AIDS患者感染侵袭性真菌的临床特征和危险因素研究

目的探讨艾滋病(AIDS)患者合并侵袭性真菌感染(IFI)的临床特征和危险因素。方法回顾性分析2021年1月至2023年4月在该院就诊的194例AIDS患者,根据是否合并IFI分为IFI组107例,非IFI组87例。分析IFI组的菌种分布,比较两组临床资料,采用Logistic回归分析AIDS患者合并IFI的危险因素,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线,探讨各项指标对AIDS合并IFI的临床预测价值。结果IFI组感染最多的是白念珠菌,占71.05%。IFI组CD4^(+)T淋巴细胞计数和血清清蛋白(ALB)水平明显低于非IFI组(P<0.001)。Logistic回归分析显示,CD4^(+)T淋巴细胞计数降低和血清ALB水平降低是AIDS患者合并IFI的独立危险因素(P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,CD4^(+)T淋巴细胞计数和血清ALB单独和联合预测AIDS患者合并IFI的曲线下面积(AUC)分别为0.954(95%CI:0.925~0.984)、0.890(95%CI:0.844~0.935)和0.960(95%CI:0.935~0.986)。结论CD4^(+)T淋巴细胞计数降低和血清ALB水平降低是AIDS患者合并IFI的独立危险因素,临床应该关注高危患者,并及时进行干预治疗。

外周血IFN-γ、IL-10水平及红细胞免疫功能对重症肺结核患者死亡预后的预测价值

目的探究外周血干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)水平及红细胞免疫功能对重症肺结核患者死亡预后的预测价值。方法回顾性分析2017年6月到2019年6月我院收治的102例重症肺结核患者,按照治疗结果分为生存组(n=71)和死亡组(n=31),比较两组患者临床资料,分析IFN-γ、IL-10、红细胞免疫C3受体(RBC-C3bR)和红细胞免疫复合物(RBC-ICR)水平对患者死亡不良的预测价值。结果生存组血清IFN-γ、IFN-γ/IL-10、RBC-C3bR高于死亡组,IL-10、RBC-ICR低于死亡组,差异具有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示, IL-10、RBC-ICR与APACHEⅡ评分呈正相关(r=0.392、0.333,P<0.05),IFN-γ、IFN-γ/IL-10、RBC-C3bR与APACHEⅡ评分呈负相关(r=-0.328、-0.352、-0.417,P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,IFN-γ/IL-10、RBC-ICR、RBC-C3bR与重症肺结核患者预后死亡具有相关性(P<0.05);绘制IFN-γ/IL-10、RBC-ICR、RBC-C3bR预测患者预后死亡的ROC曲线,其AUC分别为0.802、0.713、0.671,联合检测的AUC为0.923。结论外周血IFN-γ、IL-10水平表达异常和红细胞免疫功能不足与重症肺结核患者病情严重程度呈正相关,对患者死亡预后具有一定的预测价值。

GeneXpert MTB/RIF、MGIT960液体培养法在胸腔积液结核分枝杆菌检测中的应用

目的探讨GeneXpert MTB/RIF、MGIT960液体培养法在胸腔积液结核分枝杆菌检测中的应用。方法回顾性分析386例疑似和确诊结核病患者胸腔积液标本中腺苷脱氨酶(ADA)、GeneXpert MTB/RIF及MGIT960液体培养法的检测结果。以胸腔积液ADA>40 U/L作为鉴别结核性积液的标准,将标本分为3组:第1组为非结核性积液(ADA≤40 U/L,219例),第2组为结核性积液(ADA>40 U/L,145例),第3组为脓性胸腔积液(不能进行ADA检测,22例)。结果在386例患者中,GeneXpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌复合群的阳性率为15.54%(60/386),MGIT960液体培养法检测结核分枝杆菌复合群的阳性率为5.44%(21/386),前者检测阳性率明显高于后者(χ^(2)=14.52,P<0.05)。3组中,GeneXpert MTB/RIF检测阳性率分别为3.20%、24.83%和77.27%;MGIT960液体培养法检测阳性率分别为2.74%、8.28%和13.64%。GeneXpert MTB/RIF在结核性积液、脓性胸腔积液中检测结核分枝杆菌复合群的阳性率明显高于MGIT960液体培养法(χ^(2)=14.38、17.97,P<0.05)。将采用MGIT960液体培养法检测为阳性的标本21例进行GeneXpert MTB/RIF检测发现,两种方法检测阳性结果的符合率为52.38%(11/21)。结论GeneXpert MTB/RIF检出结核分枝杆菌复合群的阳性率明显高于MGIT960液体培养法,特别是在结核性积液和脓性胸腔积液中。两种方法联合检测,有助于临床对结核性胸膜炎的早期诊断和治疗。

