活性氧对兔肝癌组织的作用

目的研究活性氧对肝癌缺血再灌注(I/R)后的损伤作用。方法建立兔肝脏肿瘤模型,并于肝缺血再灌注和经门静脉穿刺一次性灌注高氧液(氧分压为80kPa)5 mL后1 h,1 d,3 d和7 d各时点分别取肿瘤组织和肝脏组织,测定超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的含量。用TUNEL染色法观察组织的细胞凋亡情况。结果单纯I/R后正常肝组织和肝癌组织中的SOD浓度均有明显下降,正常肝脏组织CAT浓度均有所升高,肝癌组织中于再灌注1 d CAT浓度显著降低并达最低水平。恢复血流同时经门静脉灌注高氧液后,正常肝组织及肝癌组织中SOD浓度均较I/R各个时点明显降低,但再灌注7 d时仍低于再灌注前。两种组织中的CAT浓度于I/R 1 h下降达最低,但从再灌注3 d以后,正常肝组织中的CAT浓度回升至正常水平,而再灌注7 d时肝癌组织中的CAT浓度仍处于较低水平。I/R后正常肝组织和肝癌组织的凋亡细胞增多,肝癌组织中细胞凋亡在灌注高氧液后1 d和3 d最为显著。I/R和灌注高氧液后,肝癌组织中SOD和CAT的浓度和凋亡细胞改变均较正常肝组织显著(P<0.01)。结论经门静脉灌注高氧液可加强I/R对肝癌组织的氧化改变和损伤,而对正常肝脏组织的影响较小。

结核分枝杆菌融合蛋白和分泌蛋白对人肝癌细胞HepG-2影响和作用

目的探讨结核分枝杆菌融合蛋白对人肝癌细胞HepG-2的抑制作用。方法构建含3种目的基因的表达载体pProEXHTa-Ag85B-Hsp16.3、pProEXHTa-Ag85B-ESAT6和pProEXHTb-Hsp16.3,分别转入宿主菌E.coli DH5α中,诱导表达后分别获得Ag85B-Hsp16.3、Ag85B-ESAT6和Hsp16.3三种蛋白,纯化后复性。分别作用于肝癌细胞HepG-2,MTT法检测细胞生长情况。结果成功纯化并复性三种蛋白。MTT实验结果显示,三种蛋白均对HepG-2细胞的生长具有抑制作用,抑制强度与蛋白终浓度和作用时间相关,但各蛋白的抑制作用无明显差异。结论结核分枝杆菌的部分分泌蛋白对肝癌细胞HepG-2具有抑制作用。