基于神经网络的方法预测生物活性介质网络调控矽肺纤维化的研究

目的:探讨矽肺纤维化同生物活性介质之间的关系。方法:利用Delphi语言编制了BP人工神经网络模型计算机程序,建立并分析了矽肺胶原纤维预测的数学模型。结果:选定网络隐含层节点为9,初始权值阈值约为(-0.2,0.2),最大相对误差为4%,最小相对误差为0.2%。结论:应用神经网络具有较好的预测效果,可为临床医学研究提供一个很好的研究思路。

雌激素受体亚型对乳腺癌MCF-7细胞生长及微环境中Th平衡的影响

目的:研究雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型对人乳腺癌细胞MCF-7的生长及Th1/Th2类细胞因子分泌的影响。方法:采用RNA干扰技术沉默MCF-7细胞中ERα或ERβ的表达,获得ERα/ERβ不同表达状态的MCF-7细胞。应用MTT法、流式细胞术、RT-PCR法分别检测MCF-7细胞的增殖、细胞周期和凋亡抑制基因的表达,ELISA法检测细胞上清中IFN-γ和IL-4的分泌水平。结果:经RNA干扰后MCF-7细胞的ERα或ERβ蛋白表达水平分别下降了(77.7±3.3)%和(68.3±2.1)%。与对照组相比,ERα基因沉默后,MCF-7细胞生长减慢(P<0.05),受阻于G0～G1期,凋亡抑制基因XIAP的表达水平降低为对照组的(43.0±2.0)%,IFN-γ分泌水平增加至对照组的(1.89±0.34)倍;ERβ基因沉默促进MCF-7细胞的生长(P<0.05),S期细胞比例增加,凋亡抑制基因Bcl-2、Bcl-xl、XIAP的表达水平分别升高至对照组的(1.28±0.21)、(1.61±0.32)和(1.65±0.29)倍,IFN-γ分泌水平降低为对照组的(28.0±4.0)%。结论:ER亚型的表达状态可影响MCF-7细胞的生长,并通过调节IFN-γ的自分泌水平诱导微环境发生Th偏移。

某职业人群体格发育及能量、蛋白质、脂肪来源构成分析

【目的】分析某特殊职业人群体格发育状况及膳食能量、蛋白质、脂肪结构现状。【方法】选择某4个（A、B、C、D）伙食单位344人于8月初进行调查,膳食调查采用连续3天称重法测定蛋白质、脂肪、能量的摄入情况,能量消耗采用跟踪观察和个人记录相结合的方法,体格发育测量根据文献采用统一方法测定体脂率、皮脂厚度、体质指数、上臂肌围。【结果】（1）受调查的4单位每人每日能量消耗为17.04-19.01 MJ,均为极重劳动强度;每人每日能量摄入量为14.06-22.29 MJ,除A单位和D单位能量摄入高于能量消耗外,其他两个单位均低于能量消耗。能量来源于脂肪和蛋白质分别占33%-41%和16%-18%,明显高于标准,碳水化合物占43%-49%,明显低于标准。每人每日蛋白质摄入量为147.72-213.46 g,脂肪摄入量为132.58-243.65 g;植物性脂肪占33.68%-58.70%,除D单位达标外,其他单位均不能达标。（2）体格测量结果显示,251名受检者中,体质指数异常者25人,占受检人数的7.76%。【结论】被调查人群食物结构欠合理,动物性食物提供的脂肪增加,脂肪提供的能量较高。

矽肺诊断的早期生物标志物研究概况

矽肺是由于在生产过程中长期吸入大量游离二氧化硅粉尘而引起的以硅结节的形成和肺组织弥漫纤维化为主要病理改变的职业病。矽肺是中国法定职业病。目前对矽肺病人和暴露人群尚无有效的早期诊断(筛检)和有效的健康监护方法,一经传统的胸片确诊,病人肺部纤维化进程已无药物可逆转。因此寻找用于矽肺早期诊断和肺纤维化进程评价的生物标志物已成为矽肺病研究中迫切需要解决的问题。本文主要综述了近几年发现的一些生物标志物。

