性结肠炎患者营养状况的干预临床效果。方法:将2016年3月到2019年3月到我院治疗的50例溃疡性结肠炎患者作为研究对象,随机分为试验组和对照组,每组25例,对照组采用常规护理方案,而试验组使用常规护理方案的基础上加以饮食护理方案,记录两组溃疡性结肠炎患者经过不同护理后的营养状况(包括患者血清蛋白、血清总蛋白、血白蛋白、血红蛋白)。结果:干预后,试验组患者的营养状况明显优于对照组,并且试验组患者对护理的满意度显著高于对照组,临床效果明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:饮食护理对溃疡性结肠炎患者不仅能够改善患者的营养状况和身体素质,更能提高患者对护理的满意度,值得在临床上推广使用。

蛋白质酪氨酸激酶2通过PI3K/AKT/Gsk3b信号调控Tau磷酸化

目的探究蛋白质酪氨酸激酶2(protein tyrosine kinase,Pyk2)在学习记忆障碍小鼠模型中的表达及对神经元细胞Tau蛋白磷酸化的影响和分子机制。方法免疫组化检测APPswe/PS1ΔE9(APP/PS1)双转基因AD和WT小鼠脑组织Pyk2蛋白表达;免疫印迹检测Pyk2、Tau5、Tau46、CP13、AT180、PHF-1、12E8和AT270蛋白表达;免疫印迹检测SHSY-5Y细胞共转染pcDNA6.2-Pyk2-GFP和pcDNA6.2-hTau(2N4R)-V5质粒24h后Tau5、Tau46、CP13、AT180、PHF-1、12E8和AT270蛋白表达;包装PLOK1-Pyk2 shRNA慢病毒,转染SHSY-5Y细胞构建Pyk2敲低细胞系,转染hTau(2N4R)质粒24h后,Western blot检测Tau5、Tau46、CP13、AT180、PHF-1、12E8、AT270、P110α、P110β、P85α、p-P85α、AKT、p-AKT(Ser473)、p-AKT(Thr308)、Gsk3β和p-Gsk3β(Ser9)蛋白表达。结果与WT组相比,APP/PS1双转基因AD小鼠皮质和海马组织中Pyk2蛋白表达明显增加。海马CA1和CA3功能区Pyk2蛋白表达明显增加。海马DG功能区Pyk2蛋白表达明显减少。与WT组相比,APP/PS1双转基因AD小鼠海马组织中Tau5、Tau46 CP13[Phospho-Tau(Ser202)]、AT180[Phospho-Tau(Thr231)]、PHF-1[Phospho-Tau(Ser396/404)]、12E8[Phospho-Tau(Ser262/356)]和AT270[Phospho-Tau(Thr181)]蛋白表达明显增加。与转染0.6μg Tau-V5相比,共转染0.6μg Tau-V5和0.3μg Pyk2-GFP组的V5、Tau5、Tau46 CP13[Phospho-Tau(Ser202)],AT180[Phospho-Tau(Thr231)]和AT270[Phospho-Tau(Thr181)]蛋白表达没有明显变化。共转染0.6μg Tau-V5和0.3μg Pyk2-GFP组的PHF-1[Phospho-Tau(Ser396/404)]和12E8[Phospho-Tau(Ser262/356)]蛋白表达明显增加。与转染1.0g Tau-V5的WT SHSY-5Y细胞相比,共转染1.0g Tau-V5和Pyk2 KDSHSY-5Y细胞组的V5、Tau5、Tau46、CP13[Phospho-Tau(Ser202)]、AT180[Phospho-Tau(Thr231)]和AT270[Phospho-Tau(Thr181)]蛋白表达没有明显变化。PHF-1[Phospho-Tau(Ser396/404)]和12E8[Phospho-Tau(Ser262/356)]蛋白表达明显减少。与转染1.0g Tau-V5的WT SHSY-5Y细胞相比,共转染1.0g Tau-V5和Pyk2 KD SHSY-5Y细胞组的P110β、P85α、p-AKT(Thr308)、AKT、和GSK3β蛋白表达没有明显变化。p-P85α、P110α、p-AKT(Ser437)和p-GSK3β(Ser9)蛋白表达明显减少。结论Pyk2在雄性APP/PS1双转基因AD小鼠模型中高表达,且Pyk2通过PI3K/AKT/Gsk3b信号调控Tau蛋白PHF-1[Phospho-Tau(Ser396/404)]和12E8[Phospho-Tau(Ser262/356)]磷酸化。