miRNA-155靶向Wnt5a调控转录激活子3信号通路在支气管哮喘发生发展中的作用

目的 miRNA-155在支气管哮喘中的作用及其机制研究较少,文章拟探讨miRNA-155通过靶向Wnt5a调控转录激活子3(STAT3)信号通路在大鼠支气管哮喘发生发展中的作用。方法将SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、阴性对照组和miRNA-155表达抑制组,每组12只,正常对照组大鼠腹腔注射等渗盐水,阴性对照组大鼠在支气管哮喘模型建立后转染NC拮抗物;miRNA-155表达抑制组大鼠在支气管哮喘模型建立后转染miRNA-155拮抗物;分别于转染后7 d麻醉处死,采用HE染色法观察肺组织损伤情况;采用qRT-PCR法检测各组大鼠肺组织miRNA-155、Wnt5a mRNA表达水平;采用双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-155与Wnt5a的靶向关系;采用Western blot法检测各组大鼠肺组织Wnt5a、STAT3、p-STAT3的蛋白表达水平;采用ELISA法分别检测肺组织匀浆IL-6、TNF-α表达水平。结果与正常对照组比较,阴性对照组大鼠肺功能指标FVC、FEV1及PEF均降低而FEV1/FVC升高(P<0.05),且miRNA-155表达水平升高,Wnt5a基因mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05);与阴性对照组相比,miRNA-155表达抑制组大鼠肺功能均有不同程度的提高(P<0.05),miRNA-155表达水平降低(P<0.05),Wnt5a基因mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验分析结果显示,miRNA-155和Wnt5a能够靶向结合;与正常对照组大鼠肺组织STAT3、p-STAT3的蛋白表达水平[(0.20±0.05)、(0.22±0.05)]相比,阴性对照组[(1.35±0.05)和(1.11±0.05)]和miRNA-155表达抑制组大鼠[(1.01±0.06)、(0.52±0.07)]均升高(P<0.05),miRNA-155表达抑制组大鼠肺组织STAT3、p-STAT3蛋白表达水平较阴性对照组降低(P<0.05);与正常对照组大鼠肺组织IL-6、TNF-α表达水平[(95.92±8.78)、(88.99±8.12)pg/mL]相比,阴性对照组[(206.11±18.63)、(177.54±13.12)pg/mL]和miRNA-155表达抑制组[(156.17±9.55)、(131.94±9.25)pg/mL]均升高(P<0.05);与阴性对照组相比,miRNA-155表达抑制组大鼠肺组织IL-6、TNF-α表达水平降低(P<0.05)。结论 miRNA-155通过靶向Wnt5a激活STAT3信号通路促进支气管哮喘的发生发展。