青蒿琥酯对迟发型超敏反应小鼠脾脏T淋巴细胞的免疫调节作用

背景:青蒿琥酯是青蒿素低毒、高效的衍生物,具有免疫调节功能,但其具体机制仍需研究阐明。目的:初步探讨青蒿琥酯对迟发型超敏反应小鼠脾脏T淋巴细胞的免疫调节作用。方法:建立迟发型超敏反应小鼠模型,40只小鼠随机数字表法均分正常对照组、青蒿琥酯干预组、p-38 MAPK抑制剂组、基质对照组进行实验观察。T淋巴细胞转化实验检测小鼠T淋巴细胞增殖水平;Western blot方法检测p38丝裂酶原激活蛋白激酶(p38 MAPK)蛋白的活性表达。结果与结论:局部给药后青蒿琥酯明显减轻迟发型超敏反应小鼠耳肿胀、降低脾指数、抑制刀豆蛋白A诱导的T淋巴细胞增殖;同时减弱p38MAPK的磷酸化活性表达。提示青蒿琥酯可以有效抑制小鼠迟发型超敏反应,其作用途径可能与抑制p38MAPK信号通路有关。

骨质疏松与动脉硬化性血管病相关机制的研究

动脉硬化及相关血管疾病和骨质疏松随年龄增长发病率升高，是影响老年人群健康的重要疾病。成人心血管系统是机体第二大最易矿化组织，随年龄增长钙丢失，而血管中钙沉积增加。女性冠状动脉和男、女性腹主动脉钙化评分增加与骨密度降低相关。

骨质疏松及维生素D与动脉硬化性心血管病

动脉硬化性血管病和骨质疏松是老年人群高发疾病。逐渐增加的证据显示，两者间存在密切关系。维生素D（Vi—taminD，VitD）是两者相互关联的重要中介。VitD具有开环甾分子结构，几乎所有类型细胞均有VitD受体，VitD通过弥散或与受体结合的方式进入细胞内，不但参与机体钙、

层次分析法对人禽流感流行控制措施的风险评估研究

目的探讨人禽流感的流行控制措施及其风险评估。方法应用层次分析法构建人禽流感流行控制措施指标体系,利用Matalab、SPSS 15.0软件进行统计分析。结果人禽流感控制措施层次结构评估指标体系是合理的,其综合权重系数大小依次为隔离、消毒、动物灭活、制度措施、控制流动、疫苗、定点收治、穿防护衣和带口罩、高温加热、药物、锻炼、食补。结论人禽流感各控制措施中首先是隔离、消毒和疫苗防制,而药物、食补、锻炼对疾病的症状有一定的改善作用,但对防制人禽流感的流行作用甚微。

家兔血清蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立

背景:家兔血清是基础研究中常用的实验样品,双向凝胶电泳是蛋白质组学中最经典的蛋白分离技术,因此建立稳定的家兔血清蛋白质组双向凝胶电泳技术体系非常重要。目的:建立家兔血清蛋白分离的双向凝胶电泳技术体系。设计、时间及地点:单一样本观察,实验于2008-06/07在武警医学院天津市职业与环境危害生物标志物重点实验室完成。材料:健康家兔6只,由唐山市职业技术学院动物中心提供。方法:去除高丰度蛋白前后的健康家兔血清样品,分别加入水化上样液使样品中的蛋白充分裂解,还原烷基化后上样,被动水化14h。等电聚焦电泳后进行SDS-PAGE电泳。凝胶银染后用PDQuest7.4软件进行分析。主要观察指标:①高丰度蛋白去除效率。②2-DE图谱。结果:双向电泳图谱清晰,分辨率高,重复性好。未去除高丰度蛋白的血清2-DE图效果优于去除高丰度蛋白后的血清2-DE图。结论:成功建立家兔血清蛋白质双向凝胶电泳技术,将为进一步开展疾病的血清蛋白质组学研究奠定基础。

触珠蛋白在家兔肠系膜上动脉闭塞性休克前后血清差异表达的研究

目的:探讨家兔肠系膜上动脉闭塞性(SMAO)休克前后血清蛋白质组学变化及触珠蛋白的差异表达情况。方法:应用家兔肠系膜上动脉夹闭法复制家兔SMAO休克模型,在此基础上通过双向电泳-质谱-生物信息学方法分析鉴定SMAO休克前后血清中的差异蛋白,并应用Western blot和Elisa对血清触珠蛋白在SMAO休克前后血清中的差异表达情况进行验证。结果:在家兔SMAO休克前后血清双向电泳图谱中发现19个差异蛋白点,其中11个蛋白质点只见于SMAO休克后血清双向电泳图中;8个蛋白质点明显见于SMAO休克前的血清双向电泳图中。鉴定并验证了触珠蛋白在SMAO休克后血清中含量增高。结论:家兔SMAO休克后血清触珠蛋白含量增高,可能参与了SMAO休克后机体的代偿调节。

