血浆cfDNA甲基化联合检测在肝癌诊断中的价值

目的 探讨血浆循环游离DNA(cfDNA)中GNB4、TCF24、Riplet、ACP1和TSPYL5基因甲基化对肝癌诊断的临床价值。方法 利用滑动窗口技术在公共数据库中筛选肝癌和正常组织间的差异甲基化标志物并分析其甲基化水平。从郑州大学第一附属医院收集肝癌、肝硬化组织和健康人白细胞样本,Sanger测序检测筛选出的标志物的甲基化水平,选出敏感度和特异度较好的标志物。收集24例肝癌、23例肝硬化和99例健康人血浆,通过甲基化特异性PCR检测上述标志物单独和组合时对肝癌的诊断性能。结果 5个标志物(GNB4、TCF24、Riplet、ACP1和TSPYL5)在肝癌样本中显著高甲基化。组织测序结果显示除TCF24外,其他标志物在肝硬化组织中的甲基化阴性率均大于80.0%。在血浆样本验证中,GNB4单独诊断肝癌的曲线下面积(AUC)最大,为0.765,敏感度为66.7%,特异度为91.8%。在多基因组合中,GNB4+TSPYL5的诊断性能最佳,AUC值为0.893,敏感度为83.3%,特异度为90.2%。结论 GNB4、Riplet、ACP1和TSPYL5甲基化可用于肝癌诊断,且联合诊断性能优于单一基因。