ZFP580基因过表达对大鼠骨髓源性内皮祖细胞分化的影响

【目的】内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)参与血管内皮修复及血管新生,EPCs分化受多种转录因子调控网络的影响,本实验旨在研究新型C2H2锌指蛋白基因ZFP580对EPCs分化作用的影响。【方法】密度梯度离心法,分离培养大鼠骨髓源性EPCs,免疫荧光染色鉴定EPCs;腺病毒转染过表达ZFP580的EPCs,QPCR及Western blotting检测ZFP580对EPCs分化的影响。【结果】细胞培养至7 d时,Dil-ac LDL/FITC-UEA-I双阳性细胞约占87.39%±2.98%。证实所培养细胞为EPCs。腺病毒转染技术获得过表达ZFP580的EPCs,ZFP580基因过表达促进成熟内皮表型CD31和v WF的表达。【结论】ZFP580基因过表达促进EPCs向成熟血管内皮细胞分化,提示ZFP580基因在EPCs分化过程中起重要的调控作用。

siRNA腺病毒载体沉默ZFP580基因对EPCs介导的血管生成的影响

【目的】研究siRNA腺病毒载体沉默ZFP580基因对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)介导的血管生成的影响,初步探讨锌指转录因子ZFP580基因在血管生成中的生物学效应。【方法】分离培养并鉴定大鼠骨髓源性EPCs;ZFP580-siRNA腺病毒表达载体转染EPCs;QPCR及Western blotting检测EPCs中ZFP580基因的表达;应用体外血管生成实验,检测ZFP580基因对EPCs介导的血管生成能力的影响。【结果】分离的EPCs培养至7 d时,免疫荧光示CD31、VEGFR-2表达阳性,CD45表达阴性,证实所分离培养的细胞是EPCs。ZFP580基因低表达可显著抑制体外血管生成。【结论】siRNA腺病毒载体沉默ZFP580基因可抑制EPCs介导的血管生成,转录因子ZFP580对内皮祖细胞的分化及血管生成过程中起着重要的调控作用。