武警某部医院碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌的耐药基因分析

目的检测临床碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(carbapenemresistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)感染的耐药基因,为治疗和防控提供依据。方法采用回顾性调查方法,收集2017-08至2020-03分离自武警四川总队医院13个科室的32株CRKP,用Microscan.Walk Away96全自动细菌鉴定药敏分析仪进行常规药敏试验,改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)联合酶抑制剂增强试验判断其产金属β-内酰胺酶和丝氨酸碳青霉烯酶的情况。Gene-Xpert Carba-ⅩⅤⅠR2全自动病原体快速检测系统检测耐药基因。结果药敏结果显示我院CRKP对碳青霉烯类、头孢类、头霉素类、单环类、喹诺酮类、氨基糖苷类等抗菌药物均表现出较高耐药性。32株CRKP mCIM结果30株阳性;酶抑制剂增强试验结果表明,1株肺炎克雷伯菌产A类丝氨酸酶加B类β-内酰胺酶,其余29株产A类丝氨酸酶;GeneXpert检测耐药基因,30株mCIM试验结果阳性的菌株中1株肺炎克雷伯菌产KPC+NDM,其余29株均产KPC,没有产IMP,VIM,OX-48的菌株。结论该院CRKP对常用抗菌药物表现出高水平耐药,耐药机制主要为产碳青霉烯酶,耐药基因型主要为KPC型。在没有条件进行基因型分析的基层单位mCIM试验协同酶抑制剂增强试验能够满足临床需要。

海拔高度对武警战士脂质过氧化与抗氧化系统的影响

[目的]探讨海拔高度对机体脂质过氧化与抗氧化系统的影响。[方法]选择144名武警战士作为调查对象 ,其中高原组78名 ,平原组66名。采用南京建成生物研究所试剂盒检测血浆或血清中一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶(NOS)、活性氧 (ROS)、丙二醛 (MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH_Px)、谷胱甘肽S_转移酶 (GSH_ST)、超氧化物歧化酶 (SOD)的含量或活力。[结果]与平原组相比 ,高原组GSH含量下降 ,GSH_Px、GSH_ST、SOD含量或活力升高 ,差异具有显著性(P<0.05) ;NO、NOS、ROS、MDA差异无显著性(P>0.05)。GSH含量的多少是影响机体抗氧化能力大小的重要因素,GSH含量的降低 ,提示机体清除氧自由基的能力已有所下降 ;GSH_Px、GSH_ST、SOD含量或活力升高可能是机体代偿性反应的结果。

高原地区成年男性血常规参数差异性及红细胞增多症发病率分析

目的探讨四川高原地区不同海拔血常规各项指标的差异性及高原红细胞增多症的发病率。方法抽取乐山、康定、甘孜、石渠等4个海拔高度的成年男性标本,检测血常规中白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白浓度(Hb)、血小板(PLT)等8项指标;分析各组血常规指标之间是否有统计学差异,分析甘孜、石渠地区红细胞增多症发病率的差异。结果不同海拔高度之间,除外MCV、MCHC,其他血常规指标均有统计学差异;甘孜、石渠地区红细胞增多症发病率有统计学差异。结论高原藏区血常规各项参数的参考范围应依据当地情况建立;应加强对3000 m以上地区人员高原红细胞增多症的防治。

HSP70-hom基因多态性与高原反应易感性的关系

目的 探讨热应激或热休克蛋白 70 hom (HSP70 hom)基因型与高原反应易感性间的关系 ,为发现和保护易感人群提供依据。方法 随机选取武警战士 2 2 9人 ,其中 5 6人有高原反应者为病例组 ,173人无高原反应者为对照组。应用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)分析方法 ,研究两组观察对象中HSP70 hom的基因型分布情况。结果 病例组HSP70 homA/A基因型的频率明显高于对照组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 HSP70 homA/A基因型的机体可能存在应激能力较弱的问题 ,这有助于在特定职业人群中发现和保护这些个体 ,为保障健康 。

高原驻训官兵1097人外周血淋巴细胞比例变化分析

高原低氧分压、高风速、紫外线辐射强、寒冷及昼夜温差波动大等气候特点给驻训官兵身体造成一定损害.为研究高原驻训官兵不同海拔高度,不同时间进驻对机体影响情况,笔者对1097名官兵进行了血常规检查,并对淋巴细胞比例变化情况进行了分析.