胚胎大鼠神经干细胞双向凝胶电泳方法的建立

背景:神经干细胞是当今研究热点,双向电泳是蛋白质组学研究的技术基础,有必要建立稳定的神经干细胞蛋白质组双向凝胶电泳技术体系。目的:通过对神经干细胞双向凝胶电泳几个关键步骤的分析,建立稳定、重复性好的神经干细胞双向凝胶电泳的分离方法。方法:采用无血清体外细胞培养方法,培养胚胎大鼠神经干细胞并进行鉴定。提取样品蛋白并裂解,被动水化,采用不同IEF 参数,使用 PDQuest8.0 软件对图谱进行分析和比较。观察不同等点聚焦参数下双向电泳图谱质量,蛋白质点的数目及重复性。结果与结论:不同 IEF 参数条件下的双向电泳图谱的质量有所不同,增加低电压的除盐步骤有助于去除电泳胶图上的横纹。在 80 000 Vh 聚焦总能量下,获得较理想的电泳图。通过选用适当的 IEF 参数,建立了适当的神经干细胞双向凝胶电泳方法。

雌激素受体亚型对人乳腺癌细胞株MCF-7生物学特性的影响

目的构建雌激素受体（ER）亚型ERα/ERβ不同表达状态的人乳腺癌细胞株MCF-7,观察其生物学特性。方法采用RNA干扰技术沉默ERα或ERβ基因表达,获得不同ERα或ERβ表达状态的MCF-7细胞株。运用MTT法、流式细胞术、RT-PCR法、双层软琼脂集落形成实验和体外细胞黏附实验方法检测细胞增殖、凋亡、体外成瘤和黏附能力。结果 构建稳定表达ERαlow/ERβhigh或ERαhigh/ERβlow的MCF-7细胞株。ERα基因沉默后,细胞生长减慢,受阻于G0~G1期,细胞凋亡增加,体外成瘤能力和黏附能力减弱;ERβ基因沉默后,细胞生长加快,S期细胞比例增加,细胞凋亡受到抑制,体外成瘤能力增强,而黏附特性无变化。结论 ERα基因沉默可抑制肿瘤的形成;而ERβ基因沉默可促进肿瘤生长、侵袭和转移。调节ERα/ERβ表达状态可能会成为一种有效的乳腺癌治疗手段。

家兔肠系膜上动脉闭塞性休克前后的血清比较蛋白质组学初步研究

目的:探讨家兔肠系膜上动脉闭塞性(SMAO)休克前后血清蛋白质组学变化及其在SMAO休克发生中的作用。方法:应用家兔肠系膜上动脉夹闭法复制家兔SMAO休克模型,在此基础上通过双向电泳分离家兔SMAO休克前后血清中的蛋白,找出凝胶上的差异蛋白点,用基质辅助激光解吸/电离串联飞行时间质谱技术进行鉴定,并通过生物信息学对差异蛋白的功能进行分析。结果:在家兔SMAO休克前后血清双向电泳图谱中发现19个差异蛋白点,其中11个蛋白质点在SMAO休克后血清中表达明显上调;8个蛋白质点在SMAO休克后血清中表达明显下调。从中选取4个差异最明显的点经基质辅助激光解吸/电离串联飞行和数据库搜索共鉴定出符合条件的2个差异蛋白点,为对氧磷酶和触珠蛋白,均在SMAO休克后血清中含量增高。结论:家兔SMAO休克前后血清蛋白质组会发生明显变化,对氧磷酶和触珠蛋白可能参与了SMAO休克后机体的代偿调节。