3种方法联合检测在诊断结核性胸膜炎中的应用价值

目的探讨胸腔积液患者结核分枝杆菌/利福平耐药基因检测(Xpert MTB/RIF)、胸腔积液腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)/血清ADA检测和外周血结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染T细胞斑点试验(T-SPOT. TB)联合检测在诊断结核性胸膜炎中的应用价值。方法以2017年1-12月在我院就诊的120例结核性胸膜炎患者为研究对象,设为观察组,同时纳入同期在我院就诊的120例非结核性胸膜炎胸腔积液患者,设为对照组。分别进行胸腔积液Xpert MTB/RIF检测、胸腔积液ADA/血清ADA检测、外周血T-SPOT. TB检测和联合检测,分别比较单项检测、两两联合检测和三项联合检测的应用价值。结果观察组胸腔积液Xpert MTB/RIF、胸腔积液ADA/血清ADA检测、外周血T-SPOT. TB、两两联合和三项联合检测的阳性率分别为58. 33%、75. 83%、78. 33%、80. 00%、83. 33%、81. 67%、92. 50%;三项联合检测的灵敏度显著高于单项检测和两两联合检测,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论胸腔积液Xpert MTB/RIF、胸腔积液ADA/血清ADA检测以及外周血T-SPOT. TB三项联合检测能显著提高灵敏度,并伴有较高的阴性预测值和诊断准确率,可防止漏诊,对结核性胸膜炎有重要的辅助诊断价值。

下调miR-20a靶向负调控ZNF259抑制肺癌H322细胞侵袭迁移并诱导凋亡

目的探讨miR-20a对肺癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响和机制。方法Realtime PCR方法分别检测miR-20a在正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺癌细胞A549、Spc-A1、H322中的表达变化。在肺癌H322细胞中转染miR-20a inhibitor,四甲基偶氮唑蓝(MTT)测定增殖,流式细胞仪检测凋亡,Transwell小室检测侵袭和迁移,Western印迹检测ZNF259、C-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、基质金属蛋白酶(MMP)-2、C-Caspase-9、MMP-9蛋白表达变化。靶基因预测软件预测ZNF259可能为miR-20a的靶基因,利用双荧光素酶活性系统鉴定靶向关系。在肺癌细胞中共转染miR-20a inhibitor、ZNF259 siRNA,同样使用上述方法测定细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力变化,评估ZNF259 siRNA对下调miR-20a调控肺癌细胞的影响。结果肺癌细胞A549、Spc-A1、H322中miR-20a的表达水平明显高于正常肺上皮细胞BEAS-2B,且H322细胞中miR-20a的表达水平最高。miR-20a inhibitor能够下调肺癌细胞中miR-20a的表达水平,降低细胞增殖、迁移和侵袭能力,诱导细胞凋亡,促进细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白表达,减少细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达。荧光素酶活性鉴定结果显示,ZNF259为miR-20a的靶基因,且下调miR-20a提高肺癌细胞中ZNF259蛋白表达水平。ZNF259 siRNA可以逆转下调miR-20a后的肺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡变化。结论下调miR-20a靶向负调控ZNF259抑制肺癌细胞增殖、迁移、侵袭并诱导细胞凋亡。

血清sTREM-1、sTim3、cullin4A与肺结核患者肺部受累情况的相关性

目的研究血清可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)、可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(sTim-3)、泛素连接酶4A(cullin4A)在反映4MRZE化疗方案的疗效及肺结核患者肺部受累情况中的价值。方法将2018年1月至2021年1月武汉市金银潭医院及赤壁市人民医院收治的265例肺结核患者根据治疗方案的不同分为采用2H3R3Z3E3/4H3R3标准四联疗法方案治疗的对照组(n=97)、4MRZE超短程化疗方案治疗的4MRZE组(n=88)和2HRZE/4HR方案治疗的2HRZE/4HR组(n=80)。比较3组治疗后临床疗效,以及治疗前和治疗2、4个月血清sTREM-1、sTim3、cullin4A水平变化,分析血清sTREM-1、sTim3、cullin4A在反映肺结核患者肺部受累情况中的价值。结果4MRZE组、2HRZE/4HR组治疗2、4个月时的痰菌转阴率及病灶有效吸收率均高于对照组(P<0.05),且4MRZE组高于2HRZE/4HR组(P<0.05);在治疗过程中,3组患者血清sTREM-1、sTim3呈下降趋势,而cullin4A mRNA呈上升趋势,且4MRZE组患者治疗2、4个月的血清sTREM-1、sTim3显著低于2HRZE/4HR组、对照组(P<0.05),而cullin4A mRNA显著高于2HRZE/4HR组、对照组(P<0.05)。但是治疗完成后,3组痰菌转阴率、病灶有效吸收率,以及血清sTREM-1、sTim3水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论4MRZE化疗方案在肺结核治疗中具备治疗周期短的同时保证治疗效果良好的优点。血清sTREM-1、sTim3、cullin4A水平在反映痰菌转阴及病灶有效吸收中具有一定价值。

Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌及其耐药性在结核病辅助诊断中的临床价值分析

目的综合分析Xpert MTB（结核分歧杆菌）/RIF检测结核分枝杆菌及其耐药性在结核病辅助诊断中的临床价值。方法 选取本院（在2013年7月至2014年7月）收治的160例结核病患者作为研究对象，以TB法作为试验参考标准，进行Xpert MTB/RIF实验法。 结果 TB法阳性标本例数为150例，Xpert MTB/RIF实验法阳性标本例数为155例，两组阳性标本诊断率比较无统计学意义（ P 〉0.05）,Xpert MTB/RIF实验法灵敏度为90.00%（144/160）、特异度为71.88%（115/160）。 结论 Xpert MTB（结核分歧杆菌）/RIF检测结核分枝杆菌及其耐药性在结核病辅助诊断中的临床价值有较高一致性。

黏液卡红复染在诊断艾滋病合并隐球菌脑膜炎中的应用

目的探讨黏液卡红复染在诊断艾滋病合并隐球菌脑膜炎(cryptococcal meningitis,CM)中的应用价值。方法采用黏液卡红复染法检测75例艾滋病脑脊液细胞涂片,分析黏液卡红复染法、真菌培养、墨汁染色和隐球菌荚膜抗原检测四种检查方法诊断CM的敏感性和特异性。结果脑脊液细胞涂片黏液卡红复染背景干净,隐球菌荚膜呈红色,同脱落细胞和其他微生物易鉴别。脑脊液黏液卡红复染法、真菌培养和墨汁染色诊断CM的敏感性分别为94.4%、77.8%和11.1%;特异性均为100%。其中65例的脑脊液隐球菌荚膜抗原检测敏感性为96.2%,特异性为100%。黏液卡红复染法与真菌培养和隐球菌荚膜抗原检测相比,差异无统计学意义(P>0.05);同墨汁染色相比,差异有统计学意义(P<0.005)。结论脑脊液细胞涂片黏液卡红复染法诊断艾滋病合并CM具有高敏感性和特异性,为临床提供微生物诊断依据。

2016-2018年武汉地区手足口病病原学和流行病学调查

目的:对2016年1月-2018年5月武汉地区手足口病进行持续性病原学和流行病学调查,为本地区手足口病的预防、控制和治疗提供科学依据。方法:采集手足口病患儿咽拭子标本,同时收集患儿的病例信息,运用实时荧光定量方法完成临床样本的检测,结合病例信息对患儿进行病原学和流行病学综合分析及统计。结果:研究期间共收集手足口病咽拭子标本6 802例,实时荧光定量方法检测肠道病毒阳性5 683例,阳性率为83. 5%(5 383/6 802);其中CVA6阳性2 215例,阳性率为32. 6%(2 215/6 802);EV71阳性1 925例,阳性率为28. 3%(1 925/6 802);CVA16阳性691例,阳性率为10. 2%(691/6 802);CVA10阳性570例,阳性率为8. 4%(570/6 802);另282份检测为其它肠道病毒阳性,阳性率为4. 1%(282/6 802)。统计分析发现:病例收集期间武汉地区手足口病发病的高峰期为5-6月,而在气温最低1-2月发病人数最少;在所有手足口病患儿中,1～3岁儿童最多,且在1～6岁之间,随年龄增长患儿人数均呈递减趋势;男女比例均为2∶1左右;患儿以散居儿童为主。结论:2016年1月-2018年5月武汉地区主要流行的病原体是CVA6和EV71,其次是CVA16和CVA10。本研究首次发现本地区出现CVA6和CVA10的持续性流行。