红霉素治疗稳定期慢性阻塞性肺病患者的远期疗效观察

目的:研究红霉素长期治疗对慢性阻塞性肺病(COPD)患者的急性发作次数、肺功能和痰液中白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响并探讨其临床意义。方法:选择我院门诊稳定期COPD患者37例随机分为治疗组(20例)和对照组(17例)。治疗组给予红霉素250mg,1次/d,对照组给予安慰剂,1次/d,两组疗程均为12个月。所有患者包括吸氧,按需或定时支气管扩张药吸入,茶碱口服等治疗措施相同。于试验开始前一天及试验结束日测定肺功能,ELISA法检测痰液IL-8、TNF-α含量,记录患者12个月内急性发作的次数。结果:两组患者治疗前年龄、FEV1、FEV1预计值、年均急性发作次数和痰液中IL-8、TNF-α水平比较无统计学差异。在为期12个月的试验过程中,治疗组急性发作次数较对照组明显下降(P<0.01)。试验结束日治疗组痰IL-8水平(0.22±0.05)μg/L、TNF-α水平(0.31±0.14)μg/L较对照组痰IL-8水平(0.42±0.17)μg/L、TNF-α水平(0.52±0.24)μg/L明显下降(P<0.05)。两组患者试验结束后FEV1、FEV1预计值差异无显著性(P>0.05)。结论:红霉素通过抗炎作用减轻支气管炎症反应从而达到减少COPD患者急性发作次数的效果。

脂血和溶血对HBV DNA实时荧光定量PCR检测的影响

目的探讨溶血和脂血两种因素对HBV DNA实时荧光定量PCR方法的影响。方法 (1)收集临床HBV DNA标本,按HBV DNA浓度分为Ⅰ水平、Ⅱ水平;收集HBV DNA阴性的重度乳糜状脂血标本和正常人标本。将以上标本按不同比例混合,制作成极高TG浓度不同HBV DNA水平:AⅠ、AⅡ组;高TG浓度不同HBV DNA水平:BⅠ、BⅡ组;正常TG浓度不同HBV DNA水平:CⅠ、CⅡ组。实时荧光定量PCR扩增。(2)收集临床HBV DNA标本,每人采集3份血标本,其中2份标本进行-20℃冷冻不同时间,制成重度溶血DⅠ、DⅡ组;中度溶血EⅠ、EⅡ组;无溶血对照组FⅠ、FⅡ组。实时荧光定量PCR扩增。(3)利用方差分析各检测结果之间是否有统计学差异。结果不同浓度脂血和溶血,对两种水平HBV DNA荧光定量PCR检测结果均无统计学差异。结论溶血和脂血对实时荧光定量PCR检测HBV DNA结果无影响。

TGFβ_1和TNFα水平与肺间质纤维关系及其临床意义

目的探讨转化生长因子(TGFβ1)和肿瘤坏死因数(TNFα)与肺间质纤维化(IPF)活动的关系。方法用放射免疫法检测13例肺间质纤维化患者和10名健康者支气管肺泡灌洗液(BALF)中TGFβ1和TNFα水平。结果13例IPF患者BALF中TGFβ1和TNFα分别为35.04±12.76ng/L和12.7±3.9ng/L,明显高于对照组15.11±3.05和7.28±2.14(P<0.01)。结论TGF1和TNFα在IPF发病中起重要作用,其水平可作为肺泡炎活动性标志,阻断细胞因子作用环节可能为一种有前途的预防和治疗方法。

血清25(OH)D3、IgE及IL-10表达水平对婴幼儿呼吸道合胞病毒毛细支气管炎的诊断价值

毛细支气管炎是婴幼儿较为常见的下呼吸道感染性疾病之一,患儿临床症状与肺炎类似,但主要表现为憋喘,甚至反复的喘息发作,可发展为哮喘[1]。引起毛细支气管炎的主要病原体种类较多,病毒、细菌、支原体均可导致毛细支气管炎,但超过80%的致病病原体为呼吸道合胞病毒(RSV)。维生素D、IgE及IL-10与人体内免疫系统功能调节的相互作用近年来越来越受到关注,它们在婴幼儿毛细支气管炎的发生、发展过程中也发挥着重要的作用[2]。

三种方法检测乙型肝炎表面抗原的临床应用及评价

目的对3种不同检测方法即时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)、酶联免疫吸附法(ELISA)、胶体金法(ACON)就检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的结果进行分析。方法 198例乙型肝炎患者为试验组,126例非乙型肝炎患者为对照组,分别用以上3种方法同时检测HBsAg并对检测结果进行分析。结果 3种检验方法的灵敏度及特异性由高到低依次是:TRFIA、ELISA、ACON。结论 ACON成本低廉,时效快但灵敏度偏低,可作为一般性初筛,不能作为确诊依据。ELISA成本低,操作简便、灵敏度高、能基本满足临床需要,可作为定性检测HBsAg为临床诊断和基础研究提供可靠的实验依据。TRFIA成本高、试剂稳定性好、灵敏度高、特异性好,能定量检测血样中HBsAg的浓度,常被用作乙型肝炎病毒感染的确诊实验。

