蕨麻正丁醇提取物对急性卵巢缺血再灌注损伤大鼠肿瘤坏死因子-α的影响

目的探讨蕨麻正丁醇(Pa)提取物对卵巢缺血再灌注损伤大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法 60只Wistar大鼠随机分为对照组(C组)、缺血24 h组(I24 h组)、缺血+再灌注24 h组(R24 h组)、缺血+再灌注48 h组(R48 h组)、Pa提取物预处理+缺血再灌注24 h组(Pa+R24 h组)和Pa提取物预处理+缺血再灌注48 h组(Pa+R48 h组),每组10只。放射免疫法检测各组大鼠血清TNF-α水平;反转录聚合酶链反应、蛋白质印迹法检测各组大鼠卵巢组织中TNF-αmRNA和蛋白的表达水平。结果与C组比较,I24 h组、R24 h组、R48 h组大鼠血清TNF-α水平、卵巢组织TNF-αmRNA和蛋白水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与I24 h组比较,R24 h组、R48 h组大鼠血清TNF-α水平、卵巢组织TNF-αmRNA和蛋白表达水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);Pa干预后,Pa+R24 h组和Pa+R48 h组大鼠血清TNF-α水平、卵巢组织TNF-αmRNA和蛋白表达水平与R24 h组、R48 h组比较明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TNF-α在大鼠卵巢缺血再灌注损伤过程中表达上调,用Pa提取物进行干预可降低TNF-α的表达水平。

天麻素对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清内皮素-1水平的影响

目的探讨天麻素对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清中内皮素-1(ET-1)水平的影响。方法 Wistar大鼠50只随机分为5组:假手术组、模型组、天麻素低剂量组、天麻素中剂量组、天麻素高剂量组,每组10只。假手术组大鼠开胸不结扎冠状动脉前降支;模型组大鼠开胸结扎前降支;天麻素低、中、高剂量组大鼠开胸结扎冠状动脉前降支,术前给予相应剂量的天麻素,经舌下静脉给药。放射免疫法测量ET-1血清学水平;反转录-聚合酶链反应、蛋白质免疫印迹法检测各组大鼠心肌组织中ET-1的表达情况。结果与假手术组比较,模型组及天麻素低、中、高剂量组大鼠血清ET-1水平、心肌组织ET-1 mRNA及蛋白水平显著升高(P<0.05);天麻素低、中、高剂量组大鼠血清ET-1水平、心肌组织ET-1 mRNA及蛋白水平均较模型组显著降低(P<0.05),且天麻素剂量越高其水平降低越明显(P<0.05)。结论天麻素进行干预后可有效降低心肌缺血再灌注损伤后内皮素-1表达。

蕨麻正丁醇提取物对卵巢缺血再灌注损伤大鼠内皮素-1的影响

目的探讨蕨麻正丁醇(Pa)对急性卵巢缺血再灌注损伤大鼠血清及卵巢组织中内皮素-1(ET-1)的影响。方法 Wistar雌性大鼠60只,随机分为6组:假手术组(C组)、缺血24 h组(I24h)、缺血再灌注24 h组(R24h组)、缺血再灌注48 h组(R48h组)、给予Pa提取物预处理+缺血再灌注24 h组(Pa+R24h组)和Pa提取物预处理+缺血再灌注48 h组(Pa+R48h组)。酶联免疫吸附试验测定法检测各组血清ET-1水平;反转录聚合酶链反应、Western blot法检测各组大鼠卵巢组织中ET-1 mRNA和蛋白的表达。结果与C组比较,I24h组、R24h组和R48h组大鼠血清ET-1水平、卵巢组织中ET-1 mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.05);与I24h组比较,R24h组、R48h组大鼠血清ET-1水平、卵巢组织中ET-1 mRNA和蛋白表达均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。而Pa+R24h组和Pa+R48h组大鼠血清ET-1水平、卵巢组织中ET-1 mRNA和蛋白表达与R24h组、R48h组比较显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ET-1在大鼠卵巢缺血再灌注损伤过程中表达上调,Pa提取物进行干预可降低ET-1的表达。