Notch通路与Th1/Th2细胞在结核分枝杆菌感染过程中的调节机制

目的探讨Notch通路与Th1/Th2细胞在肺结核患者结核分枝杆菌感染过程中的调节机制。方法选择2021年5月-2023年1月武汉市金银潭医院收治的128例肺结核患者设为疾病组,并选取同期医院收治的诊断的60例结核菌素试验阴性患者为正常组;采集两组受试者未治疗前的空腹外周血,使用人淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMCs),采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法测定Notch1和Jagged2的mRNA表达,流式细胞术测定Th1/Th2细胞;将疾病组分离的PBMCs接种在96孔板中,设置γ-分泌酶抑制剂(DAPT)不同浓度组(0、2.5、5.0、10.0和20.0μmol/L),流式细胞术测定Th1/Th2细胞,Western blot法测定不同DAPT浓度组Notch1和Jagged2蛋白表达。结果疾病组PBMCs中Notch1 mRNA和Jagged2 mRNA分别为19.73±3.42、21.13±4.05高于正常组(P<0.05);疾病组PBMCs中Th1、Th2占比为(3.89±1.13)%、(3.99±1.28)%高于正常组,正常组Th1/Th2为0.97±0.28低于疾病组(P<0.05);不同DAPT浓度组Th1占比差异无统计学意义;随着DAPT浓度增加,Th2占比逐渐降低,Th1/Th2比值逐渐增加(P<0.05);Notch1蛋白和Jagged2蛋白水平降低(P<0.05)。结论肺结核患者中Notch通路蛋白异常高表达,Th1/Th2比例失衡;应用DAPT下调Notch通路表达可拮抗Notch1和Jagged2蛋白表达,并可纠正Th1/Th2比例。

InnowaveDX MTB/RIF对结核分枝杆菌复合群及利福平耐药检测性能评估

目的评估结核分枝杆菌(MTB)和利福平耐药突变检测试剂盒(InnowaveDX MTB/RIF,简称InnowaveDX)检测痰液对MTB复合群及利福平耐药的诊断价值。方法前瞻性连续纳入2020年6月19日至2022年5月16日湖南省结核病防治所、河南省传染病医院和武汉市金银潭医院就诊的具有结核病体征的患者1328例,依据纳入及排除标准,最终纳入1035例肺结核患者(确诊患者357例,临床诊断患者678例)和180例非结核患者。收集所有患者的痰液样本,进行常规痰涂片、痰培养、药敏试验,并评价Xpert?MTB/RIF(简称Xpert)和InnowaveDX对肺结核和利福平耐药的诊断价值。对肺结核的诊断分别以临床诊断和MTB培养结果为参考标准,对利福平耐药的评价分别以表型药敏试验和Xpert为参考标准,分析两种检测方法对结核病诊断和利福平耐药的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。两种检测技术的一致性分析行kappa检验。结果以临床诊断为参考标准,InnowaveDX对1035例临床诊断肺结核患者检测敏感度[58.0%(600/1035)]高于Xpert[51.7%(535/1035)],差异有统计学意义(P<0.001)。对270例培养阳性且鉴定为MTB复合群的肺结核患者,InnowaveDX和Xpert阳性率均高,分别为99.6%(269/270)和98.2%(265/270),差异无统计学意义;而在培养阴性的肺结核患者中,InnowaveDX检测敏感度为38.8%(198/511),明显高于Xpert(29.4%,150/511),差异有统计学意义(P<0.001)。以表型药敏试验结果为金标准,InnowaveDX对利福平耐药的敏感度为99.0%(95%CI:94.7%~100.0%),特异度为94.0%(95%CI:88.5%~97.4%)。以Xpert为金标准,InnowaveDX对利福平耐药敏感度为97.1%(95%CI:93.4%~99.1%),特异度为99.7%(95%CI:98.4%~100.0%),两种检测方法一致性kappa值为0.97(P<0.001)。结论InnowaveDX检测MTB复合群敏感度较高,尤其表现在结核病临床诊断和痰培养阴性肺结核患者。在利福平耐药检测方面,分别以表型药敏试验和Xpert结果为参考标准,InnowaveDX均显示了较高的利福平耐药检测敏感度,与Xpert的一致性高。InnowaveDX检测具有敏感度高和检测周期短的特点,可有效提升结核病病原学阳性率和预测耐药性,尤其适用于在中低收入国家推广应用。