肝癌组织HCC-X基因表达和相关标志蛋白NMR^1H谱特征

目的 :采用信息探针获取正常肝、肝旁组织和肝癌HCC XmRNA的表达信息 ;采用NMR1H谱分析技术捕获非癌性肝占位相关Pr谱学特征 ,探讨其规律和临床价值 .方法 :将获得的全长基因用u 12 P DATP标记为探针 ,用3 2 P HCC X杂交MTNblot膜片进行Westernblot检测基因表达功能 ;用NMR1H谱仪分析 19种单体氨基酸的化学位移等参数 ,以《Handbookofproton NMRspectraandData》氨基酸图谱为参比 ,设置适宜的解析条件 .结果 :转染BEL74 0 2肝癌细胞的体外克隆形成实验表明 ,HCC X对其细胞在体内生长有明显抑制作用 ,在肝癌组织中为低表达或无表达 ,与正常组织比较有显著性差异P <0 .0 1;NMR1H分析 19种单体aa,14种完全相符 ,1种相似 ,TrP和HiS分别为首次获得 .结论 :HCC X可能是肝癌的致病基因 ,与其高度同源性的HFARP具有抑制血管内皮细胞凋亡的作用 ;NMR1H谱分析相关标志Pr的条件可满足指纹区信息捕获要求 。

某院2013-2015年细菌耐药性监测

目的调查我院2013-2015年临床分离细菌的菌群分布和耐药情况,为临床经验性用药提供依据。方法收集我院2013-2015年临床分离细菌,将所有细菌分离鉴定到种并进行药敏试验,对结果进行回顾性分析。结果我院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分离率、大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶分离率和铜绿假单胞菌耐碳青霉烯类的检出率均呈下降趋势。耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌检出率和鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类的检出率呈上升趋势。大肠埃希菌对氨苄西林、哌拉西林耐药率较高(>75%),对碳青霉烯类和β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制药复合物耐药率较低。肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对常用抗菌药物耐药率均较低(<40%)。铜绿假单胞菌对常用抗菌药物耐药率很低(<30%)。鲍曼不动杆菌对除复方新诺明和头孢哌酮/舒巴坦外的药物耐药率均较高(>75%)。凝固酶阴性葡萄球菌耐药性较金黄色葡萄球菌耐药性高。高水平氨基糖苷类耐药的肠球菌检出率低。结论我院2013-2015年主要病原菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌等为主。我院的细菌检出及耐药情况与全国细菌耐药检测网报道有差异。开展耐药监测并及时统计分析本医院的数据对指导临床合理用药、控制和治疗院内感染具有重要意义。

脂血对实时荧光定量PCR实验结果影响的研究

荧光定量PCR是聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）中的一种，因其方法学的高灵敏度、高特异性、简便、快速等特点，目前在临床上有了广泛的应用，并且在病原微生物领域中显示出了巨大的应用价值和广阔的发展前景。

三酰甘油 总胆固醇试剂对总胆汁酸测定结果的影响分析

目的探讨三酰甘油(TG)与总胆固醇(TC)试剂对血清总胆汁酸(TBA)检测结果的影响及解决办法。方法收集健康体检者标本血清10份,分别使用两种方法测定血清TBA的含量。第一种方法分别在血清中加入少量的TG和TC,然后再测定血清TBA的含量。第二种方法则在血清中加入少量的生理盐水作为对照组,然后测定血清TBA含量。最后再对TC和TG试剂进行同样的TBA含量的测定。结果加入少量生理盐水的10份血清标本的TBA结果均值为7.2μmol/L;而分别加入少量TG和TC的血清样本检测结果均值分别为13.5μmol/L和14.3μmol/L,这两种方法测定所得的TBA结果差异有统计学意义(P<0.05)。TC和TG试剂中也测出含有TBA。结论通过特殊清洗液的清洗,可以有效减少TG与TC试剂对TBA值检测的影响。

