受体相互作用蛋白3对神经胶质瘤U251细胞增殖的影响

目的探讨受体相互作用蛋白3(RIP3)在神经胶质瘤细胞中的表达及其对U251细胞增殖的影响。方法采用实时定量PCR(real-time RT-PCR)法分别检测神经胶质瘤A172、U251、U373和U87细胞中RIP3的表达水平,随后应用U251稳定过表达RIP3(U251-RIP3)细胞模型,分别采用MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞仪评价细胞周期变化。结果 RIP3 mRNA在4株胶质瘤细胞(A172、U251、U373、U87)中均有表达,并在U251细胞中表达最低。real-time RT-PCR结果表明U251-RIP3细胞中稳定过表达RIP3,与阴性对照(空载)(NC)相比,RIP3过表达能够抑制U251细胞增殖能力;能够降低U251细胞克隆形成能力,培养11 d后细胞集落数目(67±2)较NC(75±3)减少(P<0.05);能够延缓细胞周期进程,U251-RIP3细胞的S期比例较NC组(16.0±0.4)%升至(18.2±1.0)%(P<0.05),同时G0/G1期比例较NC组(55.7±0.5)%降至(57.4±0.4)%(P<0.01)。结论 RIP3过表达后可抑制神经胶质瘤U251细胞增殖,有望成为靶向控制胶质瘤细胞增殖的潜在治疗靶点。

Ki-67、Bcl-2、Bax和Caspase-3在脑胶质瘤组织中的表达及临床意义

目的探讨脑胶质瘤患者瘤组织中Ki-67、Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达水平及临床意义。方法选取2014年10月~2016年10月武警后勤学院附属医院手术切除的65例脑胶质瘤组织切片。根据神经系统肿瘤分类将其分为低级别胶质瘤组34例和高级别胶质瘤组31例,另取18例正常脑组织切片标本作为对照组,比较3组标本组织中Ki-67、Bcl-2、Bax和Caspase-3表达水平,并分析其与胶质瘤恶性程度的相关性。结果随着胶质瘤病理级别的升高,Ki-67表达水平逐渐增强,在正常脑组织、低、高级别胶质瘤组中的表达阳性率分别为0、20.6%、77.4%,差异有统计学意义(P<0.05),二者呈正相关性(Spearman相关系数为0.645,P<0.05)。Bcl-2表达水平随着胶质瘤级别的升高而逐渐升高(6.2%、73.5%、100.0%),差异有统计学意义(P<0.05),二者呈正相关性(Spearman相关系数为0.711,P<0.05)。Bax表达水平随着脑胶质瘤级别的升高而逐渐降低(100.0%、82.4%、16.1%),差异有统计学意义(P<0.05),二者呈负相关性(Spearman相关系数为-0.706,P<0.05)。Caspase-3表达水平在低级别胶质瘤组最高(0、100.0%、80.6%),随病理级别的升高而逐渐降低(P<0.05),二者呈负相关性(Spearman相关系数为-0.334,P<0.05)。结论 Ki-67与Bcl-2表达水平的上调,Bax与Caspase-3表达水平的下调,提示胶质瘤病理级别越高。同时,根据Ki-67、Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达水平可对胶质瘤恶性程度进行判断,在一定程度上对患者预后评估具有重要指导意义。

哇巴因调控Akt/mTOR信号通路诱导U87-MG细胞死亡的机制研究

目的探讨哇巴因(ouabain)对人胶质瘤U87-MG细胞死亡的影响及具体机制。方法将培养的U87-MG细胞随机分为正常对照(Control)组和ouabain组,分别加入常规培养基和不同浓度ouabain(0.05、0.5、2.5、25μmol/L)干预24 h,光学显微镜观察ouabain干预后24 h细胞的形态改变,MTT实验检测细胞活力,免疫印迹法(Western blot)检测Akt、p-Akt、m TOR和p-m TOR的表达变化。结果与Control组比较,ouabain显著降低U87-MG细胞活力(均P<0.01),且呈现浓度依赖性;高浓度ouabain(2.5、25μmol/L)与Control组相比能够降低U87-MG细胞中p-Akt、m TOR和p-m TOR的表达(均P<0.01)。结论高浓度ouabain可能通过抑制胞内Akt/m TOR信号通路,降低肿瘤细胞活力并最终引起细胞死亡。