肛拭子阳性在COVID-19患者中的临床价值分析

目的探究肛拭子阳性患者临床特征及其价值。方法选取104例COVID-19确诊患者,在入院时采集咽拭子、痰液、血液和肛拭子检测2019-nCoV核酸;依据不同标本核酸阴阳性分组比较临床特征和血液学指标;选取15例肛拭子核酸阳性患者追踪分析其不同标本核酸转阴时间。结果与肛拭子阴性患者相比,阳性患者具有较低的淋巴细胞(LYM)和较高的乳酸脱氢酶(LDH)及超敏C反应蛋白(HsCRP),且重症比例更高。咽拭子阳性患者HsCRP、IL-6和重症比例亦显著高于阴性患者。痰液阴阳性患者间血液学指标和重症比例差异无统计学意义。血液阳性比例仅为1.92%,但均为重症患者;痰液阳性率最高为46.15%。咽拭子和肛拭子均阳性患者LYM显著下降,而HsCRP、IL-6和危重比例均显著增高。追踪结果显示肛拭子和痰液转阴时间较长,警惕痰液复阳现象。结论肛拭子阳性患者具有更低的LYM和更高的炎症水平及重症比例,提示其可能成为预测重症发生的因素。且转阴时间长于咽拭子,联合咽拭子和肛拭子检测有助于预测重症发生。

人类冠状病毒功能性细胞受体

病毒感染宿主细胞需要与其表面的受体结合。受体是影响宿主范围和种间传播的重要因素。2019年12月在湖北武汉暴发流行的不明原因肺炎,其病原体为一种新型冠状病毒,WHO将其命名为2019新型冠状病毒(2019-nCoV),研究发现血管紧张素转换酶2(ACE2)为2019-nCoV的受体。本文对已知人类冠状病毒受体及其应用作简要综述,以期为2019-nCoV的溯源、跨物种传播、流行病学分析以及抗病毒药物和疫苗的研究提供参考。

128例RhD阴性献血者DEL表型筛查与基因型分析

目的:分析武汉地区RhD阴性献血者中DEL表型的分布及RhD基因情况。方法:血清学直接凝集法检测D、C、c、E、e抗原,间接抗人球蛋白试验(IAT)确认RhD阴性血型,对IAT确认为RhD抗原阴性的样本采用吸收放散方法从中筛选DEL型;应用PCR-SSP技术检测DEL献血者RhD基因型。结果:血型血清学试验初筛为RhD阴性的128例献血者标本中,IAT试验检出阳性9例,经鉴定为D变异型;剩余119例样本中吸收放散结果阳性31例,确定为DEL型。119例RhD阴性献血者中68例ccee,39例Ccee,5例CCee,5例ccEe和2例CcEe。128例样本检出DEL型31例,占比为24.22%,表型分布为Ccee 23例,CCee 5例,ccEe 2例,CcEe 1例;送检的DEL型标本第9外显子均有1227G>A突变,其中杂合子24例(DEL/d),纯合子7例(DEL/DEL)。结论:武汉地区DEL型献血者表型分布与其他地区相似,RhD 1227A是武汉地区DEL表型个体的重要遗传标记。

2例HIV抗体免疫印迹法确证阴性结果分析

目的:通过对我院2例艾滋病病毒(HIV)抗体免疫印迹试验(Western Blot)确证阴性结果分析,探讨Western Blot漏检原因,提高HIV确证实验室报告质量。方法:2例病人血标本筛查使用第4代化学发光微粒子免疫法(CMIA)试剂检测,复检使用两种不同厂家第4代酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂检测,补充实验分别进行HIV抗体Western Blot和HIV-1核糖核酸(RNA)定量检测,同时进行CD4^(+)T淋巴细胞计数,并结合临床表现,对2例样本结果进行分析。结果:2例样本筛查和复检均有反应,但Western Blot确证结果均为阴性。2例样本病毒载量(VL)分别为36097 CPs/mL和4339470 CPs/mL,CD4^(+)T淋巴细胞计数值分别为54个/μL和612个/μL。结论:对于筛查和复检均有反应而Western Blot确证阴性的病例,不仅要考虑"窗口期",还应考虑"艾滋病(AIDS)期",应结合筛查、复检、HIV-1 RNA检测、CD4^(+)T淋巴细胞计数等结果及临床表现,做到早确证、早治疗,防止漏诊。