胃癌形成过程中端粒酶反转录酶基因表达及启动子甲基化状态分析

目的探索端粒酶反转录酶(hTERT)基因表达情况及启动子区甲基化状态在胃癌形成过程中的变化情况。方法提取正常胃黏膜、胃癌前病变和胃癌3组组织样本的基因组DNA。用聚合酶链反应(PCR)特异性扩增其hTERT基因,用琼脂糖凝胶电泳检测3组组织样本中hTERT基因表达的阳性率;用亚硫酸氢盐修饰上述各组标本DNA,然后检测修饰后的hTERT序列:启动子区CpG位点,未发生甲基化的胞嘧啶(C)变为尿嘧啶(U);在启动子区不含CpG位点的位置,进行引物设计,然后利用PCR进行扩增。扩增产物序列与原序列比对,观察启动子区甲基化情况。结果 hTERT基因在胃癌组表达的阳性率最高,在癌前病变组表达的阳性率明显降低,而在正常胃黏膜组中不表达,3组组织样本hTERT表达阳性率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。hTERT启动子区甲基化程度在胃癌组中最高,在胃癌前病变组中明显降低,而在正常胃黏膜中甲基化程度最低,3组组织样本hTERT启动子区甲基化程度比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 hTERT启动子区甲基化程度在正常胃黏膜、胃癌前病变和胃癌中依次升高,故hTERT启动子区甲基化程度的变化可作为胃癌形成过程中肿瘤早期诊断的潜在分子生物学标志。

颅脑创伤后海马区钾-氯协同转运蛋白-2、γ-氨基丁酸的表达变化及亚低温治疗对其影响

目的探讨脑创伤(TBI)大鼠钾-氯协同转运蛋白2(KCC2)和γ-氨基丁酸(GABA)的表达变化及亚低温治疗对其影响。方法将30只Wistar大鼠随机分为对照组(C组)、创伤组(TBI组,给予液压冲击,不做处理)和治疗组(T组,液压冲击后接受亚低温治疗,32℃),亚低温干预在创伤后即刻给予32℃低温处理持续6 h。高效液相色谱法测定GABA水平,酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清KCC2水平;反转录-聚合酶链反应、Western blotting检测各组大鼠脑组织中KCC2 mRNA和蛋白的表达。结果与C组比较,T组、TBI组大鼠血清KCC2水平、脑组织KCC2蛋白及mRNA表达均显著降低(P<0.05);T组大鼠血清KCC2水平较TBI组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);GABA变化趋势与KCC2相反。结论 KCC2在大鼠脑创伤过程中表达降低,亚低温进行干预可上调KCC2的表达、下调GABA表达。

姜黄素对急性心肌梗死大鼠血管内皮生长因子及肿瘤坏死因子-α的影响

目的探讨姜黄素对急性心肌梗死大鼠冠状动脉血管内皮生长因子(VEGF)和心肌组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法将36只Sprague Dawley大鼠随机分为对照组、模型组和姜黄素治疗组,每组12只。模型组和姜黄素治疗组大鼠使用缝扎线结扎冠状动脉前降支制备心肌梗死模型,对照组大鼠冠状动脉前降支下穿线不结扎。各组大鼠均于术前6 d进行灌胃,其中对照组、模型组大鼠于术前6 d给予生理盐水灌胃,每次4 m L,每日1次;姜黄素治疗组大鼠将姜黄素按150 mg·kg-1溶于4 m L体积分数6%的乙醇聚乙二醇400中进行灌胃,每日1次,连续5 d;于术后第6天处死大鼠并取结扎线以下的冠状动脉和心肌组织,反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组大鼠心肌组织中TNF-αmRNA表达水平,Western blot检测各组大鼠心肌组织中TNF-α蛋白表达水平,免疫组织化学法检测冠状动脉VEGF表达水平。结果模型组大鼠心肌组织中TNF-αmRNA和TNF-α蛋白表达水平均显著高于对照组(P<0.05);姜黄素治疗组大鼠心肌组织中TNF-αmRNA和TNF-α蛋白表达水平与模型组比较均显著降低(P<0.05),而与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组和姜黄素治疗组大鼠结扎线以下冠状动脉组织中VEGF表达水平较对照组显著升高(P<0.05,P<0.01);姜黄素治疗组大鼠结扎线以下冠状动脉组织中VEGF表达水平较模型组明显升高(P<0.01)。结论姜黄素可有效降低急性心肌梗死大鼠缺血损伤区域心肌组织中TNF-α的表达,并有效提高结扎线以下冠状动脉VEGF的表达,对受损心肌功能的恢复及维持冠状动脉血管内皮功能稳定和血管再生具有积极意义。