应力性骨折的血清蛋白质组学分析

目的采用双向电泳-串联飞行质谱技术分析应力性骨折(SF)患者的血清蛋白质组变化,筛选可用于SF早期诊断的生物标志物。方法 SF组和正常对照组血清样本均为混合血清,各由21例平均年龄为19岁的SF战士和正常对照战士的血清分别混合而成。血清样本去除高丰度蛋白后进行双向凝胶电泳(2-DE),比较两组血清蛋白质谱图,寻找差异蛋白点。采用基质辅助激光解吸串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)技术,结合生物学软件和数据库检索对差异蛋白点进行鉴定。结果初步筛选出7个差异蛋白点,经质谱鉴定得到6种蛋白质,分别与新陈代谢、维持正常渗透压、免疫应答及氧化反应相关。在SF组中,对氧磷酶1、白蛋白对碘氧基苯甲醚CRA_h、血清白蛋白前体、白蛋白、甲状腺素结合前白蛋白表达量减少(P<0.05),而血红素结合蛋白前体表达量增加(P<0.05)。结论基于凝胶电泳的蛋白质组学分析可发现与SF相关的血清生物标志物;机体的免疫应答及氧化反应系统可能参与了SF的发生发展。

高效液相色谱法测定不同产地蕨麻中蕨麻苷含量

【目的】采用反相高效液相色谱法测定不同产地蕨麻中蕨麻苷的含量。【方法】色谱柱为ODS柱,流动相为乙腈:水:磷酸=52.5:47.5:0.2,检测波长208 nm。【结果】蕨麻苷峰面积与其进样浓度在10～100μg/ml范围内呈良好的线性关系,回归方程为A=15837C-3339,r=0.9998,n=5);平均回收率为98.17%(n=5,RSD=1.71%)。【结论】本法准确,简单,灵敏度高,可用药材的质量控制。不同产地蕨麻中以西藏产药材中蕨麻苷含量最高。

应用meta分析方法研究肺纤维化TNF-α时空变化规律

【目的】探讨肺纤维化与TNF-α的时空变化规律。【方法】检索Cochrane图书馆、MEDLINE、CBM-disc等数据库,纳入18篇TNF-α与博来霉素诱导的肺纤维化文章进行meta分析。【结果】肺组织、肺巨噬细胞、血清内部各组总效应Z值(P值)分别为5.20(0.00001)、2.22(0.03)、0.91(0.36)。肺组织第1、3、7、14、21、28天总效应Z值(P值)分别为0.03(0.98)、3.85(0.0001)、5.18(0.00001)、5.37(0.00001)、2.39(0.02)、5.20(0.00001)。【结论】肺组织中TNF-α表达明显,血清中表达不明显,造模后第14天为肺纤维化TNF-α变化的明显拐点。

双向电泳分析叶酸对神经干细胞蛋白表达的影响

目的:探讨叶酸缺乏对胚胎大鼠神经干细胞(NSCs)蛋白质表达的影响。方法:采用无血清体外细胞培养方法,培养胚胎大鼠NSCs并进行鉴定,采用叶酸缺乏培养基培养NSCs,根据叶酸添加终浓度将细胞分为对照(Con?trol)组、叶酸缺乏(Folate-D)组、叶酸补充(Folate-L)组,各组叶酸终浓度分别为4、0.6、8mg/L。应用双向电泳(2-DE)技术分析各组蛋白质表达的差异。结果:建立了稳定可重复的NSCs2-DE图谱,与Control组相比,Folate-D组2个蛋白点表达量降低,4个蛋白点表达量升高;Folate-L组2个蛋白点表达量降低,1个蛋白点表达量升高。结论:叶酸缺乏或补充叶酸影响NSCs蛋白表达,差异蛋白分离为进一步研究叶酸对NSCs增殖分化调控机制奠定了基础。

血清比较蛋白质组学在SARS及并发症中的应用

蛋白质组学技术是研究疾病相关蛋白质的重要手段。血清以其在临床疾病研究中的独特性、重要性成为研究者最为感兴趣的研究材料之一,寻找疾病血清中特异蛋白质的比较蛋白质组学,以此发现血清中的特异标志物是蛋白质组学研究的新思路。本文就血清比较蛋白质组学技术在SARS及并发症中的应用作一综述。

矽肺比较蛋白质组学研究中生物样本的选择原则

蛋白质组学是在人类基因组计划研究发展的基础上形成的新兴学科，是一门集中研究蛋白质的学科。比较蛋白质组学是指通过对比一个生物系统2个不同状态的蛋白质表达水平，如比较不同的组织细胞，不同的生长发育阶段，不同生理病理状态下蛋白质的组成（包括种类、含量及修饰加工等）及其差异，明确蛋白质的功能，为进一步研究提供线索。