病毒特异性抗体检测在新型冠状病毒肺炎诊断中的应用价值

目的:探讨新型冠状病毒(2019-nCoV,或SARS-CoV-2))血清特异性抗体在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)诊断中的应用价值。方法:收集236例COVID-19确诊患者和79例疑似患者的血清,采用免疫层析法检测各组2019-nCoV总抗体、IgM和IgG抗体,实时荧光定量PCR方法检测2019-nCoV核酸。结果:在236例COVID-19确诊病例中,两种检测试剂的阳性率分别为86.02%(203/236)和84.32%(199/236);在79例疑似病例中,两种试剂的阳性率分别为78.48%(62/79)和70.89%(56/79)。两种试剂检测特异性抗体的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别为86.02%和84.32%,96.61%和96.61%,99.02%和99.00%,63.33%和60.64%,88.14%和86.78%,统计学分析表明,两种试剂的检测效能无明显差异(P>0.05)。COVID-19确诊组IgM、IgG的阳性率分别为73.31%(173/236)和85.59%(202/236),COVID-19疑似组IgM、IgG的阳性率分别为12.66%(10/79)和65.82%(52/79),两组IgM阳性率相比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:检测2019-nCoV抗体对COVID-19的诊断有重要价值,特别是IgM抗体阳性对于核酸检测阴性的疑似COVID-19病例的确诊具有重要意义。

抗酸染色、Xpert MTB/RIF与T-SPOT.TB联合检测在结核病诊断中的应用价值

目的:探讨抗酸染色、Xpert MTB/RIF或T-SPOT.TB单独以及联合使用在结核病诊断中的临床应用价值。方法:回顾分析2017年1月至2019年12月在武汉市金银潭医院住院的19410例患者的抗酸染色、Xpert MTB/RIF和T-SPOT.TB的实验室检测结果,分析3种检测方法单独和(或)联合检测对结核病的诊断价值。结果:将研究对象分为3组,确诊结核病组1299例,临床诊断肺结核组8624例,健康对照组45例。确诊结核病患者在使用3种方式单独进行结核病检测时,抗酸染色的阳性检出率(62.4%)与Xpert MTB/RIF(86.7%)或T-SPOT.TB(98.0%)检测相比差异有统计学意义(χ^(2)=195.7和χ^(2)=57.4,均P<0.01)。抗酸染色、Xpert MTB/RIF以及二者联合检测的灵敏度分别为63.2%、86.7%和89.6%,二者联合检测的灵敏度与抗酸染色相比差异有统计学意义(χ^(2)=816.2,P<0.01)。抗酸染色、T-SPOT.TB以及二者联合检测的灵敏度分别为58.7%、98.0%和98.7%,二者联合检测灵敏度和特异度与抗酸染色相比差异有统计学意义(χ^(2)=141.7和χ^(2)=5.6,P<0.01和P=0.018)。对于抗酸染色阴性(涂阴)的结核病患者,Xpert MTB/RIF、T-SPOT.TB检测的灵敏度分别为71.6%和96.7%,两者灵敏度差异有统计学意义(χ^(2)=34.0,P<0.01)。结论:在结核病诊断中,Xpert MTB/RIF或T-SPOT.TB检测灵敏度明显高于抗酸染色。采用Xpert MTB/RIF或T-SPOT.TB联合抗酸染色均可显著提高结核病诊断的灵敏度,特别是对于涂阴结核病患者,联合T-SPOT.TB检测可显著提高检测效能。