脑缺血再灌注损伤大鼠降钙素基因相关肽水平的变化及蕨麻正丁醇提取物对其保护作用

目的探讨蕨麻(Pa)正丁醇提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 Wistar大鼠60只,采用随机数字表法分为6组,即假手术组(C组)、缺血组(I组)、缺血再灌注1 h组(R1h组)、缺血再灌注2 h组(R2h组)、Pa正丁醇提取物预处理后缺血再灌注1 h组(Pa+R1h组)及Pa正丁醇提取物预处理后缺血再灌注2 h组(Pa+R2h组)。放射免疫法测量各组血清内皮素-1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)水平;反转录-聚合酶链反应(RTPCR)、Western blot检测各组脑组织中CGRP mRNA和蛋白的表达。结果与C组比较,I组、R1h组、R2h组血清ET-1水平升高(P<0.05),血清CGRP、脑CGRP mRNA及蛋白水平均显著降低(P<0.05)。与I组比较,R1h组、R2h组血清ET-1水平升高(P<0.05),血清CGRP水平、脑组织CGRP mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.05);Pa+R1h组较I组的血清ET-1水平升高、脑组织CGRP mRNA水平下降(P<0.05);Pa+R2h组较I组的血清ET-1水平升高、脑组织CGRP mRNA及蛋白水平下降(P<0.05)。与R1h组、R2h组比较,Pa+R1h组和Pa+R2h组血清ET-1水平下降,血清CGRP、脑CGRP mRNA及蛋白水平均显著升高(P<0.05)。结论大鼠脑缺血再灌注损伤过程中ET-1表达上调,CGRP表达下降,Pa正丁醇提取物进行干预可降低ET-1、上调CGRP的表达。

KLF4在伽马刀照射所致大鼠放射性脑损伤中的作用机制

目的研究伽马刀立体定向照射大鼠正常脑组织后星形胶质细胞中KLF4及γ-H2AX随照射剂量变化的表达,探讨KLF4与放射性脑损伤的关系。方法成年雄性Wistar大鼠30只,按随机数字表法分为6组,每组5只,分别以不同照射剂量(0、10、20、30、40、50 Gy)照射大鼠右侧尾壳核,照射30 min后处死,并分析不同照射剂量下KLF4、γ-H2AX阳性细胞占星形胶质细胞的百分比,分析KLF4和γ-H2AX的表达与照射剂量之间、KLF4与γ-H2AX之间的线性回归关系。结果 KLF4、γ-H2AX阳性细胞占星形胶质细胞的百分比随照射剂量增加而上升(P<0.05),且KLF4、γ-H2AX的表达与照射剂量、KLF4与γ-H2AX均有显著线性关系(P<0.05)。结论 KLF4与辐射所致大鼠脑星形胶质细胞DNA双链损伤关系密切,其可能是辐射致DNA损伤的关键分子,通过引起DNA双链损伤导致放射性脑损伤。

经皮穿刺心室腔内注射术的研究进展

经皮穿刺心室腔内注射术,在临床抢救病人或人体解剖学专业灌注尸体常用。不宜损伤胸廓内血管、胸膜、肺及左冠状动脉前降支。心前区注射点在左侧第4或第5肋间间隙,距胸骨左缘旁开0.5-1.0cm处沿肋骨上缘刺入左心室腔。剑突下区点位于剑突左侧肋弓下1.0cm处,针尖朝心底方向,穿刺针与腹前壁成45℃角,刺入左或右心室腔内。本文就经皮穿刺心室腔内注射术的进展作一综述。