IGRA检测在结核病诊断中的价值探讨

目的评价IGRA试剂A.TB在结核诊断中的应用价值。方法收集2014年7月至2016年8月在我院住院的284例患者的临床资料,分为结核病组162例(肺结核112例,肺外结核50例),非结核病组122例。分别进行A.TB、结核抗体TB-Ab、痰涂片和结核菌素TST等试验检查。结果结核病组A.TB阳性率90.12%,明显高于结核抗体TB-Ab(59.88%)、痰涂片(19.14%)、TST(64.20%),差异显著有统计学意义(P<0.01);非结核组A.TB的阳性率17.21%,TB-Ab阳性率36.89%,痰涂片为0,TST为33.61%。A.TB敏感性显著高于其它检测方法,特异性显著高于结核抗体试验和结核菌素试验。A.TB的阳性预测值87.43%,阴性预测值86.31%。结论 A.TB在结核病快速高准确率诊断中具有较高的实用价值,有利于提高各级医院的诊断水平。

三维正脊与传统牵引治疗腰椎间病的疗效评价

2006年10月-2008年10月,我们分别采用三维正脊仪及传统人工牵引仪,对280例腰椎间盘膨（突）出症、腰椎后关节紊乱症等＂腰椎间病＂进行治疗,介绍如下。

免疫细胞亚群与多发性骨髓瘤临床预后因子相关性研究

目的探讨免疫细胞亚群与多发性骨髓瘤临床预后因子相关性。方法我院收治的32例多发性骨髓瘤患者,根据年龄不同分为45～60岁组(18例)和60岁以上组(14例),选取同年龄段的健康者作为对照,分别为62例和42例。各组采用流式细胞仪进行淋巴细胞亚群免疫表型检测,采用荧光原位杂交技术进行细胞遗传学危险度分层,采用免疫比浊法检测β2-MG水平。结果与对照组比较,不同年龄段的两组患者CD8^+HLADR^+/CD8^+百分比、CD8^+CD38^+/CD8^+百分比明显升高(P <0. 05),CD4^+CD28^+/CD4^+百分比明显降低(P <0. 05);细胞遗传学(FISH)高危组CD8^+T淋巴细胞、CD8^+HLADR^+/CD8^+细胞占比高于FISH无高危组,CD4^+CD28^+/CD4^+细胞占比低于FISH无高危组(P <0. 05); CD8^+细胞百分比、CD8^+HLADR^+/CD8^+百分比与血清β2-MG水平呈正相关,CD4^+CD28^+/CD4^+百分比与β2-MG呈负相关(P <0. 05)。结论多发性骨髓瘤外周血CD4^+T细胞功能缺陷,CD8^+T淋巴细胞异常增生以及CD8^+T细胞功能异常活化与细胞遗传学危险度分层及预后存在一定的相关性,这可能成为疾病预后的判断指标,值得临床深入研究。

胶体金试纸条检测血清β-HCG协同定量

目的:探讨血清β-HCG检测时,血清预测稀释方法。方法:用β-HCG胶体金定性试纸条对血清标本进行检测,根据结果来确定稀释倍数(阴性标本不作稀释,弱阳性标本作50倍稀释,阳性标本作100倍稀释,强阳性标本作200倍稀释)。结果:根据β-HCG胶体金定性试纸条检测结果能够决定血清中β-HCG定量前的稀释倍数。结论:β-HCG胶体金定性试纸条可用于初步判断血清β-HCG的定量检测的标本稀释倍数,大大提高一次检出率。

凋亡蛋白Daxx与TRAF3相互作用的筛选及相互作用位点的鉴定

目的:利用酵母双杂交技术在成人肝文库中筛选能与死亡结构域相关蛋白(Daxx)相互作用的蛋白,并用哺乳动物细胞中进行了免疫共沉淀验证,以进一步了解Daxx的功能.方法:利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增Daxx全长ORF,构建pDBLeu-Daxx载体.转化MaV203,检测细胞毒性和自激活作用,确定His基础表达的3AT浓度.依次转化成人肝cDNA文库.在营养缺陷型培养基上挑取三阳性克隆.进行回转实验和免疫共沉淀验证,并利用β-gal分析进行了相互作用结构域的鉴定.结果:筛库转化效率达到5.8×106个克隆.筛选到了一株能与Daxx相互作用的阳性克隆,DNA序列分析和同源检索表明该阳性克隆为肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3).通过回转及co-IP证实了TRAF3能与Daxx相互作用,β-gal分析发现TRAF3通过TRAFDomain与Daxx相互作用.结论:TRAF3通过TRAFDomain与Daxx相互作用,可能参与了Daxx的调控和功能,为进一步了解Daxx作用的分子机制奠定了基础.