荧光熔解曲线法和GeneXpert MTB/RIF技术对结核分枝杆菌复合群和利福平耐药检测结果的比较

目的:比较荧光熔解曲线法和GeneXpert MTB/RIF技术对不同类型样本结核分枝杆菌复合群和利福平耐药性的检测结果,旨在为临床不同类型样本如何选择试验方法提供参考,以提高检出率。方法:收集2019年8月—2020年7月收治的疑似和确诊结核病患者的临床资料和实验室数据,回顾性分析荧光熔解曲线法和GeneXpert MTB/RIF技术检测结核分枝杆菌复合群和利福平耐药情况。结果:荧光熔解曲线法共检测样本937例,检出结核分枝杆菌复合群282例,阳性率30.10%(282/937);其中呼吸道样本、术后标本阳性率分别为29.07%(252/867)、57.69%(30/52),其他类型样本未检测出阳性。GeneXpert MTB/RIF共检测样本3807例,检出结核分枝杆菌复合群1315例,阳性率34.54%(1315/3807);其中呼吸道样本、术后标本、胸水、腹水、脑脊液、其他体液、24 h尿沉渣以及粪阳性率分别为36.05%(1099/2799)、75.09%(202/269)、14.34%(71/495)、9.62%(5/52)、10.87%(15/138)、22.22%(4/18)、29.63%(8/27)和11.11%(1/9)。GeneXpert MTB/RIF技术检测结核分枝杆菌复合群的阳性率明显高于荧光熔解曲线法(χ^(2)=6.655,P=0.010),其中,呼吸道样本、术后标本的检出率明显高于其他样本类型(χ^(2)=29.584,P<0.01;χ^(2)=6.584,P=0.017)。133例患者同时进行了荧光熔解曲线法、GeneXpert MTB/RIF技术和结核菌培养及表型药敏试验,结果表明表型药敏检测利福平敏感率为68.42%(91/133)、利福平耐药率为31.58%(42/133);荧光熔解曲线法检测结果为利福平敏感率为63.91%(85/133)、利福平耐药率为30.83%(41/133);GeneXpert MTB/RIF技术检测结果为利福平敏感率为66.92%(89/133)、利福平耐药率为31.58%(42/133);2种分子药敏检测结果与表型药敏检测结果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:GeneXpert MTB/RIF技术对于临床不同类型的样本结核分枝杆菌复合群的检出率明显优于荧光熔解曲线法,但2种方法检测利福平耐药得到的结果与表型药敏无差异。特别是GeneXpert MTB/RIF技术,因其操作高度自动化,对结核分枝杆菌复合群的检出率较高,更加适合结核患者病原学快速诊断的需求。

T细胞斑点试验在儿童结核病诊断中的应用价值

目的:探讨外周血结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染T细胞斑点试验(TSPOT.TB)在儿童结核病诊断中的应用价值。方法:选取2015-08—2018-02在武汉市金银潭医院收治并确诊的70例结核病患儿为观察组,随机选取同期在儿童医院就诊的70例非结核病患儿为对照组。对入组患儿分别做T-SPOT.TB、结核分枝杆菌/利福平耐药基因检测(Xpert MTB/RIF)、MTB蛋白芯片、结核抗体(MTBAb)、荧光染色法和液体快速培养法检测,比较各项检测的应用价值。结果:观察组6种检测方法阳性率分别为58.57%、41.43%、30.00%、30.00%、12.86%、27.14%。T-SPOT.TB阳性率高于其他5种方法,差异有统计学意义(P<0.05)。T-SPOT.TB在肺内结核和肺外结核中检出的阳性率分别为63.41%和51.72%,差异无统计学意义(P>0.05),均高于其他方法。结论:T-SPOT.TB采用外周血标本容易留取,能显著提高灵敏度,有较高的特异度、阳性预测值、阴性预测值和诊断准确率,在肺内结核和肺外结核检测中均有较高的阳性率,有利于早期诊断和治疗并可防止漏诊,对儿童结核病的诊断具有重要的辅助诊断价值。