三七总甙对糖尿病皮肤溃疡大鼠单核细胞趋化蛋白-1水平的影响

目的观察三七总甙(PNS)对糖尿病皮肤溃疡(DSU)大鼠单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响。方法选择成年Wistar大鼠50只,随机分为对照组、DSU模型组和PNS高、中、低剂量处理组,每组10只。放射免疫法检测大鼠血清MCP-1水平,反转录-聚合酶链反应、Western blotting检测大鼠溃疡处组织中MCP-1的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血清MCP-1水平、溃疡处组织MCP-1 mRNA、蛋白水平显著升高(P<0.05);而PNS高、中、低剂量处理组血清MCP-1水平及溃疡处组织MCP-1 mRNA及蛋白水平均较模型组下降(P<0.05),且PNS高、中剂量处理组显著低于低剂量处理组(P<0.05),高剂量处理组显著低于中剂量处理组(P<0.05)。结论 PNS可降低MCP-1的表达,有效防治DSU的发生发展。

手术加中药对胫骨骨折术后疗效的影响

目的：探讨中药对胫骨骨折术后并发症的影响。方法110例胫骨骨折病人，分为中药干预组和对照组各55例，对照组常规手术治疗及术后处理，中药干预组在手术治疗的基础上对病人进行中药干预。结果：中药干预组的总有效率高于对照组（P〈0．05）；中药干预组患者的肢体瘀血、肿胀、伤口愈合等优于常规组，差异明显（P〈0．05）。中药治疗组患者肿胀消失时间平均（6．36±0．9）d，对照组（10．01±1．3）d，差异明显（P〈0．05）。结论：将中药应用于胫骨骨折可以降低并发症的发生率，有重要临床意义。

血管生成素及其受体Tie2在婴幼儿血管瘤表达的研究

目的研究婴幼儿血管瘤血管内皮细胞血管生成素及其受体Tie2的表达情况，初步探讨婴幼儿血管瘤生长异常的病理生理学机制，为其治疗奠定理论基础。方法以40例血管瘤患儿手术切除的血管瘤组织为研究对象，其中增生期和消退期标本各20例，另取正常皮肤组织（包茎患儿包皮环切术切除的包皮组织）20例作为正常对照。应用半定量PCR技术检测血管生成素-1（Angl）、血管生成素一2（Ang2）及其受体Tie2 mRNA表达情况；应用Western blotting技术检测Ang1、Ang2及其受体Tie2蛋白表达情况。结果Rt—PCR和Westem blotting结果均显示：在增生期和消退期瘤体中，Ang1 mRNA和蛋白的表达量明显低于正常包皮组织，P〈0．05；Ang2和Tie2 mRNA和蛋白的的表达量明显高于正常包皮组织，P〈0．05；三者的表达在增生期和消退期瘤体之间没有统计学差异，P〉0．05。结论婴幼儿血管瘤中存在Ang1、Ang2和Tie2的异常表达，可能参与了血管瘤的发生与发展机制。

多种高通量表达谱数据分析方法筛选大肠癌相关基因

【目的】联合多种表达谱数据分析方法,筛选大肠癌组织与正常大肠组织间的差异表达基因,寻找潜在的可能用于临床诊断与治疗的基因标志。【方法】应用CGAP数据库中的EST数据和SAGE数据筛选大肠癌相关基因,用v Northern对所选基因进行进一步筛选,然后与GEO中大肠组织基因表达谱芯片数据比较,得到表达一致的差异基因。进一步采用Real-time PCR在正常大肠组织和大肠癌组织中进行验证。【结果】应用c DNA DGED和SAGE DGED工具分别筛选出210个和216个基因,经v Northern分析,共获得68个差异表达基因,同芯片数据比较分析,获得3个候选基因(KLF6、FXYD3、BRI3),其中KLF6、FXYD3在大肠癌中表达下调(为正常大肠组织的0.34倍,0.18倍),BRI3在大肠癌中表达上调(为正常大肠组织的3.62倍)。Real-time PCR结果与联合多种表达谱数据分析结果一致。【结论】联合高通量表达谱数据库资源,结合多种数据分析方法,能快速高效地筛选可靠的大肠癌相关基因,对筛选基因进行实验验证,可能为大肠癌的临床诊断与治疗提供有价值的新的基因标志。