受体相互作用蛋白-3分子功能及其在神经疾病中的研究进展

细胞死亡一直以来被简单分为凋亡和坏死两种主要形式,其中坏死被公认为是组织细胞受到损害因素下发生的被动、不可逆、非调控性的死亡过程。然而最新的研究证实,在某些特定条件下坏死仍可受到调控并具有被逆转的可能,这种新型细胞死亡方式被称为程序性坏死。程序性坏死途径参与了生物体的生长发育、衰老和死亡等生理学进程,尤其在多种神经系统疾病(颅脑创伤、感染、神经退行性病变)的发生、发展中扮演了重要角色。受体相互作用蛋白-3(RIP3)作为细胞凋亡和坏死之间相互转换的关键性分子,在介导神经细胞损伤的程序性坏死、NF-κB通路激活以及诱发线粒体活性氧自由基(ROS)的生成等机制中发挥着重要作用。本文就RIP3的分子功能及其与神经疾病的关系进展予以综述。

受体相互作用蛋白3在炎症中的作用

疾病的发生往往伴随着炎症反应,并进一步加剧病情,因此炎症研究对疾病的控制和治疗有重要意义。受体相互作用蛋白3(RIP3)是炎症反应的关键分子,在炎症的发生、发展过程中起到重要作用。其中,一种形式是RIP3在肿瘤坏死因子、干扰素、脂多糖或病原微生物的刺激下,通过诱导坏死性凋亡介导炎症反应;另一种是RIP3促炎因子产生而引起的炎症反应。

神经突触核蛋白-γ质粒转染胶质瘤细胞及其过表达对紫杉醇耐药性的影响

目的探讨胶质瘤细胞U87中神经突触核蛋白-γ(synuclein-γ,SNGG)过度表达对紫杉醇耐药的影响。方法 U87/SNCG组采用pIRES2-EGFP-SNCG真核表达载体转染U87胶质瘤细胞,构建稳定转染SNCG的U87/SNCG细胞系,U87/neo对照组采用pIRES2-EGFP空载质粒转染U87胶质瘤细胞,构建U87/neo细胞系。采用G418选择培养稳定转染的U87/neo和U87/SNCG细胞系,采用反转录实时定量聚合酶链反应和免疫荧光染色技术鉴定成功后,2组分别于紫杉醇作用6、12、18、24h时检测细胞增殖抑制率,采用流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡细胞比例,采用免疫荧光染色法观察细胞形态学变化。结果成功构建U87/SNCG细胞系;U87/SNCG组SNCG mRNA表达较U87/neo对照组上调9.06倍;紫杉醇作用24h时,U87U/SNCG组细胞增殖抑制率[(25.49±2.44)%]和凋亡细胞比例[(7.02±0.26)%]明显低于U87/neo对照组[(34.36±2.95)%、(14.93±1.53)%](P<0.05);紫杉醇作用6h时,U87/SNCG组细胞G2/M期比例[(22.87±0.60)%]低于U87/neo对照组[(26.75±2.70)%](P<0.01);随着紫杉醇作用时间延长,与U87/SNCG组比较,U87/neo对照组细胞总数减少,细胞散落浮于培养液中,出现透明空泡、崩解细胞,并可见大量核固缩、核碎裂之凋亡现象。结论 SNCG过表达可降低抗微管药物诱导的U87细胞有丝分裂期阻滞,增强胶质瘤细胞的增殖能力和抗凋亡能力。

血必净注射液对重症肺炎患者血浆IL-6和TNF-α水平的影响

目的探讨血必净注射液对重症肺炎患者血浆中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法将100例重症肺炎患者按随机数字表法分为对照组(50例)和治疗组(50例)。两组均给予常规西医治疗,治疗组在常规西医治疗的基础上加用血必净注射液治疗,连续用药7 d。取10名身体健康的人员作为正常对照组。比较对照组和治疗组患者治疗前后体温、白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)、动脉血氧分压[pa(O_2)]和动脉血气分析氧合指数[pa(O_2)/Fi(O_2)]的变化。采用ELISA法测定并比较各组患者各时间点血浆中IL-6和TNF-α的水平。结果治疗7 d后,治疗组和对照组患者的体温、WBC、CRP、pa(O_2)和pa(O_2)/Fi(O_2)均较治疗前有明显改善,差异显著(P<0.01)。治疗组患者治疗后各项指标均较对照组治疗后有明显改善,差异显著(P<0.05、0.01);对照组和治疗组患者治疗前后血浆中IL-6和TNF-α均明显高于正常对照组。治疗前,对照组和治疗组患者血浆中IL-6、TNF-α的水平相比较,差异无统计学意义;两组患者治疗后3、7 d的IL-6和TNF-α水平均较治疗前降低,治疗组IL-6和TNF-α水平的下降程度较对照组同期更明显,差异显著(P<0.05、0.01)。结论血必净注射液可以降低重症肺炎患者血浆中IL-6和TNF-α水平,对重症肺炎患者有一定辅助治疗作用。