经阴式全子宫切除术后发生盆底功能障碍的危险因素及预测模型构建

目的探讨经阴式全子宫切除术后发生盆底功能障碍性疾病(pelvic floor dysfunction,PFD)的危险因素并构建列线图预测模型。方法选取2019年1月至2021年12月在武汉市汉阳医院进行阴式全子宫切除术治疗的139例患者为研究对象,根据术后12个月患者PFD的发生情况,将患者分为PFD组(n=41)与无PFD组(n=98)。对比两组患者的一般资料,分析影响经阴式全子宫切除术后发生PFD的相关指标;经MedCalc软件对差异具有统计学意义的计量指标进行ROC曲线分析,探讨其对经阴式全子宫切除术后发生PFD的预测价值;经Logistic回归分析影响经阴式全子宫切除术后发生PFD的独立危险因素;R语言软件4.0“rms”包构建经阴式全子宫切除术后发生PFD的列线图预测模型,校正及决策曲线对列线图预测模型进行内部验证及临床预测效能评估。结果两组患者年龄、BMI、吸烟、饮酒、孕产次、分娩方式、人工流产史比较,差异有统计学意义(P<0.05)。年龄、BMI的AUC分别为0.674、0.823,最佳截断值分别为49岁、24.4 kg/m2。年龄、BMI、饮酒、孕产次、分娩方式是影响经阴式全子宫切除术后发生PFD的独立危险因素。列线图预测模型的校正曲线与原始曲线及理想曲线接近,C-index为0.675(95%CI:0.633-0.732),模型拟合度高;列线图预测模型的阈值>0.19,可提供临床净收益,且临床净收益均高于年龄、BMI、饮酒、孕产次、分娩方式。结论本研究基于经阴式全子宫切除术后发生PFD的独立危险因素即年龄、BMI、饮酒、孕产次、分娩方式构建了列线图预测模型,对PFD的发生具有较好的预测价值,有助于临床对PFD高风险患者进行干预,降低PFD的发生率。

AFP、PIVKA-Ⅱ和D-D联合检测在肝细胞癌中的诊断价值

目的探讨甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)、异常凝血酶原(prothrombin induced by vitamin K absence/antagonist-Ⅱ,PIVKA-Ⅱ)和D-二聚体(D-dimer,D-D)联合检测对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的诊断价值。方法本研究为回顾性病例对照研究。比较本院2018-01/2021-01月83例HCC患者、91例肝硬化患者及同期检测的105例健康体检者的AFP、PIVKA-Ⅱ和D-D的检测水平。采用Spearman相关分析方法探讨AFP、PIVKA-Ⅱ和D-D的关系,通过ROC曲线评估3种标志物单项检测和联合检测对HCC患者的诊断效果。结果Spearman相关分析显示,HCC患者中AFP、PIVKA-Ⅱ和D-D三者之不存在显著相关性(P>0.05),是3个独立的指标。与健康对照组和肝硬化组相比,HCC组患者AFP、PIVKA-Ⅱ和D-D的水平显著升高(P<0.01);受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)显示,AFP、PIVKA-Ⅱ和D-D的cutoff值分别为9.61 ng/ml、52.50 mAu/ml和255.50 ng/ml,其中PIVKA-Ⅱ在单项检测中的曲线下面积(area under the curve,AUC)最大,AFP、PIVKA-Ⅱ和D-D三者联合检测的AUC值为0.962(95%CI:0.937~0.988)(P<0.01),大于任意两项联合检测或单项检测,其敏感度、特异度、约登指数、阳性预测值和阴性预测值分别为85.5%、95.6%、81.1%、85.3%和97.5%。结论AFP、PIVKA-Ⅱ和D-D三者联合检测对HCC患者具有重要的临床诊断价值。